| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 朊病毒病的主要特征 | 第12-14页 |
| 1.2 朊病毒的基本特征 | 第14-17页 |
| 1.3 Tau蛋白基本特征 | 第17-20页 |
| 1.4 检测朊病毒病的方法 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-32页 |
| 2.1 材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 常用缓冲液及溶液 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要化学试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.4 实验使用抗体 | 第25页 |
| 2.1.5 神经细胞系及动物模型 | 第25页 |
| 2.1.6 CSF样本 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 GST tau-exon2/10蛋白的诱导表达 | 第26-27页 |
| 2.2.2 GST tau-exon2/10蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.3 纯化后GST tau-exon2/10蛋白的透析 | 第28页 |
| 2.2.4 蛋白质浓度测定 | 第28页 |
| 2.2.5 免疫印迹方法检测蛋白含量 | 第28-29页 |
| 2.2.6 脑组织匀浆的制备 | 第29页 |
| 2.2.7 细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.2.8 细胞裂解液的制备 | 第30页 |
| 2.2.9 双抗夹心ELISA | 第30-31页 |
| 2.2.10 统计学处理 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| 3.1 GST tau-exon2/10重组蛋白诱导表达纯化 | 第32-34页 |
| 3.1.1 GST tau-exon2/10重组蛋白表达 | 第32页 |
| 3.1.2 GST tau-exon2/10重组蛋白纯化 | 第32-33页 |
| 3.1.3 GST tau-exon2/10重组蛋白鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2 Tau蛋白外显子2和10单克隆抗体的制备及验证 | 第34-37页 |
| 3.2.1 单抗的制备及特异性评价 | 第34-35页 |
| 3.2.2 利用神经细胞模型验证制备的单抗 | 第35-36页 |
| 3.2.3 利用小鼠脑组织验证制备的单抗 | 第36页 |
| 3.2.4 制备的抗体敏感性检验 | 第36-37页 |
| 3.3 Tau蛋白外显子2和10双抗夹心ELISA方法的建立 | 第37-41页 |
| 3.3.1 包被抗体的选择 | 第37-38页 |
| 3.3.2 包被抗体最佳工作浓度的选择 | 第38-39页 |
| 3.3.3 检测抗体最佳工作浓度的选择 | 第39-41页 |
| 3.3.4 实验条件的最终确立 | 第41页 |
| 3.4 建立的ELISA方法在朊病毒感染患者脑脊液中的初步应用 | 第41-46页 |
| 3.4.1 sCJD患者CSF中含外显子2和10的tau蛋白含量相对于non-CJD患者明显增高 | 第41-44页 |
| 3.4.2 T188K突变gCJD患者CSF中含外显子2和10的tau蛋白含量高于non-CJD | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 5 结论 | 第50-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 个人简历 | 第64页 |
