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间充质干细胞跨越分化肝细胞及其参与肝脏损伤修复的探索研究

致谢第1-6页
摘要第6-7页
ABSTRACT第7-11页
缩写、符号清单、术语表第11-13页
1 文献综述第13-32页
   ·间充质干细胞的研究进展第13-24页
     ·引言第13页
     ·研究背景及生物学特性第13-16页
     ·来源和可塑性第16-17页
     ·功能第17-22页
     ·相关的病理学及应用前景第22-24页
     ·总结第24页
   ·间充质干细胞与肝脏疾病第24-32页
     ·引言第24-25页
     ·肝细胞再生生理学第25页
     ·间充质干细胞向肝实质细胞的跨越分化第25-29页
     ·间充质干细胞向肝脏非实质细胞的分化第29页
     ·招募间充质干细胞到损伤肝脏的关键因子第29-30页
     ·间充质干细胞在肝脏疾病中的临床应用前景第30-31页
     ·总结第31-32页
2 实验研究第32-94页
   ·小鼠骨髓间充质干细胞体外跨越分化肝细胞的研究第32-66页
     ·前言第32-33页
     ·材料与试剂第33-34页
     ·实验方法第34-46页
       ·小鼠骨髓间充质干细胞(mBM-MSCs)的分离、培养及鉴定第34-36页
       ·mBM-MSCs体外跨域分化为肝实质样细胞诱导体系的建立第36-41页
         ·损伤肝脏条件培养液诱导体系第36-37页
         ·肝细胞条件培养液诱导体系第37-38页
         ·胎肝条件培养液诱导体系第38页
         ·诱导后肝实质样细胞的鉴定第38-41页
       ·肝脏损伤条件培养液诱导体系关键因子的鉴定第41-43页
       ·细胞因子组合诱导体系的优化与改进第43-46页
         ·分步法诱导体系第43-44页
         ·组蛋白去乙酰化酶抑制剂VPA预处理诱导体系第44页
         ·分化后肝样细胞的鉴定第44页
         ·VPA促进mBM-MSCs向肝实质细胞分化的机理研究第44-46页
       ·统计学方法第46页
     ·实验结果第46-61页
       ·mBM-MSCs的分离,培养及鉴定第46-48页
       ·mBM-MSCs体外跨越分化为肝实质细胞诱导体系的建立第48-52页
         ·损伤肝脏条件培养液诱导mBM-MSCs分化为肝样细胞第48-49页
         ·肝细胞条件培养液诱导mBM-MSCs分化为肝样细胞第49-51页
         ·胎肝条件培养液诱导mBM-MSCs分化为肝样细胞第51-52页
       ·肝脏损伤条件培养液中关键诱导因子的鉴定第52-54页
       ·HGF、FGF4和OSM细胞因子组合诱导mBM-MSCs分化为肝细胞第54-55页
       ·组蛋白乙酰化酶抑制剂VPA对细胞因子组合诱导体系的改进及其机理第55-60页
       ·小鼠骨髓间充质干细胞来源的肝细胞的扩增培养第60-61页
     ·讨论第61-66页
   ·小鼠骨髓间充质干细胞体内参与肝脏修复的研究第66-94页
     ·前言第66-67页
     ·材料与试剂第67页
     ·实验方法第67-72页
       ·eGFP~+小鼠骨髓间充质干细胞的分离,培养及鉴定第67页
       ·外周血中间充质干细胞的分离,培养及鉴定第67-68页
       ·小鼠骨髓间充质干细胞的体外迁移第68-70页
         ·体外趋化实验(Boyden Chamber Assay)第68-69页
         ·抗体中和实验(Neutralization studies)第69页
         ·体外划痕修复实验(In vitro wound healing analysis)第69页
         ·体外小管形成实验(In vitro tubule formation assay)第69-70页
       ·骨髓间充质干细胞的体内迁移第70-72页
         ·尾静脉移植(Tail vain injection)追踪实验第70页
         ·活体动物分子成像技术第70页
         ·石蜡切片技术:组织包埋和切片第70页
         ·H.E染色第70-71页
         ·苦味酸天狼猩红染色第71页
         ·冰冻切片技术:组织包埋和切片第71页
         ·骨髓腔移植(Intra-bone marrow injection)追踪实验第71-72页
       ·统计学方法第72页
     ·实验结果第72-90页
       ·eGFP~+ mBM-MSCs的分离,培养及鉴定第72-73页
       ·外周血中间充质干细胞的分离,培养及鉴定第73-77页
       ·骨髓间充质干细胞的体外迁移第77-79页
       ·骨髓间充质干细胞的体内迁移第79-88页
         ·骨髓腔移植(Intra-bone marrow injection)追踪实验第79-81页
         ·MSCs进入肝脏后的命运第81-84页
         ·骨髓间充质干细胞向肝脏趋化关键因子的鉴定第84-88页
       ·组蛋白去乙酰化酶抑制剂VPA对mBM-MSCs移植的影响第88-90页
     ·讨论第90-94页
3 结论第94-96页
PCR引物汇总第96-98页
参考文献第98-107页
作者简历第107-108页

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