| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 稻粒黑粉病的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 稻粒黑粉病的发生与危害 | 第12页 |
| 1.1.2 稻粒黑粉病的侵染机制 | 第12-13页 |
| 1.1.3 稻粒黑粉病的流行规律 | 第13-14页 |
| 1.1.4 稻粒黑粉病的防治 | 第14页 |
| 1.2 稻曲病的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 稻曲病的发生与危害 | 第14-15页 |
| 1.2.2 稻曲病的侵染机制 | 第15页 |
| 1.2.3 稻曲病的流行规律 | 第15-16页 |
| 1.2.4 稻曲病的防治 | 第16页 |
| 1.3 PCR技术在真菌病害检测的应用 | 第16-18页 |
| 1.3.1 PCR技术的发展应用 | 第16-17页 |
| 1.3.2 Real-timePCR技术的发展应用 | 第17页 |
| 1.3.3 ddPCR技术的发展应用 | 第17-18页 |
| 1.4 MALDI-TOF-MS技术在真菌病害检测的应用 | 第18-20页 |
| 1.4.1 MALDI-TOF-MS原理 | 第18页 |
| 1.4.2 MALDI-TOF-MS检测植物病原真菌 | 第18-19页 |
| 1.4.3 MALDI-TOF-MS的数据库 | 第19-20页 |
| 2 引言 | 第20-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-31页 |
| 3.1 供试菌株 | 第22页 |
| 3.2 供试试剂 | 第22页 |
| 3.3 供试仪器 | 第22-23页 |
| 3.4 供试引物 | 第23页 |
| 3.5 病原真菌的分离和纯化 | 第23-24页 |
| 3.5.1 稻粒黑粉菌病谷的采集和保存 | 第23-24页 |
| 3.5.2 稻粒黑粉病菌孢子的获得 | 第24页 |
| 3.5.3 稻曲球的采集和保存 | 第24页 |
| 3.5.4 稻曲病菌孢子的获得 | 第24页 |
| 3.6 真菌基因组DNA提取 | 第24-25页 |
| 3.7 病原真菌孢子Real-timePCR检测体系的建立 | 第25-26页 |
| 3.7.1 Real-timePCR反应 | 第25页 |
| 3.7.2 Real-timePCR标准曲线的绘制 | 第25-26页 |
| 3.7.3 Real-timePCR结果和显微计数结果的相关性 | 第26页 |
| 3.8 病原真菌孢子ddPCR检测体系的建立 | 第26-28页 |
| 3.8.1 ddPCR反应 | 第27页 |
| 3.8.2 ddPCR标准曲线的绘制 | 第27-28页 |
| 3.9 病原真菌孢子MALDI-TOF-MS检测体系的建立 | 第28-31页 |
| 3.9.1 MALDI-TOF-MS参数 | 第28页 |
| 3.9.2 细胞内含物粗提取 | 第28-29页 |
| 3.9.3 MALDI-TOF-MS基质 | 第29页 |
| 3.9.4 MALDI-TOF-MS点样方法 | 第29页 |
| 3.9.5 重复性试验 | 第29-30页 |
| 3.9.6 数据库的完善 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-48页 |
| 4.1 病原真菌孢子Real-timePCR检测体系的建立 | 第31-37页 |
| 4.1.1 稻粒黑粉病菌孢子Real-timePCR标准曲线 | 第31-32页 |
| 4.1.2 稻曲病菌孢子Real-timePCR标准曲线 | 第32-33页 |
| 4.1.3 可靠性检验 | 第33-34页 |
| 4.1.3.1 稻粒黑粉病菌Real-timePCR检测的技术重复 | 第33-34页 |
| 4.1.3.2 稻曲病菌Real-timePCR检测的技术重复 | 第34页 |
| 4.1.4 Real-timePCR结果和掺入孢子数检测结果的相关性 | 第34-37页 |
| 4.1.4.1 稻粒黑粉病菌Real-timePCR结果和掺入孢子数检测结果的相关性 | 第35-36页 |
| 4.1.4.2 稻曲病菌Real-timePCR结果和掺入孢子数检测结果的相关性 | 第36-37页 |
| 4.2 病原真菌孢子ddPCR检测体系的建立 | 第37-40页 |
| 4.2.1 稻粒黑粉病菌孢子ddPCR标准曲线 | 第37-38页 |
| 4.2.2 稻曲病菌孢子ddPCR标准曲线 | 第38-40页 |
| 4.3 病原真菌孢子MALDI-TOF-MS检测体系的建立 | 第40-48页 |
| 4.3.1 样品处理方法的确定 | 第40-44页 |
| 4.3.1.1 细胞内含物粗提取方法 | 第40-42页 |
| 4.3.1.2 MALDI-TOF-MS基质 | 第42-43页 |
| 4.3.1.3 MALDI-TOF-MS点样方法 | 第43-44页 |
| 4.3.2 可靠性检验 | 第44-47页 |
| 4.3.2.1 同一样品的重复性试验 | 第44-45页 |
| 4.3.2.2 批间样品的重复性试验 | 第45-47页 |
| 4.3.3 MALDI-TOF-MS数据库的建立 | 第47-48页 |
| 5 讨论 | 第48-51页 |
| 5.1 Real-timePCR技术在植物病原真菌孢子检测中的应用 | 第48-49页 |
| 5.2 ddPCR技术在物病原真菌孢子检测中的应用 | 第49页 |
| 5.3 MALDI-TOF-MS技术在病原真菌鉴定中的应用 | 第49-51页 |
| 6 结论 | 第51-53页 |
| 6.1 稻粒黑粉病菌孢子Real-timePCR快速检测体系的建立 | 第51页 |
| 6.2 稻曲病菌孢子Real-timePCR快速检测体系的建立 | 第51页 |
| 6.3 植物病原真菌孢子ddPCR检测方法研究 | 第51页 |
| 6.4 植物病原真菌孢子MALDI-TOF-MS鉴定规范化条件的建立 | 第51-52页 |
| 6.5 植物病原真菌孢子MALDI-TOF-MS标准指纹图谱的建立 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 个人简介 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60页 |
