| 致谢 | 第1-6页 |
| 前言 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 縮略词表 | 第11-12页 |
| 目录 | 第12-18页 |
| 第一部分 文献综述 | 第18-42页 |
| 1 古菌 | 第18-22页 |
| ·二分法和三域学说 | 第18-20页 |
| ·硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobus solfataricus P2) | 第20-22页 |
| 2 蛋白质折叠和分子伴侣 | 第22-25页 |
| ·蛋白质折叠简介 | 第22-23页 |
| ·蛋白质折叠和分子伴侣 | 第23-25页 |
| 3 热休克蛋白的研究进展与应用 | 第25-34页 |
| ·热休克蛋白的研究历史 | 第25-26页 |
| ·热休克蛋白的分类和分布 | 第26页 |
| ·热休克蛋白的分子结构特征 | 第26-29页 |
| ·HSP90家族的分子结构 | 第26-27页 |
| ·HSP70家族的分构 | 第27-28页 |
| ·HSP60家族分子结构特征 | 第28-29页 |
| ·sHSP家族的分子结构特征 | 第29页 |
| ·热休克蛋白主要生物学能 | 第29-34页 |
| ·分子伴侣 | 第29-30页 |
| ·细胞保护作用 | 第30-31页 |
| ·HSPs与细胞凋亡 | 第31-34页 |
| 4 展望 | 第34-35页 |
| 5 本研究的目的和内容 | 第35-36页 |
| 6 参考文献 | 第36-42页 |
| 第二部分 研究内容 | 第42-90页 |
| 第一章 S.so-HSP20的表达特征研究 | 第42-55页 |
| 1 引言 | 第42-43页 |
| 2 材料 | 第43-44页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·主要式剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| 3 方法 | 第44-50页 |
| ·硫磺矿硫化叶菌Sulfolobus solfataricus P2的培养 | 第44页 |
| ·硫磺矿硫化叶菌在不同温度的培养和冷激处理 | 第44页 |
| ·RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·反转录(RT) | 第45-46页 |
| ·Real-time PCR(qRT-PCR) | 第46-50页 |
| ·硫磺矿硫化叶菌16S rDNA的TA克隆 | 第46-48页 |
| ·S.so-HSP20的TA克隆 | 第48-49页 |
| ·定量PCR | 第49-50页 |
| 4 结果 | 第50-52页 |
| ·S.so-HSP20基因ORF的克隆 | 第50-51页 |
| ·S.so-HSP20基因ORF和16S rDNA部分片段的克隆 | 第51页 |
| ·不同培养温度对S.so-HSP20 mRNA表达的影响 | 第51-52页 |
| 5 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| 第二章 S.so-HSP20原核表达系统 | 第55-69页 |
| 1 引言 | 第55-56页 |
| 2 材料 | 第56-57页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56-57页 |
| 3 方法 | 第57-63页 |
| ·抽提硫矿硫化叶菌Sulfolobus solfataricus P2基因 | 第57-59页 |
| ·S.so-HSP20基因编码区的克隆 | 第59-60页 |
| ·pET-28a(+)-S.so-HSP20原核表达系统的构建 | 第60-62页 |
| ·S.so-HSP20序列与编码氨基酸的分析 | 第62-63页 |
| 4 结果 | 第63-67页 |
| ·抽提硫磺矿硫化叶菌Sulfolobus solfataricus P2基因组DNA | 第63页 |
| ·S.so-HSP20基因编码区的克隆和pET-28a(+)-S.so-HSP20 原核表达系统的构建 | 第63-65页 |
| ·S.so-HSP20序列与编码氨基酸的分析 | 第65-66页 |
| ·S.so-HSP20与不同物种sHSP氨基酸序列的比较 | 第66-67页 |
| 5. 讨论 | 第67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第三章 Ecoli BL23(DE3)耐热性和耐寒性 | 第69-77页 |
| 1 引言 | 第69-70页 |
| 2 材料 | 第70页 |
| ·实验材料 | 第70页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70页 |
| 3. 方法 | 第70-72页 |
| ·蛋白质诱导表达 | 第70-71页 |
| ·S.so-HSP20基因表达产物存在形式的检测 | 第71页 |
| ·E coli BL21(DE3)耐热性和耐寒性 | 第71-72页 |
| 4. 结果 | 第72-74页 |
| ·蛋白质诱导表达 | 第72-73页 |
| ·S.so-HSP20基因表达产物存在形式的鉴定 | 第73页 |
| ·E coli BL21(DE3)耐热性和耐寒性 | 第73-74页 |
| 5 讨论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第四章 S.so-HSP20的分子伴侣活性分析 | 第77-87页 |
| 1 引言 | 第77-78页 |
| 2 材料 | 第78页 |
| ·实验材料 | 第78页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·主要仪器 | 第78页 |
| 3 方法 | 第78-80页 |
| ·S.so-HSP20基因表达产物的Ni柱纯化 | 第78-79页 |
| ·S.so-HSP20的分子伴侣活性 | 第79-80页 |
| 4 结果 | 第80-83页 |
| ·S.so-HSP20基因表达产物的Ni柱纯化 | 第80-81页 |
| ·S.so-HSP20的分子伴侣活性 | 第81-83页 |
| 5 讨论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
| 第五章 结论和展望 | 第87-90页 |
| 1 结论 | 第87-89页 |
| 2 本研究的创新点 | 第89页 |
| 3 有待进一步开展的工作 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90-97页 |
| 作者简历 | 第97页 |
