| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 1 绪论:调节性T细胞研究进展 | 第11-30页 |
| ·调节性T细胞的研究历史 | 第11-12页 |
| ·调节性T细胞的分类 | 第12-21页 |
| ·自然发生CD4~+CD25~+Treg细胞 | 第13-17页 |
| ·自然发生CD4+CD25+Treg细胞的发育 | 第13-14页 |
| ·自然发生CD4~+CD25~+Treg细胞的表型 | 第14-16页 |
| ·自然发生CD4~+CD25~+Treg细胞的抑制作用 | 第16-17页 |
| ·诱导型调节性T细胞 | 第17-20页 |
| ·Tr1细胞 | 第18-19页 |
| ·Th3细胞 | 第19-20页 |
| ·其它调节性T细胞 | 第20-21页 |
| ·NKT细胞 | 第20页 |
| ·γδT细胞 | 第20页 |
| ·CD8~+T细胞 | 第20-21页 |
| ·调节性T细胞的抑制机制 | 第21-22页 |
| ·调节性T细胞与人类疾病研究 | 第22-28页 |
| ·Treg细胞与自身免疫疾病 | 第23-26页 |
| ·系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE) | 第23-24页 |
| ·Ⅰ型糖尿病(insulin-dependent diabetes mellitus,IDDM) | 第24-25页 |
| ·炎症性肠炎(inflammatory bowel disease,IBD) | 第25页 |
| ·类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA) | 第25-26页 |
| ·其它自身免疫疾病 | 第26页 |
| ·Treg细胞与肿瘤免疫 | 第26-28页 |
| ·Treg细胞诱导肿瘤耐受机制 | 第26-27页 |
| ·Treg细胞与肿瘤治疗 | 第27-28页 |
| ·Treg细胞与移植耐受 | 第28页 |
| ·Treg细胞与病原感染 | 第28页 |
| ·调节性T细胞小结 | 第28-30页 |
| 2 实验研究:鱼类CD4分子研究 | 第30-75页 |
| ·鱼类CD4分子克隆及鉴定 | 第30-45页 |
| ·材料与方法 | 第30-35页 |
| ·实验鱼 | 第30-31页 |
| ·菌株与试剂 | 第31页 |
| ·数据库及软件 | 第31页 |
| ·生物信息学预测及分析 | 第31页 |
| ·总RNA提取及cDNA合成 | 第31-32页 |
| ·河豚鱼及斑马鱼CD4基因分子克隆 | 第32-33页 |
| ·T-A克隆 | 第33-35页 |
| ·测序鉴定 | 第35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-45页 |
| ·河豚CD4基因克隆 | 第35-38页 |
| ·斑马鱼CD4基因克隆 | 第38-40页 |
| ·河豚及斑马鱼CD4基因结构分析 | 第40-41页 |
| ·鱼类CD4序列比对及进化分析 | 第41-45页 |
| ·河豚鱼CD4分子重组蛋白表达及多克隆抗体制备 | 第45-53页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·菌株与试剂 | 第45页 |
| ·河豚CD4-2及CD4-4重组质粒构建 | 第45-47页 |
| ·融合蛋白表达 | 第47页 |
| ·融合蛋白包涵体纯化 | 第47-48页 |
| ·河豚抗CD4-2及CD4-4多抗制备 | 第48页 |
| ·间接ELISA法测定抗血清效价 | 第48-49页 |
| ·多克隆抗体的特异性检测 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-53页 |
| ·重组质粒构建 | 第50-51页 |
| ·河豚CD4分子胞外区序列重组表达 | 第51-52页 |
| ·河豚CD4-2及CD4-4多抗制备 | 第52-53页 |
| ·河豚鱼CD4配体分子 | 第53-64页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·实验动物 | 第54页 |
| ·河豚IL-16及MHC-Ⅱ分子克隆及鉴定 | 第54页 |
| ·河豚IL-16重组蛋白 | 第54-55页 |
| ·河豚淋巴细胞分离 | 第55-56页 |
| ·IL-16趋化试验 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-64页 |
| ·河豚IL-16基因 | 第56-59页 |
| ·河豚IL-16序列分析 | 第59-62页 |
| ·河豚MHC-Ⅱ β2结构域克隆 | 第62页 |
| ·河豚IL-16重组蛋白表达及纯化 | 第62-63页 |
| ·IL-16趋化作用 | 第63-64页 |
| ·鱼类CD4分子功能分工 | 第64-73页 |
| ·材料与方法 | 第64-67页 |
| ·抗体与试剂 | 第64页 |
| ·免疫细胞化学 | 第64-65页 |
| ·流式细胞术 | 第65页 |
| ·磁珠分选河豚CD4阳性细胞 | 第65页 |
| ·河豚CD4阳性细胞分析 | 第65-66页 |
| ·共进化分析 | 第66-67页 |
| ·淋巴细胞体内增殖试验 | 第67页 |
| ·抗体封闭试验 | 第67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-73页 |
| ·河豚CD4阳性淋巴细胞群体分析 | 第67-69页 |
| ·CD4及其配体共进化分析 | 第69-72页 |
| ·CD4-2~+CD4-4~+细胞增殖试验 | 第72页 |
| ·鱼类IL-16趋化CD4-2~+细胞 | 第72-73页 |
| ·鱼类CD4分子小结 | 第73-75页 |
| 3 实验研究:鱼类Treg细胞亚群鉴定 | 第75-96页 |
| ·鱼类Treg细胞标志分子foxp3鉴定 | 第75-80页 |
| ·材料与方法 | 第75-77页 |
| ·实验动物 | 第75页 |
| ·河豚foxp3分子克隆及鉴定 | 第75页 |
| ·河豚foxp3组织分布 | 第75-76页 |
| ·河豚foxp3原位杂交(in situ hybridization,ISH) | 第76-77页 |
| ·结果与讨论 | 第77-80页 |
| ·河豚foxp3基因 | 第78-79页 |
| ·河豚foxp3分布 | 第79-80页 |
| ·鱼类Treg细胞表型鉴定 | 第80-84页 |
| ·材料与方法 | 第80-81页 |
| ·抗体与试剂 | 第80页 |
| ·抗体交叉反应检测 | 第80-81页 |
| ·免疫细胞化学 | 第81页 |
| ·流式细胞术 | 第81页 |
| ·鱼类Treg细胞分析 | 第81页 |
| ·结果与讨论 | 第81-84页 |
| ·抗体特异性检测 | 第81-82页 |
| ·河豚中CD4~+CD25~+foxp3~+淋巴细胞 | 第82-84页 |
| ·鱼类Treg细胞功能鉴定 | 第84-93页 |
| ·材料与方法 | 第84-87页 |
| ·抗体与试剂 | 第84页 |
| ·体外及体内移除Treg细胞 | 第84-85页 |
| ·混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR) | 第85页 |
| ·非特异性细胞毒细胞(nonspecific cytotoxic cell,NCC)杀伤效应 | 第85-86页 |
| ·鱼类炎症性肠炎模型 | 第86-87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-93页 |
| ·鱼类CD4~+CD25~+细胞的体外免疫抑制作用 | 第87-90页 |
| ·体内移除CD4~+CD25~+细胞引发鱼类肠炎 | 第90-93页 |
| ·鱼类Treg细胞小结 | 第93-96页 |
| 4 参考文献 | 第96-107页 |
| 作者简历 | 第107页 |
