PRRSV高变异株与美洲标准株VR-2332NSP2蛋白的表达与免疫原性鉴定
| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-29页 |
| ·PRRS 病毒的分子生物学研究进展 | 第13-21页 |
| ·PRRSV 病毒的免疫学特点 | 第21-23页 |
| ·PRRSV 的致病机理 | 第23-25页 |
| ·PRRSV 的遗传变异 | 第25-26页 |
| ·PRRSV 的防控技术 | 第26-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 一、病毒的分离鉴定 | 第29-38页 |
| ·实验材料和方法 | 第29-34页 |
| ·病料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·细胞 | 第29页 |
| ·引物的设计 | 第29-30页 |
| ·组织中PRRSV N 蛋白基因的扩增 | 第30-33页 |
| ·Marc-145 细胞分离病毒 | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-36页 |
| ·PRRSV 的ORF7 基因的扩增 | 第34页 |
| ·测序结果 | 第34-35页 |
| ·Marc-145 细胞分离病毒 | 第35页 |
| ·TCID_(50)结果 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 二、NSP2 全基因的扩增及序列分析 | 第38-46页 |
| ·材料和方法 | 第38-40页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·细胞和培养基 | 第38页 |
| ·浓缩病毒 | 第38页 |
| ·提病毒RNA | 第38-39页 |
| ·NSP2 基因的扩增 | 第39-40页 |
| ·实验结果与分析 | 第40-44页 |
| ·PRRSV NSP2 基因的扩增 | 第40页 |
| ·重组质粒PCR 鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·测序结果分析 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 三、 NSP2 蛋白的分段表达 | 第46-58页 |
| ·材料和方法 | 第46-50页 |
| ·重组质粒 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·表达菌株 | 第46页 |
| ·NSP2 表达片段的划分 | 第46-47页 |
| ·引物 | 第47页 |
| ·表达重组质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·诱导表达目的蛋白 | 第48-49页 |
| ·诱导蛋白的鉴定 | 第49-50页 |
| ·实验结果与分析 | 第50-57页 |
| ·NSP2 表达片段的划分 | 第50-53页 |
| ·表达载体的构建 | 第53-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 四、NSP2 表达蛋白的免疫原性鉴定 | 第58-65页 |
| ·材料和方法 | 第58-60页 |
| ·血清样品 | 第58页 |
| ·抗原 | 第58页 |
| ·ELISA 板 | 第58页 |
| ·酶标二抗 | 第58页 |
| ·纯化抗原 | 第58-60页 |
| ·KCL 负染切胶 | 第58-59页 |
| ·电洗脱纯化蛋白 | 第59页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第59-60页 |
| ·ELISA 检测血清样品 | 第60页 |
| ·实验结果与分析 | 第60-63页 |
| ·抗原纯化结果 | 第60-61页 |
| ·ELISA 实验结果与分析 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 附表 | 第77-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
