| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·类胡萝卜素裂解双加氧酶 | 第12-18页 |
| ·CCD 酶的特性 | 第12-14页 |
| ·CCD 及其裂解产物的功能 | 第14-18页 |
| ·9-顺式-环氧类胡萝卜素双氧合酶(NCED)与 ABA 生物合成 | 第18-23页 |
| ·NCED 的发现及其功能 | 第18页 |
| ·类胡萝卜素与ABA生物合成 | 第18-21页 |
| ·ABA 合成的调控 | 第21-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株、试剂与引物 | 第24-25页 |
| ·试验设计 | 第25-26页 |
| ·MhNCED 和MhCCD 基因的克隆及序列分析 | 第25页 |
| ·不同器官和组织的MhNCED 和MhCCD 表达分析 | 第25-26页 |
| ·氯化镉、氯化铜、硝普钠和茉莉酸甲酯对平邑甜茶幼苗的处理 | 第26页 |
| ·硝普钠和茉莉酸甲酯对平邑甜茶种子的处理 | 第26页 |
| ·测定与分析方法 | 第26-35页 |
| ·植物材料总RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·反转录cDNA 第一条链的合成 | 第27页 |
| ·cDNA 末端加尾 | 第27-28页 |
| ·cDNA 全长序列的获得 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·DNA 序列测定 | 第30页 |
| ·MhNCED 和MhCCD 基因反义表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞转化 | 第31页 |
| ·农杆菌介导的平邑甜茶的转化 | 第31-33页 |
| ·实时荧光定量PCR 分析 | 第33页 |
| ·Northern Blot | 第33-35页 |
| ·ABA 和种子发芽率测定 | 第35-36页 |
| ·ABA 测定 | 第35页 |
| ·种子发芽率测定 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-60页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 基因克隆与序列分析 | 第36-44页 |
| ·RNA 的提取及质量检测 | 第36页 |
| ·MhNCED 基因的分离 | 第36-38页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 基因的序列分析 | 第38-42页 |
| ·MhNCED 与其他NCEDs 的聚类分析 | 第42-43页 |
| ·MhNCED 基因编码蛋白的特性分析 | 第43-44页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 基因的表达 | 第44-45页 |
| ·平邑甜茶不同组织和器官MhNCED 的表达 | 第44页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 对氯化铜与氯化镉处理的响应 | 第44-45页 |
| ·铜与镉处理下平邑甜茶内源ABA 含量的变化 | 第45-46页 |
| ·氯化镉处理后平邑甜茶ABA 含量的变化 | 第45页 |
| ·氯化铜处理后平邑甜茶ABA 含量的变化 | 第45-46页 |
| ·平邑甜茶MhCCD 基因克隆与序列分析 | 第46-53页 |
| ·平邑甜茶MhCCD 基因克隆 | 第46-47页 |
| ·平邑甜茶MhCCD 序列分析 | 第47-49页 |
| ·MhCCD 与其他CCDs 基因的聚类分析 | 第49-51页 |
| ·平邑甜茶MhCCD 编码蛋白的特性分析 | 第51-53页 |
| ·平邑甜茶MhCCD 基因表达 | 第53-55页 |
| ·平邑甜茶不同组织和器官中MhCCD 的表达 | 第53页 |
| ·从种子到幼苗的发育过程中MhCCD 基因表达变化 | 第53-54页 |
| ·平邑甜茶 MhCCD 对镉、铜胁迫的响应 | 第54-55页 |
| ·硝普钠对MhCCD 表达的诱导 | 第55页 |
| ·茉莉酸甲酯对MhCCD 表达的诱导 | 第55页 |
| ·硝普钠和茉莉酸甲酯对打破平邑甜茶种子休眠的作用 | 第55-57页 |
| ·硝普钠和茉莉酸甲酯对打破带种皮种子休眠的作用 | 第55-56页 |
| ·硝普钠和茉莉酸甲酯对打破去种皮种子休眠的作用 | 第56-57页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 和MhCCD 反义表达载体的构建 | 第57-60页 |
| ·pBI121-anti-MhNCED 表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·pBI121-anti-MhCCD 表达载体的构建 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 和MhCCD 的关系及其功能的异同 | 第60页 |
| ·平邑甜茶不同器官MhNCED 和 MhCCD 基因表达量的变化 | 第60-61页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 和MhCCD 对重金属胁迫的响应 | 第61页 |
| ·平邑甜茶MhNCED 在脱落酸生物合成及种子休眠中的作用 | 第61-62页 |
| ·平邑甜茶MhCCD 与种子休眠的关系 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第75页 |
