| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-42页 |
| ·引言 | 第10-14页 |
| ·研究背景 | 第11-13页 |
| ·研究目的和意义 | 第13-14页 |
| ·国内外研究概况及分析 | 第14-40页 |
| ·大豆研究现状 | 第14-19页 |
| ·植物脂肪酸及脂类基因调控研究进展 | 第19-32页 |
| ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)研究概况 | 第32-37页 |
| ·基因沉默在植物中的研究进展 | 第37-40页 |
| ·研究目标和主要研究内容 | 第40-42页 |
| ·研究目标 | 第40页 |
| ·研究内容 | 第40-41页 |
| ·技术路线 | 第41-42页 |
| 第二章 大豆fad2和pepc基因片段的克隆及沉默表达载体的构建 | 第42-60页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42-44页 |
| ·植物材料 | 第42-43页 |
| ·载体和菌株 | 第43页 |
| ·试剂盒、酶类、生化试剂及PCR 引物 | 第43页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43-44页 |
| ·实验方法(技术路线 | 第44-53页 |
| ·大豆fad2 基因片段的克隆 | 第44-46页 |
| ·Fad2 反向重复序列(IR)的构建 | 第46页 |
| ·Fad2 重组表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·大豆pepc 基因的片段的克隆 | 第47-50页 |
| ·Pepc 反向重复序列(IR)的构建 | 第50-52页 |
| ·Pepc 重组表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-58页 |
| ·Fad2 基因沉默表达载体的构建 | 第53-56页 |
| ·Pepc 基因沉默表达载体的构建 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 大豆遗传转化体系的建立 | 第60-70页 |
| ·引言 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第61-62页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·质粒和菌种 | 第61页 |
| ·试剂盒、酶类、生化试剂和培养基 | 第61-62页 |
| ·实验仪器设备 | 第62页 |
| ·实验方法（技术路线） | 第62-65页 |
| ·农杆菌感受态制备及转化 | 第62-63页 |
| ·大豆的胚尖再生系统的优化 | 第63-64页 |
| ·胚尖再生苗的嫁接 | 第64-65页 |
| ·实验结果 | 第65-68页 |
| ·转基因大豆基因型筛选 | 第65-66页 |
| ·筛选剂浓度的确定 | 第66-67页 |
| ·胚尖转化和嫁接 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 转基因大豆的分子生化分析和基因表达模式分析 | 第70-95页 |
| ·引言 | 第70页 |
| ·实验材料 | 第70-73页 |
| ·植物材料 | 第70页 |
| ·质粒 | 第70-71页 |
| ·试剂盒、酶类、培养基和生化试剂 | 第71-72页 |
| ·仪器设备 | 第72-73页 |
| ·转化pBI-FAD2 大豆的检测方法 | 第73-76页 |
| ·转化植株的PCR 检测 | 第73-74页 |
| ·转化植株的Southern Blot 检测 | 第74-75页 |
| ·转化植株的Northern Blot 检测 | 第75页 |
| ·转化植株种子脂肪酸含量测定 | 第75-76页 |
| ·转化pBI-PEP 大豆的检测方法 | 第76-80页 |
| ·转化植株分子检测 | 第76页 |
| ·转化植株生化检测 | 第76-78页 |
| ·大豆籽粒不同发育期酶活检测和基因表达分析 | 第78-80页 |
| ·转化pBI-FAD2 的再生植株检测结果与分析 | 第80-84页 |
| ·转化植株的NPTII 基因PCR 检测 | 第80-81页 |
| ·转化植株的Southern 和Northern 检测 | 第81-82页 |
| ·脂肪酸含量和油酸脱氢比例 | 第82-84页 |
| ·转化pBI-PEP 的再生植株的检测结果与分析 | 第84-92页 |
| ·转化植株分子生物学检测 | 第84-85页 |
| ·转化植株生化测定 | 第85-89页 |
| ·不同发育期转化植株酶活和基因表达分析 | 第89-92页 |
| ·讨论 | 第92-95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-112页 |
| 附录 引物序列列表 | 第112-113页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
