| 摘要 | 第13-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 1 前言 | 第16-29页 |
| 1.1 酪氨酸酶的研究进展 | 第16-23页 |
| 1.1.1 酪氨酸酶的性质研究 | 第16-18页 |
| 1.1.2 酪氨酸酶的结构研究进展 | 第18-20页 |
| 1.1.3 酪氨酸酶的催化性质 | 第20-23页 |
| 1.2 酪氨酸酶激活剂的研究概况 | 第23-24页 |
| 1.2.1 天然成分来源的酪氨酸酶激活剂 | 第23-24页 |
| 1.2.2 化学合成来源的酪氨酸酶激活剂 | 第24页 |
| 1.3 黑色素细胞中黑色素合成调控因子的研究概况 | 第24-26页 |
| 1.3.1 酪氨酸酶基因家族 | 第25页 |
| 1.3.2 小眼相关转录因子(Microphthalmia-associatated transcription factor, MITF) | 第25页 |
| 1.3.3 α-黑色素细胞刺激素(α-MSH) | 第25-26页 |
| 1.4 咖啡酸衍生物的研究进展 | 第26-27页 |
| 1.4.1 咖啡酸酯类衍生物 | 第26-27页 |
| 1.4.2 咖啡酸酰胺类衍生物 | 第27页 |
| 1.4.3 咖啡酸其他类衍生物 | 第27页 |
| 1.5 本课题的研究内容及意义 | 第27-29页 |
| 2 实验试剂与仪器 | 第29-31页 |
| 2.1 主要实验试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 3 实验方法 | 第31-39页 |
| 3.1 咖啡酸对酪氨酸酶活性的影响 | 第31页 |
| 3.2 咖啡酸衍生物的合成 | 第31-33页 |
| 3.3 咖啡酸衍生物的结构鉴定 | 第33页 |
| 3.3.1 红外光谱分析 | 第33页 |
| 3.3.2 质谱分析 | 第33页 |
| 3.3.3 核磁分析 | 第33页 |
| 3.4 酶学实验 | 第33-35页 |
| 3.4.1 咖啡酸衍生物作为酪氨酸酶底物的排除实验 | 第33-34页 |
| 3.4.2 咖啡酸衍生物对酪氨酸酶活性的作用 | 第34页 |
| 3.4.2.1 咖啡酸衍生物对二酚酶的影响 | 第34页 |
| 3.4.2.2 单酚酶活性测定 | 第34页 |
| 3.4.3 酪氨酸酶二酚酶激活类型的测定 | 第34-35页 |
| 3.4.4 全波长扫描 | 第35页 |
| 3.4.5 咖啡酸衍生物与不同金属离子复配后对酪氨酸酶活力的影响 | 第35页 |
| 3.5 咖啡酸衍生物激活作用的分析 | 第35-36页 |
| 3.5.1 铜离子结合实验 | 第35页 |
| 3.5.2 荧光淬灭实验 | 第35-36页 |
| 3.5.3 咖啡酸衍生物对高碘酸钠氧化L-DOPA反应光谱的影响 | 第36页 |
| 3.5.4 分子对接 | 第36页 |
| 3.6 咖啡酸衍生物对多巴色素自动氧化生成黑色素量的测定 | 第36-37页 |
| 3.7 咖啡酸衍生物对细胞(L02、M14)增殖的影响 | 第37页 |
| 3.8 咖啡酸衍生物对M14细胞中酪氨酸酶的作用 | 第37-39页 |
| 3.8.1 咖啡酸衍生物对M14细胞内酪氨酸酶活力的影响 | 第37-38页 |
| 3.8.2 蛋白样品的制备 | 第38页 |
| 3.8.3 细胞内酪氨酸酶相关蛋白表达量研究 | 第38-39页 |
| 4 实验结果 | 第39-76页 |
