| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| ·涕灭威的使用及残留现状 | 第12-13页 |
| ·涕灭威在自然界中的存在及代谢情况研究 | 第13-15页 |
| ·涕灭威残留分析方法 | 第15-16页 |
| ·分光光度法 | 第15页 |
| ·色谱法 | 第15-16页 |
| ·生物传感器 | 第16页 |
| ·免疫分析法 | 第16页 |
| ·降解农药的微生物类群及降解机理 | 第16-19页 |
| ·降解农药的微生物类群 | 第16-18页 |
| ·微生物降解农药的机理 | 第18-19页 |
| ·微生物降解农药的进展及研究趋势 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| ·供试药品、试剂及主要仪器 | 第21-23页 |
| ·供试药品、试剂 | 第21-22页 |
| ·供试仪器与设备 | 第22页 |
| ·供试培养基 | 第22-23页 |
| ·富集培养基 | 第22页 |
| ·选择性培养基 | 第22页 |
| ·LB 培养基 | 第22-23页 |
| ·PDA 培养基 | 第23页 |
| ·菌株来源 | 第23页 |
| ·微生物生长量测定方法 | 第23页 |
| ·涕灭威的提取及分析方法 | 第23-24页 |
| ·涕灭威的提取 | 第23页 |
| ·紫外分光光度法测定波长的确定 | 第23-24页 |
| ·紫外分光光度法标准曲线的绘制 | 第24页 |
| ·降解菌的富集分离 | 第24页 |
| ·降解菌的筛选及鉴定 | 第24-31页 |
| ·降解菌生理生化鉴定 | 第24-27页 |
| ·16SrDNA 序列分析 | 第27-31页 |
| ·细菌总DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增 | 第28页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第28-29页 |
| ·克隆与筛选 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·序列分析与系统树构建 | 第31页 |
| ·菌悬液的配制 | 第31页 |
| ·降解能力的测定 | 第31-32页 |
| ·培养基最佳碳源、氮源的确定 | 第32页 |
| ·最佳碳源、氮源的确定 | 第32页 |
| ·培养基最佳碳氮比的确定 | 第32页 |
| ·降解菌的降解特性研究 | 第32-33页 |
| ·不同温度对降解菌的生长及涕灭威降解率的影响 | 第32页 |
| ·不同初始pH 值对降解菌的生长及涕灭威降解率的影响 | 第32页 |
| ·不同外加氮源浓度对降解菌的生长及涕灭威降解率的影响 | 第32-33页 |
| ·不同涕灭威浓度对降解菌的生长及涕灭威降解率的影响 | 第33页 |
| ·不同接菌量对降解菌的生长及涕灭威降解率的影响 | 第33页 |
| ·降解菌对涕灭威的酶促降解实验 | 第33-35页 |
| ·降解酶的提取 | 第33-34页 |
| ·胞内粗酶液的提取 | 第33页 |
| ·胞外粗酶液的提取 | 第33-34页 |
| ·酶蛋白质含量的测定 | 第34页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第34页 |
| ·样品测定 | 第34页 |
| ·酶对涕灭威的降解实验 | 第34-35页 |
| ·降解酶降解特性的影响 | 第35页 |
| ·温度对酶促降解的影响 | 第35页 |
| ·pH 对酶促降解的影响 | 第35页 |
| ·酶的米氏常数 K_m和最大反应速率 V_(max)的测定 | 第35页 |
| ·常用杀菌剂对降解菌的生长及涕灭威降解率的影响 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-53页 |
| ·土壤中降解菌的分离与筛选 | 第37-38页 |
| ·降解菌的鉴定 | 第38-40页 |
| ·降解菌生理生化测定 | 第38-39页 |
| ·降解菌分子生物学测定 | 第39-40页 |
| ·基因序列测定结果 | 第39-40页 |
| ·BLAST 比对结果与系统发育树的建立 | 第40页 |
| ·涕灭威分析方法的选择 | 第40-43页 |
| ·涕灭威最佳吸收波长的确定 | 第40-41页 |
| ·最佳测定波长下标准曲线的绘制 | 第41-42页 |
| ·分析方法的准确度和精密度 | 第42页 |
| ·高效液相色谱法与紫外分光光度法分析比较 | 第42-43页 |
| ·培养基最佳碳源氮源的确定 | 第43-45页 |
| ·培养基最佳碳源氮源的确定 | 第43-44页 |
| ·最佳碳氮比的确定 | 第44-45页 |
| ·降解菌降解性能的研究 | 第45-48页 |
| ·不同温度对降解菌的生长和涕灭威降解率的影响 | 第45页 |
| ·不同初始pH 值对降解菌的生长和涕灭威降解率的影响 | 第45-46页 |
| ·不同外加氮源浓度对降解菌的生长和涕灭威降解率的影响 | 第46-47页 |
| ·不同涕灭威浓度对降解菌的生长和涕灭威降解率的影响 | 第47页 |
| ·不同接种量对降解菌的生长和涕灭威降解率的影响 | 第47-48页 |
| ·降解菌对涕灭威的酶促降解实验 | 第48-51页 |
| ·涕灭威降解酶的定位 | 第48页 |
| ·胞内酶蛋白质含量的测定 | 第48-49页 |
| ·温度对降解酶的影响 | 第49-50页 |
| ·pH 对降解酶的影响 | 第50页 |
| ·Vmax 与Km的测定 | 第50-51页 |
| ·常用杀菌剂对降解菌的生长及涕灭威降解率的影响 | 第51-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-57页 |
| ·农药降解菌的筛选方法 | 第53-54页 |
| ·影响微生物降解农药的因素 | 第54-55页 |
| ·可降解涕灭威的微生物 | 第55-56页 |
| ·存在问题及下一步工作 | 第56-57页 |
| 5. 结论 | 第57-59页 |
| ·筛选出了一株降解涕灭威的细菌 | 第57页 |
| ·确定了培养基的最佳碳源和氮源 | 第57页 |
| ·明确了涕灭威降解菌的最佳培养和降解条件 | 第57页 |
| ·对筛选出的涕灭威降解菌的降解酶进行了定位 | 第57-58页 |
| ·测定了常用杀菌剂对降解菌生长和涕灭威降解率的影响 | 第58-59页 |
| 6. 参考文献 | 第59-66页 |
| 7. 致谢 | 第66-67页 |
| 8. 攻读学位期间发表论文情况 | 第67页 |
