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Ⅰ型鸭肝炎病毒浙江分离株序列分析与RT-PCR检测方法建立

缩略词第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-13页
1 引言第13-30页
   ·鸭肝炎病毒的流行与分布第13-14页
   ·病原学研究第14-16页
   ·病毒的纯化第16-17页
   ·DHV- I 的基因组序列结构及其特点第17-20页
     ·DHV-I 的分子生物学研究基础第17-19页
       ·小RNA 病毒的基因组结构第17-18页
       ·小RNA 病毒多聚蛋白的加工处理第18-19页
     ·DHV-1 的基因组序列研究进展及其结构特点第19-20页
   ·发病机理与流行病学的研究第20-21页
   ·临床症状及病理特征第21-22页
     ·临床症状第21-22页
     ·病理变化第22页
   ·诊断第22-26页
     ·病毒分离第22页
     ·电镜观察第22-23页
     ·实验室诊断方法第23-26页
   ·防制第26-28页
     ·弱毒苗免疫第26-27页
     ·灭活苗免疫第27页
     ·高免血清和高免卵黄抗体治疗第27-28页
     ·中草药治疗第28页
   ·研究的目的意义及展望第28-30页
2 Race 法扩增4 株鸭肝炎病毒3′末端序列及其克隆分析第30-48页
   ·材料第30-32页
     ·载体与毒(菌)株第30页
     ·试剂第30-31页
     ·主要仪器第31页
     ·溶液配制第31-32页
   ·方法第32-37页
     ·引物设计与合成第32页
     ·病毒RNA 的提取第32-33页
     ·cDNA 的制备第33页
     ·3′RACE 扩增第33-34页
     ·PCR 扩增产物回收纯化第34页
     ·目的片段与pMD18-T Vector 的连接第34页
     ·感受态细胞的制备第34-35页
     ·重组质粒的转化第35页
     ·阳性克隆的筛选及鉴定第35-36页
     ·序列比对分析第36-37页
   ·结果第37-47页
     ·PCR 扩增第37页
     ·重组质粒酶切鉴定结果第37-38页
     ·序列测定第38页
     ·DHV3′末端的核酸序列分析第38-43页
     ·3D 蛋白序列的获得及比对分析第43-47页
   ·讨论第47-48页
3 鸭肝炎病毒浙江分离株基因组测序与分子流行病学研究第48-56页
   ·材料第48-49页
     ·实验毒株第48-49页
     ·参考毒株第49页
     ·主要试剂第49页
   ·方法第49-51页
     ·引物设计与合成第49-50页
     ·病毒RNA 的提取和cDNA 的制备第50页
     ·PCR 扩增第50-51页
     ·克隆和测序第51页
     ·序列比对与分析第51页
   ·实验结果第51-55页
     ·Z10 株的全基因序列测定及分析第51-53页
     ·4 株 DHV-I VP1 基因的序列测定及分析第53-55页
   ·讨论第55-56页
4 I 型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR 检测方法的建立第56-65页
   ·材料第57页
     ·毒(菌)株第57页
     ·试剂第57页
   ·方法第57-59页
     ·引物设计与合成第57-58页
     ·病毒RNA 的提取和cDNA 的制备第58页
     ·PCR 反应第58页
     ·重组质粒的双酶切鉴定及测序第58-59页
     ·特异性试验第59页
     ·敏感性试验第59页
     ·DHV 分离株和临床病料的RT-PCR 检测第59页
   ·结果与分析第59-63页
     ·RT-PCR 扩增产物第59页
     ·重组质粒酶切鉴定结果第59-60页
     ·序列测定及分析第60页
     ·特异性试验第60-61页
     ·敏感性试验第61-62页
     ·分离株和临床病料的RT-PCR 检测结果第62-63页
   ·讨论第63-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
作者简介及攻读硕士期间发表论文情况第75页

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