中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1.前言 | 第12-33页 |
·转基因动物研究概况 | 第12-24页 |
·转基因动物的生产方法 | 第12-16页 |
·转基因动物的检测 | 第16-22页 |
·转基因动物的发展前景及存在的问题 | 第22-24页 |
·表观遗传修饰对外源基因表达的影响 | 第24-28页 |
·外源基因的位置效应 | 第28-30页 |
·外源基因的遗传 | 第30-32页 |
·本研究的目的意义 | 第32-33页 |
2.材料与方法 | 第33-58页 |
·实验材料 | 第33-36页 |
·实验动物 | 第33页 |
·工具酶及试剂盒 | 第33-34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·主要仪器设备 | 第35-36页 |
·主要生物学分析软件 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-58页 |
·猪成纤维细胞的分离培养 | 第36-37页 |
·猪成纤维细胞药物处理及活率分析 | 第37页 |
·流式细胞分析术 | 第37-38页 |
·基因组DNA及总cDNA的获得 | 第38-40页 |
·Southern blot | 第40-42页 |
·Western blot | 第42-45页 |
·Q-PCR | 第45-48页 |
·亚硫酸氢盐测序 | 第48-52页 |
·染色体免疫共沉淀 | 第52-53页 |
·外源基因拷贝数的检测 | 第53-54页 |
·外源基因整合位点的检测 | 第54-57页 |
·数据统计分析 | 第57-58页 |
3.结果 | 第58-86页 |
·TSA和5-AZA-dC对外源基因表达和表观遗传修饰的影响 | 第58-68页 |
·TSA和5-AZA-dC处理猪成纤维细胞方法的筛选 | 第58-60页 |
·TSA和5-AZA-dC处理对外源基因在转基因猪成纤维细胞中表达的影响 | 第60-63页 |
·TSA和5-AZA-dC处理对外源基因启动子区表观遗传修饰的影响 | 第63-65页 |
·TSA和5-AZA-dC处理对外源基因表达和表观遗传修饰的维持 | 第65-68页 |
·位置效应对外源基因表达和表观遗传修饰的影响 | 第68-78页 |
·位置效应对外源基因表达的影响 | 第68-71页 |
·位置效应对外源基因启动子区DNA甲基化修饰的影响 | 第71-72页 |
·位置效应外源基因启动子区组蛋白乙酰化修饰的影响 | 第72-74页 |
·位置效应对外源基因表达的直接调控作用 | 第74-78页 |
·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中表达、拷贝数和启动子区甲基化修饰的变化 | 第78-86页 |
·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中表达的变化 | 第78-80页 |
·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中拷贝数的变化 | 第80-82页 |
·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中启动子区甲基化修饰的变化 | 第82-84页 |
·外源基因拷贝数和启动子区甲基化修饰对外源基因表达的影响 | 第84-86页 |
4.讨论 | 第86-91页 |
·关于外源基因的表观遗传修饰 | 第86-87页 |
·关于外源基因的位置效应 | 第87-89页 |
·关于外源基因的遗传 | 第89-91页 |
5.结论 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-100页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第100页 |