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异常温度刺激影响心脏疾病的Bim相关机制及干细胞移植干预

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-27页
第一章 引言第27-30页
第二章 极端气候条件对心脏疾病的影响第30-50页
 第一节 极端气候条件对心肌梗死病变以及Bim表达水平的影响第30-43页
     ·前言第30页
     ·材料第30-31页
       ·主要自配试剂第30-31页
       ·主要购置试剂第31页
       ·主要仪器设备第31页
     ·实验动物第31-32页
     ·方法第32-38页
       ·寒冷/暑热干预模型建立第32页
       ·兔心肌梗死模型的建立第32-33页
       ·心肌梗死面积测定第33页
       ·心脏功能测定第33页
       ·血流动力学指标测定第33-34页
       ·心肌组织切片苏木精-伊红(HE)染色第34页
       ·心肌组织iNOS、eNOS mRNA表达检测第34-36页
       ·心肌组织Bim蛋白表达水平检测第36-38页
     ·统计学分析第38页
     ·结果第38-42页
       ·兔心肌梗死模型心电图改变第38-39页
       ·寒冷/暑热干预后心肌梗死面积变化第39页
       ·寒冷/暑热干预后心脏功能及血流动力学变化第39-40页
       ·寒冷/暑热干预后心肌梗死区病理性改变第40页
       ·寒冷/暑热干预后梗死心肌组织iNOS、eNOSmRNA表达变化第40-41页
       ·寒冷/暑热干预后梗死区心肌组织Bim蛋白表达水平变化第41-42页
     ·讨论第42-43页
     ·结论第43页
 第二节 极端气候条件对心脏肥大病变的影响第43-50页
     ·前言第43-44页
     ·材料第44页
     ·实验动物第44页
     ·方法第44-46页
       ·寒冷/暑热干预模型建立第44页
       ·大鼠心脏肥大模型的建立第44-45页
       ·心电图检测第45页
       ·心脏称重第45页
       ·超声心动图检测第45-46页
       ·血流动力学检测第46页
     ·统计学分析第46页
     ·结果第46-49页
       ·大鼠心脏肥大模型的确立第46-48页
       ·寒冷/暑热干预后超声心动图心脏肥大参数改变第48页
       ·寒冷/暑热干预后血流动力学参数改变第48-49页
     ·讨论第49页
     ·结论第49-50页
第三章 冷/热刺激对心肌细胞损伤作用及与Bim蛋白关联性第50-72页
   ·前言第50-51页
   ·材料第51-55页
     ·主要仪器设备第51-52页
     ·购置试剂第52-53页
     ·自配试剂第53-55页
   ·动物来源第55页
   ·方法第55-62页
     ·体外培养心肌细胞冷/热刺激干预第55-56页
     ·新生乳鼠心肌细胞的原代培养第56页
     ·心肌细胞的鉴定第56-57页
     ·Bim siRNA干扰第57页
     ·乳酸脱氢酶(LDH)活性检测第57页
     ·MTS比色法检测心肌细胞存活率第57-58页
     ·心肌细胞内钙离子检测第58页
     ·心肌细胞内活性氧水平检测第58页
     ·心肌细胞线粒体膜电位ΔΨm检测第58-59页
     ·心肌细胞凋亡率检测第59-60页
     ·Western-blotting蛋白表达检测第60-62页
   ·统计学分析第62-63页
   ·结果第63-69页
     ·心肌细胞原代培养及鉴定第63页
     ·乳酸脱氢酶(LDH)活性第63-64页
     ·心肌细胞存活率第64页
     ·心肌细胞内钙离子第64-65页
     ·心肌细胞内活性氧水平第65-66页
     ·心肌细胞线粒体膜电位ΔΨm第66-67页
     ·心肌细胞凋亡率第67-69页
     ·Bim蛋白表达水平变化第69页
   ·讨论第69-71页
   ·结论第71-72页
第四章 Bim介导冷/热刺激对心肌细胞损伤作用的机制探讨第72-88页
 第一节 Bim介导冷/热刺激损伤心肌细胞所关联的信号分子第72-79页
     ·前言第72页
     ·材料第72-73页
       ·主要购置试剂第72-73页
       ·主要仪器设备第73页
     ·动物来源第73页
     ·方法第73-74页
       ·体外培养心肌细胞冷/热刺激干预第73-74页
       ·Western blot检测第74页
     ·统计学分析第74页
     ·结果第74-77页
       ·冷/热刺激下心肌细胞Caspase-9蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用第74-75页
       ·冷/热刺激下心肌细胞nox-1蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用第75-76页
       ·冷/热刺激下心肌细胞p22-phox蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用第76-77页
     ·讨论第77-78页
     ·结论第78-79页
 第二节 冷/热刺激下心肌细胞内ERK5及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路与Bim蛋白表达的关联第79-88页
     ·前言第79页
     ·材料第79-80页
       ·主要购置试剂第79页
       ·主要仪器设备第79-80页
     ·动物来源第80页
     ·方法第80-81页
       ·体外培养心肌细胞冷/热刺激干预第80页
       ·阻断ERK、PI3K/Akt/GSK-3β通路与冷/热刺激下心肌细胞内Bim蛋白表达的关联第80-81页
       ·Western blot检测方法第81页
     ·统计学分析第81页
     ·结果第81-86页
       ·冷/热刺激下心肌细胞ERK5/p-ERK5蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用第82-83页
       ·冷/热刺激下心肌细胞PI3K/p-PI3K蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用第83-84页
       ·冷/热刺激下心肌细胞GSK-3β/p-GSK-3β蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用第84-85页
       ·ERK、PI3K/Akt/GSK-3β通路阻断剂对冷/热刺激下心肌细胞内Bim蛋白表达的影响第85-86页
     ·讨论第86-87页
     ·结论第87-88页
第五章 干细胞移植对寒/暑刺激下心梗基础病变个体的保护作用及对Bim表达的影响第88-99页
   ·前言第88页
   ·材料第88-90页
     ·主要试剂第88-89页
     ·主要仪器设备第89-90页
   ·实验动物第90页
   ·方法第90-93页
     ·骨髓间充质干细胞分离培养第90-92页
     ·建立兔心肌梗死动物模型第92页
     ·BM-MSCs移植入心梗区域第92页
     ·实验动物寒冷/暑热干预第92页
     ·心肌梗死面积测定第92-93页
     ·超声心动图检测第93页
     ·Bim蛋白表达测定第93页
   ·统计学分析第93页
   ·结果第93-96页
     ·BM-MSCs的分离培养和鉴定第93页
     ·BM-MSCs移植对寒冷/暑热干预下心肌梗死基础病变个体心梗面积的影响第93-94页
     ·BM-MSCs移植对寒冷/暑热干预下心肌梗死基础病变个体心脏功能的影响第94-95页
     ·BM-MSCs移植对寒冷/暑热干预下心肌梗死基础病变个体心肌组织Bim表达的影响第95-96页
   ·讨论第96-98页
   ·结论第98-99页
第六章 全文总结与展望第99-101页
致谢第101-102页
参考文献第102-111页
附图第111-118页
攻读学位期间的研究成果及荣誉第118-120页
综述第120-126页

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