| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-20页 |
| ·猪圆环病毒简介 | 第12-15页 |
| ·猪圆环病毒的特性 | 第13页 |
| ·病毒的基因组结构及 Cap 蛋白的功能特性 | 第13-14页 |
| ·猪圆环病毒的感染现状 | 第14页 |
| ·猪圆环病毒的致病机理及免疫应答 | 第14-15页 |
| ·PCV2 诊断方法研究进展 | 第15-18页 |
| ·病毒分离 | 第15-16页 |
| ·病毒抗原的鉴定方法 | 第16页 |
| ·病毒抗体的检测技术 | 第16-17页 |
| ·病毒核酸的检测技术 | 第17-18页 |
| ·猪圆环病毒2 型单克隆抗体研究进展 | 第18页 |
| ·PCV2 免疫预防措施 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·病料 | 第20页 |
| ·菌种、质粒、细胞与病毒 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-39页 |
| ·套式PCR 检测猪脾脏中的PCV2 病毒 | 第23-24页 |
| ·重组质粒PMD18-T-ORF2 的构建 | 第24-27页 |
| ·原核表达载体 pPRO-HTb-ORF2 的构建 | 第27-28页 |
| ·pPRO-HTb-ORF2 重组融合蛋白的诱导与表达 | 第28-29页 |
| ·pPRO-HTb-ORF2 表达蛋白的纯化与复性 | 第29-30页 |
| ·免疫印记（Western-blot）分析 | 第30-31页 |
| ·实验动物免疫 | 第31页 |
| ·猪圆环病毒2 型（PCV2）的分离与鉴定 | 第31-34页 |
| ·间接ELISA 筛选方法的建立 | 第34-35页 |
| ·建立杂交瘤细胞株 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体的特性鉴定 | 第36-39页 |
| 3 结果 | 第39-51页 |
| ·套式PCR 检测组织中PCV2 | 第39页 |
| ·重组质粒PMD18-T-ORF2 的构建 | 第39-40页 |
| ·PCR 扩增PCV2-ORF2 基因结果 | 第39页 |
| ·pMD18-T-ORF2 重组质粒的酶切和 PCR 鉴定 | 第39-40页 |
| ·pMD18-T-ORF2 阳性重组菌的测序结果 | 第40页 |
| ·表达载体 pPRO-HTb-ORF2 的构建 | 第40-41页 |
| ·重组质粒 pPRO-HTb-ORF2 酶切和 PCR 鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组菌 pPRO-HTb-ORF2 的测序结果 | 第41页 |
| ·重组质粒 pPRO-HTb-ORF2 表达蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第41页 |
| ·pPRO-HTb-ORF2 表达产物的纯化结果 | 第41-42页 |
| ·表达产物 Western-blot 检测结果 | 第42页 |
| ·猪圆环病毒2 型（PCV2）的分离与鉴定 | 第42-44页 |
| ·PCR 检测病料结果 | 第42-43页 |
| ·PCR 检测接毒细胞中的PCV2 | 第43页 |
| ·酶切和PCR 鉴定PMD18-T-PCV2 重组质粒 | 第43-44页 |
| ·阳性重组菌的测序结果 | 第44页 |
| ·间接免疫荧光检测PCV2 | 第44页 |
| ·ELISA 筛选方法的建立 | 第44-46页 |
| ·抗原最适包被浓度和抗体最佳稀释度的确定 | 第44-45页 |
| ·抗原包被条件的确定 | 第45页 |
| ·待检血清反应时间的确定 | 第45-46页 |
| ·酶标二抗的作用时间 | 第46页 |
| ·显色时间的确定 | 第46页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体的特性鉴定 | 第47-51页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清效价的测定 | 第47页 |
| ·抗体亚类鉴定结果 | 第47页 |
| ·Western-blot 鉴定 | 第47页 |
| ·单克隆抗体与 PCV2 的 Dot-ELISA 检测结果 | 第47-48页 |
| ·间接免疫荧光试验鉴定单克隆抗体的特异性 | 第48-49页 |
| ·交叉试验 | 第49页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性检测 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| ·不同血清型 PCV Cap 蛋白差异及其在 PCV 型别鉴定中的作用 | 第51-52页 |
| ·重组 Cap 蛋白免疫原制备单克隆抗体的特异性和稳定性 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
