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黄河鲤性别特异片段的鉴定与性腺差异cDNA文库的构建及相关ESTS功能分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 前言第13-43页
   ·基因组水平上寻找性别决定信息的研究概况第14-21页
     ·DNA 分子标记的研究历程第16-20页
     ·抑制性消减杂交—性别特异片段鉴定的有效技术第20-21页
   ·mRNA 水平上寻找性别决定信息的研究概况第21-39页
     ·性别决定基因的寻找历程第21-25页
     ·鱼类性腺发育机制的研究概况第25-30页
     ·抑制性杂交技术在鱼类相关基因克隆中的研究概况第30-39页
   ·EST 技术在鱼类性别发育相关基因克隆中的应用第39-40页
   ·本研究的目的和意义第40-43页
第二章 多种分子技术分离、鉴定黄河鲤性别特异片段的研究第43-85页
   ·利用RAPD、SSR、ISSR 分离性别特异片段第44-60页
     ·材料第44-48页
     ·实验方法第48-53页
     ·结果第53-60页
     ·小结第60页
   ·SSH 技术筛选、鉴定黄河鲤性别特异片段第60-78页
     ·材料第60-61页
     ·仪器设备第61页
     ·试剂第61页
     ·本研究常用溶液配方第61-62页
     ·实验方法第62-69页
     ·结果第69-77页
     ·小结第77-78页
   ·讨论第78-85页
     ·性别特异标记与单性养殖第78页
     ·三种分子标记技术与性别特异片段的鉴定第78-80页
     ·关于重组及性染色体分子类型的多样性第80-81页
     ·性别特异片段与性染色体识别第81-82页
     ·关于抑制消减杂交技术第82-85页
第三章 黄河鲤性成熟期雌、雄消减cDNA 文库的构建及性别相关ESTS 分析第85-141页
   ·材料第86页
     ·实验动物第86页
   ·分子克隆用载体及宿主菌第86页
   ·主要试剂第86页
   ·引物序列第86页
   ·试验方法第86-98页
     ·RNA 的提取第86-87页
     ·mRNA 的分离第87-88页
     ·cDNA 第一链的合成第88页
     ·cDNA 第二链的合成第88-89页
     ·Rsa 1 酶切第89-90页
     ·接头连接第90页
     ·接头效率检测第90页
     ·抑制性消减杂交第90-91页
     ·PCR 扩增第91-92页
     ·cDNA 消减文库的构建第92页
     ·斑点杂交筛选第92页
     ·同源性比对第92-93页
     ·组织特异性表达第93-94页
     ·性别相关基因的全长扩增第94-98页
   ·结果第98-128页
     ·性腺总RNA 的提取第98页
     ·双链cDNA 的合成及Rsa Ⅰ酶切效率检测第98-99页
     ·接头连接效率检测第99-100页
     ·两轮PCR 扩增第100-101页
     ·消减效率检测第101-102页
     ·阳性克隆的鉴定第102页
     ·候选差异克隆的筛选第102-103页
     ·性腺相关ESTS 分析第103-108页
     ·部分同源基因在黄河鲤精卵巢中差异表达分析第108-109页
     ·Hmwt1α 基因全长的克隆第109-112页
     ·Hmwt1α 基因的同源性比对及聚类分析第112-115页
     ·黄河鲤HmSetd6 基因的全长克隆第115-118页
     ·HmSetd6 基因的同源性比对及聚类分析第118-122页
     ·黄河鲤卵巢特异基因HmPsmb2 的全长克隆第122-124页
     ·Psmb2 基因的同源性比对及聚类分析第124-127页
     ·三个差异表达基因的成体表达模式分析第127-128页
   ·小结第128-129页
   ·讨论第129-141页
     ·雄性EST 文库相关基因功能探析第130-135页
     ·雌性EST 文库相关基因功能探析第135-141页
第四章 总结与展望第141-145页
   ·本研究取得的主要研究成果第141-143页
     ·黄河鲤性别特异片段的鉴定及功能探索第141-142页
     ·黄河鲤雌、雄cDNA 消减文库的构建第142-143页
   ·后续研究设想第143-145页
参考文献第145-167页
致谢第167-169页
攻读学位期间发表的学术论文目录第169-170页

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