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外源基因在转基因猪中遗传和表达的稳定性

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1.前言第12-33页
   ·转基因动物研究概况第12-24页
     ·转基因动物的生产方法第12-16页
     ·转基因动物的检测第16-22页
     ·转基因动物的发展前景及存在的问题第22-24页
   ·表观遗传修饰对外源基因表达的影响第24-28页
   ·外源基因的位置效应第28-30页
   ·外源基因的遗传第30-32页
   ·本研究的目的意义第32-33页
2.材料与方法第33-58页
   ·实验材料第33-36页
     ·实验动物第33页
     ·工具酶及试剂盒第33-34页
     ·主要试剂第34-35页
     ·主要仪器设备第35-36页
     ·主要生物学分析软件第36页
   ·实验方法第36-58页
     ·猪成纤维细胞的分离培养第36-37页
     ·猪成纤维细胞药物处理及活率分析第37页
     ·流式细胞分析术第37-38页
     ·基因组DNA及总cDNA的获得第38-40页
     ·Southern blot第40-42页
     ·Western blot第42-45页
     ·Q-PCR第45-48页
     ·亚硫酸氢盐测序第48-52页
     ·染色体免疫共沉淀第52-53页
     ·外源基因拷贝数的检测第53-54页
     ·外源基因整合位点的检测第54-57页
     ·数据统计分析第57-58页
3.结果第58-86页
   ·TSA和5-AZA-dC对外源基因表达和表观遗传修饰的影响第58-68页
     ·TSA和5-AZA-dC处理猪成纤维细胞方法的筛选第58-60页
     ·TSA和5-AZA-dC处理对外源基因在转基因猪成纤维细胞中表达的影响第60-63页
     ·TSA和5-AZA-dC处理对外源基因启动子区表观遗传修饰的影响第63-65页
     ·TSA和5-AZA-dC处理对外源基因表达和表观遗传修饰的维持第65-68页
   ·位置效应对外源基因表达和表观遗传修饰的影响第68-78页
     ·位置效应对外源基因表达的影响第68-71页
     ·位置效应对外源基因启动子区DNA甲基化修饰的影响第71-72页
     ·位置效应外源基因启动子区组蛋白乙酰化修饰的影响第72-74页
     ·位置效应对外源基因表达的直接调控作用第74-78页
   ·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中表达、拷贝数和启动子区甲基化修饰的变化第78-86页
     ·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中表达的变化第78-80页
     ·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中拷贝数的变化第80-82页
     ·外源基因在组织器官分化、体外和体内遗传过程中启动子区甲基化修饰的变化第82-84页
     ·外源基因拷贝数和启动子区甲基化修饰对外源基因表达的影响第84-86页
4.讨论第86-91页
   ·关于外源基因的表观遗传修饰第86-87页
   ·关于外源基因的位置效应第87-89页
   ·关于外源基因的遗传第89-91页
5.结论第91-92页
致谢第92-93页
参考文献第93-100页
攻读博士学位期间发表的学术论文第100页

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