| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 常用英文缩写词 | 第12-13页 |
| 1. 前言 | 第13-28页 |
| 1.1 PI(3,5)P2的信号调控网络简介 | 第13-15页 |
| 1.2 PI(3,5)P2的功能、效应蛋白和下游通路 | 第15-17页 |
| 1.3 PI(3,5)P2在动物生理和人类疾病中的作用 | 第17页 |
| 1.4 PIKfyve另一个催化产物PI5P在细胞生理学的作用 | 第17-18页 |
| 1.5 PIKfyve底物PI3P在自噬中的功能 | 第18-20页 |
| 1.6 PIKfyve对细胞生理功能的调控 | 第20-21页 |
| 1.6.1 PIKfyve的抑制能够增加外体的释放 | 第20-21页 |
| 1.6.2 PIKfyve能够调控内吞相关途径 | 第21页 |
| 1.6.3 PIKfyve能够调控肿瘤细胞的迁移和侵袭 | 第21页 |
| 1.7 PIKfyve抑制剂的研究进展 | 第21-26页 |
| 1.7.1 YM-201636 | 第21-22页 |
| 1.7.2 MF4 | 第22-24页 |
| 1.7.3 阿吡莫德 | 第24-25页 |
| 1.7.4 APY0201 | 第25-26页 |
| 1.8 本课题的研究背景、目的及意义 | 第26-28页 |
| 2. 材料与方法 | 第28-39页 |
| 2.1 材料 | 第28-32页 |
| 2.1.1 化合物来源 | 第28页 |
| 2.1.2 细胞株来源 | 第28页 |
| 2.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要耗材和仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.5 主要试剂的配置 | 第30-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 细胞实验 | 第32-36页 |
| 2.2.2 蛋白电泳和Western Blot | 第36-39页 |
| 3. 结果与分析 | 第39-56页 |
| 3.1 筛选出具有空泡化表征的化合物 | 第39-40页 |
| 3.2 体外HW-05-131-01的激酶谱检测 | 第40页 |
| 3.3 PIKfyve的缺失能够引起空泡化 | 第40-41页 |
| 3.4 Western blot检测HW-05-131-01对PIKfyve的影响 | 第41-42页 |
| 3.5 细胞动态观察结果 | 第42-43页 |
| 3.6 HW-05-131-01对胞内空泡化程度的影响 | 第43-46页 |
| 3.6.1 HW-05-131-01浓度梯度对空泡化程度的影响 | 第43-44页 |
| 3.6.2 洗脱HW-05-131-01后细胞空泡化程度的变化 | 第44-45页 |
| 3.6.3 HW-05-131-01作用时间梯度对空泡化程度的影响 | 第45-46页 |
| 3.7 寡营养条件对细胞产生空泡化的影响 | 第46-51页 |
| 3.7.1 氨基酸匮乏状态对加药后细胞产生空泡化的影响 | 第46-47页 |
| 3.7.2 部分必需氨基酸对加药后细胞产生空泡化的影响 | 第47-49页 |
| 3.7.3 葡萄糖对加药后细胞产生空泡化的影响 | 第49-50页 |
| 3.7.4 低氧对加药后细胞产生空泡化的影响 | 第50-51页 |
| 3.8 HW-05-131-01长期对细胞生长的影响 | 第51-52页 |
| 3.9 HW-05-131-01对内吞膜系统稳态的影响 | 第52-56页 |
| 3.9.1 HW-05-131-01导致内吞过程的阻滞 | 第52-54页 |
| 3.9.2 HW-05-131-01导致溶酶体功能的阻滞 | 第54-56页 |
| 4. 讨论与结论 | 第56-61页 |
| 4.1 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1.1 利用高通量筛选模型指示HW-05-131-01潜在的作用激酶 | 第56页 |
| 4.1.2 HW-05-131-01对不同细胞内PIKfyve的抑制效果存在差异 | 第56-57页 |
| 4.1.3 已知PIKfyve抑制剂结构的比较 | 第57-58页 |
| 4.1.4 HW-05-131-01引起细胞的死亡可能通过一种非细胞凋亡的方式 | 第58-59页 |
| 4.2 结论 | 第59-61页 |
| 5. 展望 | 第61-63页 |
| 5.1 HW-05-131-01对PIKfyve的抑制在动物实验上的验证 | 第61页 |
| 5.2 进一步表明HW-05-131-01引起细胞内空泡是作用在PIKfyve靶点上 | 第61页 |
| 5.3 进一步验证HW-05-131-01是否通过非凋亡性死亡的方式引起细胞死亡 | 第61-62页 |
| 5.4 改良HW-05-131-01的结构来获得活性更高的衍生物 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
