摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第9-19页 |
一、糖尿病 | 第9-10页 |
二、非胰岛素类血糖调节药物 | 第10-14页 |
(一)磺脲类 | 第10页 |
(二)双胍类 | 第10-11页 |
(三)格列奈类 | 第11页 |
(四)胰岛素增敏剂 | 第11页 |
(五)α-糖苷酶抑制剂 | 第11-12页 |
(六)钠-葡萄糖协同转运蛋白-2抑制剂 | 第12-13页 |
(七)肠促胰素类药物 | 第13-14页 |
三、胰高血糖素样肽-1 | 第14-19页 |
(一)GLP-1的合成与降解 | 第15-16页 |
(二)GLP-1与糖尿病相关的生理功能 | 第16-19页 |
第一部分 材料和方法 | 第19-33页 |
一、仪器与试剂 | 第19-21页 |
(一)实验仪器 | 第19-20页 |
(二)试剂 | 第20-21页 |
二、实验方法 | 第21-33页 |
(一)工程菌摇瓶培养生长曲线测定及培养条件摸索试验 | 第21-23页 |
(二)工程菌中试发酵及发酵曲线测定试验 | 第23-24页 |
(三)工程菌裂解及包涵体洗涤试验 | 第24-25页 |
(四)Ni柱纯化及柱上复性试验 | 第25-27页 |
(五)阴离子交换层析(DEAE)去除咪唑及蛋白浓缩试验 | 第27页 |
(六)除内毒素试验 | 第27-29页 |
(七)光谱扫描及浓度曲线测定试验 | 第29页 |
(八)免疫印记分析试验 | 第29-30页 |
(九)层析分析仪蛋白质纯度分析试验 | 第30页 |
(十)601-GLP-1血糖调节药效学试验 | 第30-33页 |
第二部分 实验结果 | 第33-48页 |
一、工程菌摇瓶培养生长曲线及培养条件结果 | 第33-35页 |
(一)摇瓶生长曲线结果 | 第33-34页 |
(二)最适IPTG诱导浓度结果 | 第34页 |
(三)最适诱导时间结果 | 第34-35页 |
二、工程菌发酵罐培养发酵曲线 | 第35-36页 |
三、包涵体洗涤结果 | 第36页 |
四、Ni柱纯化及复性结果 | 第36-38页 |
五、阴离子交换层析(DEAE)去除咪唑及蛋白浓缩结果 | 第38-39页 |
六、除内毒素实验结果 | 第39页 |
七、光谱扫描及浓度曲线测定结果 | 第39-40页 |
八、层析分析仪蛋白纯度分析结果 | 第40-41页 |
九、Westenblot检测结果 | 第41-42页 |
十、血糖调节药效学实验结果 | 第42-48页 |
(一)STZ诱导的Ⅱ型糖尿病模型建立 | 第42-43页 |
(二)601-GLP-1的降糖实验结果 | 第43-44页 |
(三)601-GLP-1恢复Ⅱ型糖尿病模型鼠对葡萄糖耐受能力实验结果 | 第44-45页 |
(四)601-GLP-1提高正常鼠对葡萄糖的耐受能力实验结果 | 第45-46页 |
(五)601-GLP-1促胰岛素分泌作用实验结果 | 第46-48页 |
第三部分 讨论 | 第48-51页 |
第四部分 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |