摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-27页 |
第一章 引言 | 第27-30页 |
第二章 极端气候条件对心脏疾病的影响 | 第30-50页 |
第一节 极端气候条件对心肌梗死病变以及Bim表达水平的影响 | 第30-43页 |
·前言 | 第30页 |
·材料 | 第30-31页 |
·主要自配试剂 | 第30-31页 |
·主要购置试剂 | 第31页 |
·主要仪器设备 | 第31页 |
·实验动物 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-38页 |
·寒冷/暑热干预模型建立 | 第32页 |
·兔心肌梗死模型的建立 | 第32-33页 |
·心肌梗死面积测定 | 第33页 |
·心脏功能测定 | 第33页 |
·血流动力学指标测定 | 第33-34页 |
·心肌组织切片苏木精-伊红(HE)染色 | 第34页 |
·心肌组织iNOS、eNOS mRNA表达检测 | 第34-36页 |
·心肌组织Bim蛋白表达水平检测 | 第36-38页 |
·统计学分析 | 第38页 |
·结果 | 第38-42页 |
·兔心肌梗死模型心电图改变 | 第38-39页 |
·寒冷/暑热干预后心肌梗死面积变化 | 第39页 |
·寒冷/暑热干预后心脏功能及血流动力学变化 | 第39-40页 |
·寒冷/暑热干预后心肌梗死区病理性改变 | 第40页 |
·寒冷/暑热干预后梗死心肌组织iNOS、eNOSmRNA表达变化 | 第40-41页 |
·寒冷/暑热干预后梗死区心肌组织Bim蛋白表达水平变化 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
·结论 | 第43页 |
第二节 极端气候条件对心脏肥大病变的影响 | 第43-50页 |
·前言 | 第43-44页 |
·材料 | 第44页 |
·实验动物 | 第44页 |
·方法 | 第44-46页 |
·寒冷/暑热干预模型建立 | 第44页 |
·大鼠心脏肥大模型的建立 | 第44-45页 |
·心电图检测 | 第45页 |
·心脏称重 | 第45页 |
·超声心动图检测 | 第45-46页 |
·血流动力学检测 | 第46页 |
·统计学分析 | 第46页 |
·结果 | 第46-49页 |
·大鼠心脏肥大模型的确立 | 第46-48页 |
·寒冷/暑热干预后超声心动图心脏肥大参数改变 | 第48页 |
·寒冷/暑热干预后血流动力学参数改变 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49页 |
·结论 | 第49-50页 |
第三章 冷/热刺激对心肌细胞损伤作用及与Bim蛋白关联性 | 第50-72页 |
·前言 | 第50-51页 |
·材料 | 第51-55页 |
·主要仪器设备 | 第51-52页 |
·购置试剂 | 第52-53页 |
·自配试剂 | 第53-55页 |
·动物来源 | 第55页 |
·方法 | 第55-62页 |
·体外培养心肌细胞冷/热刺激干预 | 第55-56页 |
·新生乳鼠心肌细胞的原代培养 | 第56页 |
·心肌细胞的鉴定 | 第56-57页 |
·Bim siRNA干扰 | 第57页 |
·乳酸脱氢酶(LDH)活性检测 | 第57页 |
·MTS比色法检测心肌细胞存活率 | 第57-58页 |
·心肌细胞内钙离子检测 | 第58页 |
·心肌细胞内活性氧水平检测 | 第58页 |
·心肌细胞线粒体膜电位ΔΨm检测 | 第58-59页 |
·心肌细胞凋亡率检测 | 第59-60页 |
·Western-blotting蛋白表达检测 | 第60-62页 |
·统计学分析 | 第62-63页 |
·结果 | 第63-69页 |
·心肌细胞原代培养及鉴定 | 第63页 |
·乳酸脱氢酶(LDH)活性 | 第63-64页 |
·心肌细胞存活率 | 第64页 |
·心肌细胞内钙离子 | 第64-65页 |
·心肌细胞内活性氧水平 | 第65-66页 |
·心肌细胞线粒体膜电位ΔΨm | 第66-67页 |
·心肌细胞凋亡率 | 第67-69页 |
·Bim蛋白表达水平变化 | 第69页 |
·讨论 | 第69-71页 |
·结论 | 第71-72页 |
第四章 Bim介导冷/热刺激对心肌细胞损伤作用的机制探讨 | 第72-88页 |
第一节 Bim介导冷/热刺激损伤心肌细胞所关联的信号分子 | 第72-79页 |
·前言 | 第72页 |
·材料 | 第72-73页 |
·主要购置试剂 | 第72-73页 |
·主要仪器设备 | 第73页 |
·动物来源 | 第73页 |
·方法 | 第73-74页 |
·体外培养心肌细胞冷/热刺激干预 | 第73-74页 |
·Western blot检测 | 第74页 |
·统计学分析 | 第74页 |
·结果 | 第74-77页 |
·冷/热刺激下心肌细胞Caspase-9蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用 | 第74-75页 |
·冷/热刺激下心肌细胞nox-1蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用 | 第75-76页 |
·冷/热刺激下心肌细胞p22-phox蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用 | 第76-77页 |
·讨论 | 第77-78页 |
·结论 | 第78-79页 |
第二节 冷/热刺激下心肌细胞内ERK5及PI3K/Akt/GSK-3β信号通路与Bim蛋白表达的关联 | 第79-88页 |
·前言 | 第79页 |
·材料 | 第79-80页 |
·主要购置试剂 | 第79页 |
·主要仪器设备 | 第79-80页 |
·动物来源 | 第80页 |
·方法 | 第80-81页 |
·体外培养心肌细胞冷/热刺激干预 | 第80页 |
·阻断ERK、PI3K/Akt/GSK-3β通路与冷/热刺激下心肌细胞内Bim蛋白表达的关联 | 第80-81页 |
·Western blot检测方法 | 第81页 |
·统计学分析 | 第81页 |
·结果 | 第81-86页 |
·冷/热刺激下心肌细胞ERK5/p-ERK5蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用 | 第82-83页 |
·冷/热刺激下心肌细胞PI3K/p-PI3K蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用 | 第83-84页 |
·冷/热刺激下心肌细胞GSK-3β/p-GSK-3β蛋白表达变化及Bim siRNA的影响作用 | 第84-85页 |
·ERK、PI3K/Akt/GSK-3β通路阻断剂对冷/热刺激下心肌细胞内Bim蛋白表达的影响 | 第85-86页 |
·讨论 | 第86-87页 |
·结论 | 第87-88页 |
第五章 干细胞移植对寒/暑刺激下心梗基础病变个体的保护作用及对Bim表达的影响 | 第88-99页 |
·前言 | 第88页 |
·材料 | 第88-90页 |
·主要试剂 | 第88-89页 |
·主要仪器设备 | 第89-90页 |
·实验动物 | 第90页 |
·方法 | 第90-93页 |
·骨髓间充质干细胞分离培养 | 第90-92页 |
·建立兔心肌梗死动物模型 | 第92页 |
·BM-MSCs移植入心梗区域 | 第92页 |
·实验动物寒冷/暑热干预 | 第92页 |
·心肌梗死面积测定 | 第92-93页 |
·超声心动图检测 | 第93页 |
·Bim蛋白表达测定 | 第93页 |
·统计学分析 | 第93页 |
·结果 | 第93-96页 |
·BM-MSCs的分离培养和鉴定 | 第93页 |
·BM-MSCs移植对寒冷/暑热干预下心肌梗死基础病变个体心梗面积的影响 | 第93-94页 |
·BM-MSCs移植对寒冷/暑热干预下心肌梗死基础病变个体心脏功能的影响 | 第94-95页 |
·BM-MSCs移植对寒冷/暑热干预下心肌梗死基础病变个体心肌组织Bim表达的影响 | 第95-96页 |
·讨论 | 第96-98页 |
·结论 | 第98-99页 |
第六章 全文总结与展望 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-111页 |
附图 | 第111-118页 |
攻读学位期间的研究成果及荣誉 | 第118-120页 |
综述 | 第120-126页 |