| 4.1 母环的选择 | 第39-40页 |
| 4.1.1 咖啡酸对二酚酶的激活作用 | 第39页 |
| 4.1.2 咖啡酸与酪氨酸酶底物的相互作用 | 第39-40页 |
| 4.2 咖啡酸衍生物的合成及结构鉴定 | 第40-51页 |
| 4.2.1 咖啡酸衍生物的结构式 | 第40-51页 |
| 4.3 咖啡酸衍生物对蘑菇酪氨酸酶活力的影响 | 第51-56页 |
| 4.3.1 咖啡酸衍生物不与蘑菇酪氨酸酶相互作用 | 第51-54页 |
| 4.3.2 咖啡酸衍生物对酪氨酸酶二酚酶的激活作用 | 第54-55页 |
| 4.3.3 咖啡酸衍生物对酪氨酸酶单酚酶的激活作用 | 第55-56页 |
| 4.4 咖啡酸衍生物对蘑菇酪氨酸酶的激活类型 | 第56-61页 |
| 4.4.1 咖啡酸衍生物Z-1的激活类型及激活常数 | 第56-57页 |
| 4.4.2 咖啡酸衍生物Z-2的激活类型及激活常数 | 第57-58页 |
| 4.4.3 咖啡酸衍生物Z-3的激活类型及激活常数 | 第58-59页 |
| 4.4.4 咖啡酸衍生物Z-4的激活类型及激活常数 | 第59-60页 |
| 4.4.5 咖啡酸衍生物Z-5的激活类型及激活常数 | 第60-61页 |
| 4.5 咖啡酸衍生物对酪氨酸酶催化L-DOPA氧化反应光谱的影响 | 第61-63页 |
| 4.6 咖啡酸衍生物与不同金属离子复配 | 第63-65页 |
| 4.6.1 Z-1与不同金属离子复配后对酪氨酸酶活力的影响 | 第63页 |
| 4.6.2 Z-3与不同金属离子复配后对酪氨酸酶活力的影响 | 第63-64页 |
| 4.6.3 Z-5与不同金属离子复配后对酪氨酸酶活力的影响 | 第64-65页 |
| 4.7 咖啡酸衍生物与酪氨酸酶的作用机理研究 | 第65-72页 |
| 4.7.1 咖啡酸衍生物与铜离子结合实验 | 第65-66页 |
| 4.7.2 荧光淬灭实验 | 第66-68页 |
| 4.7.3 咖啡酸衍生物对高碘酸钠氧化L-DOPA反应光谱的影响 | 第68-69页 |
| 4.7.4 咖啡酸衍生物与酪氨酸酶PP03模型的分子对接研究 | 第69-72页 |
| 4.8 咖啡酸衍生物对L-DOPA自动氧化生成黑色素的影响 | 第72页 |
| 4.9 MTT法检测咖啡酸衍生物对细胞的增殖影响 | 第72-74页 |
| 4.10 咖啡酸衍生物对M14细胞中酪氨酸酶的作用 | 第74-76页 |
| 4.10.1 咖啡酸衍生物对M14细胞中酪氨酸酶的激活作用 | 第74页 |
| 4.10.2 咖啡酸衍生物对M14细胞的酪氨酸酶相关蛋白表达影响 | 第74-76页 |
| 5 结论与讨论 | 第76-80页 |
| 5.1 咖啡酸衍生物对蘑菇酪氨酸酶的激活作用比较 | 第76-77页 |
| 5.2 咖啡酸衍生物对蘑菇酪氨酸酶的紫外可见光谱研究 | 第77页 |
| 5.3 咖啡酸衍生物激活机制的探究 | 第77-78页 |
| 5.4 咖啡酸衍生物对细胞体外增殖的影响 | 第78页 |
| 5.5 咖啡酸衍生物对人体黑色素瘤M14细胞中酪氨酸酶的影响 | 第78页 |
| 5.6 咖啡酸衍生物对M14细胞中黑色素生产的影响 | 第78-80页 |
| 6 展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 硕士期间发表的文章及专利 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
