| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略语 | 第10-14页 |
| 第一部分 ZNT1在膀胱癌组织中的表达及临床意义 | 第14-30页 |
| 1 前言 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-22页 |
| 2.1 实验材料与主要试剂、仪器 | 第15-17页 |
| 2.1.1 标本 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第15-17页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 免疫组化(SP法) | 第17-18页 |
| 2.2.2 Real-Time RTPCR | 第18-19页 |
| 2.2.3 Western Blot | 第19-22页 |
| 3 统计方法 | 第22-23页 |
| 4 实验结果 | 第23-27页 |
| 4.1 免疫组化 | 第23-24页 |
| 4.2 Real Time RT-PCR | 第24-25页 |
| 4.3 Western Blot | 第25-27页 |
| 5 讨论 | 第27-29页 |
| 6 结论 | 第29-30页 |
| 第二部分 siRNA干扰ZNT1表达对膀胱癌BIU87细胞株生物学行为的影响 | 第30-46页 |
| 1 前言 | 第30-31页 |
| 2 材料、仪器和方法 | 第31-37页 |
| 2.1 材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.2.1 D-Hank's液配置 | 第32页 |
| 2.2.2 0.25%胰酶配制 | 第32-33页 |
| 2.2.3 细胞冻存液配制 | 第33页 |
| 2.2.4 HEPES液配制 | 第33页 |
| 2.2.5 MTT溶液的配制 | 第33页 |
| 2.2.6 细胞培养,传代和冻存 | 第33页 |
| 2.2.7 免疫荧光方法检测膀胱癌细胞系中ZNT1蛋白的亚细胞定位情况 | 第33-34页 |
| 2.2.8 瞬时转染 | 第34页 |
| 2.2.9 MTT实验 | 第34-35页 |
| 2.2.10 侵袭实验 | 第35页 |
| 2.2.11 划痕实验 | 第35-37页 |
| 3 统计方法 | 第37-38页 |
| 4 实验结果 | 第38-43页 |
| 4.1 ZNT1蛋白在不同膀胱细胞系中的表达情况 | 第38-40页 |
| 4.1.1 免疫荧光方法检测不同膀胱细胞系中ZNT1蛋白的定位情况 | 第38-39页 |
| 4.1.2 ZNT1 mRNA在膀胱细胞SV-HUC-Ⅰ、BIU87,T24,5637中的表达情况 | 第39页 |
| 4.1.3 ZNT1蛋白在4种膀胱细胞系中的表达情况 | 第39-40页 |
| 4.2 使用三组ZnT1 siRNA序列转染24小时后检测其对BIU87细胞ZNT1mRNA抑制情况 | 第40页 |
| 4.3 转染48小时后检测ZNT1蛋白的表达 | 第40-41页 |
| 4.4 MTT检测ZNT1-siRNA对细胞增殖的影响 | 第41页 |
| 4.5 侵袭实验 | 第41-42页 |
| 4.6 细胞划痕实验 | 第42-43页 |
| 5 讨论 | 第43-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 综述 | 第49-58页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
