抑制性消减杂交技术研究Cd2+胁迫下星星草基因表达及泛素结合酶基因的克隆
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 绪论 | 第7-16页 |
| ·镉对环境的污染及其研究进展 | 第7-8页 |
| ·星星草研究进展概述 | 第8-9页 |
| ·消减杂交简介及其在分子生物学中的应用 | 第9-12页 |
| ·cDNA末端快速扩增技术(RACE)简介 | 第12-15页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 镉胁迫下星星草生理指标的变化研究 | 第16-21页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·实验方法步骤 | 第16-18页 |
| ·超氧化物歧化酶的测定 | 第16-17页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性测定 | 第17页 |
| ·丙二醛(MDA)含量测定 | 第17-18页 |
| ·结果与分析 | 第18-19页 |
| ·讨论 | 第19页 |
| ·本章小结 | 第19-21页 |
| 3 镉处理下星星草消减文库的构建 | 第21-38页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·酶及其生化试剂 | 第21页 |
| ·引物序列 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-33页 |
| ·星星草总RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·星星草mRNA的分离和纯化 | 第22-23页 |
| ·消减文库的构建 | 第23-29页 |
| ·文库的筛选 | 第29-31页 |
| ·测序反应 | 第31-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·RNA提取质量检测 | 第33页 |
| ·Rsa Ⅰ消化效率检测 | 第33-34页 |
| ·SSH文库质量的分析 | 第34页 |
| ·SSH文库差异表达基因的筛选 | 第34-35页 |
| ·SSH文库中筛选到的阳性克隆的分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 4 泛素结合酶基因的克隆 | 第38-48页 |
| ·材料和试剂 | 第38页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-43页 |
| ·总RNA提取 | 第38-39页 |
| ·引物合成 | 第39页 |
| ·5'RACE试验步骤 | 第39-41页 |
| ·RACE片段的克隆与测序 | 第41-42页 |
| ·连接产物的PCR鉴定 | 第42页 |
| ·测序 | 第42页 |
| ·泛素结合酶基因全长cDNA的克隆 | 第42-43页 |
| ·泛素结合酶基因的序列分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·泛素结合酶基因全长cDNA序列分析 | 第43-44页 |
| ·同源性比较及基因系统进化分析 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
