| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-30页 |
| ·问题的提出 | 第13-14页 |
| ·前人研究进展 | 第14-28页 |
| ·影响外源基因表达的因素 | 第14-23页 |
| ·外源基因的拷贝数及T-DNA结构 | 第14-16页 |
| ·外源基因的拷贝数及T-DNA结构的分析方法 | 第16-18页 |
| ·外源基因在基因组的位置 | 第18-19页 |
| ·转基因沉默 | 第19-23页 |
| ·木本植物外源基因稳定表达的相关研究 | 第23-24页 |
| ·荧光蛋白简介 | 第24-26页 |
| ·开花相关基因简介 | 第26-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
| 2. 材料与方法 | 第30-49页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·转基因材料 | 第30页 |
| ·外源基因质粒图 | 第30-31页 |
| ·主要的生化试剂 | 第31页 |
| ·所用主要培养基配方 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-49页 |
| ·GFP检测 | 第31-32页 |
| ·DNA提取 | 第32-34页 |
| ·PCR检测 | 第34-35页 |
| ·反向PCR检测 | 第35-37页 |
| ·Southern blot检测 | 第37-41页 |
| ·外源基因甲基化分析 | 第41-43页 |
| ·植物总RNA提取 | 第43-45页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第45页 |
| ·半定量RT-PCR检测 | 第45页 |
| ·Real-time RT-PCR分析 | 第45-46页 |
| ·Real-time PCR分析外源基因相对拷贝数 | 第46-47页 |
| ·Northern blot检测 | 第47-49页 |
| 3. 结果与分析 | 第49-93页 |
| ·转GFP柑橘外源基因表达的分析 | 第49-71页 |
| ·转GFP柑橘的Southern杂交分析 | 第49-57页 |
| ·转GFP基因佛罗斯特脐橙的Southern杂交 | 第49-50页 |
| ·转基因改良橙与尾张有性杂种的GFP基因Southern杂交 | 第50-54页 |
| ·转GFP基因冰糖橙的Southern杂交 | 第54-57页 |
| ·转GFP柑橘的荧光检测 | 第57-60页 |
| ·转GFP基因佛罗斯特脐橙的荧光检测 | 第57页 |
| ·转GFP基因改良橙与尾张有性杂种的荧光检测 | 第57-59页 |
| ·转GFP基因冰糖橙的荧光检测 | 第59-60页 |
| ·反向PCR分析转GFP柑橘的T-DNA重复 | 第60-63页 |
| ·转GFP基因改良橙与尾张有性杂种的反向PCR分析 | 第60-62页 |
| ·转GFP基因冰糖橙的反向PCR分析 | 第62-63页 |
| ·转GFP柑橘外源基因的表达分析 | 第63-67页 |
| ·转GFP基因改良橙与尾张有性杂种的外源基因表达分析 | 第63-65页 |
| ·转GFP基因冰糖橙的外源基因表达分析 | 第65-67页 |
| ·转GFP柑橘外源基因和35S的甲基化分析 | 第67-71页 |
| ·转GFP基因改良橙与尾张有性杂种的甲基化分析 | 第67-69页 |
| ·转GFP基因冰糖橙的甲基化分析 | 第69-71页 |
| ·转AP1柑橘外源基因拷贝数分析 | 第71-80页 |
| ·转AP1基因的茶枝柑Southern杂交分析 | 第71-72页 |
| ·转AP1椪柑的拷贝数分析 | 第72-80页 |
| ·转AP1基因椪柑的Southern杂交 | 第72-75页 |
| ·Real-time PCR分析转AP1基因桠柑外源基因相对拷贝数 | 第75-80页 |
| ·转AP1金柑的内源开花相关基因表达分析 | 第80-84页 |
| ·转AP1基因金柑的Southern杂交 | 第80-81页 |
| ·转AP1基因金柑的开花状况 | 第81-82页 |
| ·转AP1基因金柑的开花相关基因的表达 | 第82-84页 |
| ·转LFY柑橘外源基因和内源开花相关基因表达分析 | 第84-93页 |
| ·转LFY基因柑橘的PCR和Southern分析 | 第84-87页 |
| ·转LFY基因柑橘的开花状况 | 第87-88页 |
| ·转LFY基因柑橘的外源基因表达 | 第88-90页 |
| ·转LFY基因柑橘的外源LFY基因和内源开花相关基因的表达 | 第90-93页 |
| 4 讨论 | 第93-99页 |
| ·多种转基因事件中外源基因拷贝数的差异分析 | 第93-94页 |
| ·拷贝数与外源基因表达的关系 | 第94页 |
| ·Real-time PCR用以单拷贝转基因植株筛选 | 第94-95页 |
| ·T-DNA整合的缺失与重排 | 第95-96页 |
| ·甲基化与外源基因表达 | 第96页 |
| ·转基因沉默原因 | 第96-97页 |
| ·AP1、LFY与内源开花相关基因的相互作用 | 第97-99页 |
| 5 展望 | 第99-100页 |
| ·转基因沉默在柑橘育种上的应用 | 第99页 |
| ·早花转基因植株后续研究 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-116页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
