致谢 | 第5-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-17页 |
1.1 猪源大肠杆菌耐药现状与耐药基因的流行传播 | 第10-11页 |
1.1.1 猪源大肠杆菌耐药现状 | 第10-11页 |
1.1.2 猪源大肠杆菌耐药基因的流行传播 | 第11页 |
1.2 猪源大肠杆菌对粘菌素耐药现状 | 第11-12页 |
1.3 mcr-1的流行概况 | 第12-14页 |
1.3.1 动物或动物源食品中mcr-1的流行现状 | 第12-13页 |
1.3.2 人源及环境中mcr-1的流行现状 | 第13-14页 |
1.4 细菌对粘菌素耐药机制 | 第14-15页 |
1.5 mcr-1的传播机制 | 第15-16页 |
1.5.1 质粒介导mcr-1传播 | 第15-16页 |
1.5.2 插入序列ISApl1 | 第16页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
试验一河南等七省猪源大肠杆菌分离及mcr-1的检测与流行分析 | 第17-26页 |
1 引言 | 第17页 |
2 材料与方法 | 第17-19页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 菌株 | 第17页 |
2.1.2 试验药品及配制 | 第17页 |
2.1.3 培养基 | 第17-18页 |
2.1.4 试验试剂 | 第18页 |
2.1.5 试验仪器 | 第18页 |
2.2 方法 | 第18-19页 |
2.2.1 细菌分离与鉴定 | 第18-19页 |
2.2.2 药敏试验 | 第19页 |
2.2.3 DNA的提取 | 第19页 |
2.2.4 PCR扩增及测序 | 第19页 |
2.2.5 统计分析 | 第19页 |
3 结果与分析 | 第19-24页 |
3.1 大肠杆菌分离鉴定结果分析 | 第19-20页 |
3.2 药敏试验结果与分析 | 第20-21页 |
3.3 患病猪和健康猪源大肠杆菌耐药表型对比分析 | 第21页 |
3.4 mcr-1的流行 | 第21-23页 |
3.5 携带和不携带mcr-1的大肠杆菌耐药谱对比分析 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24-25页 |
4.1 猪源大肠杆菌的分离特性 | 第24页 |
4.2 大肠杆菌多重耐药分析 | 第24页 |
4.3 mcr-1基因流行情况及耐药差异分析 | 第24-25页 |
5 结论 | 第25-26页 |
试验二 猪源大肠杆菌耐药基因的检测与分析 | 第26-35页 |
1 引言 | 第26页 |
2 材料与方法 | 第26页 |
2.1 材料 | 第26页 |
2.1.1 模板DNA的提取 | 第26页 |
2.1.2 试验试剂 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26页 |
2.2.1 DNA模板的提取 | 第26页 |
2.2.2 PCR扩增及测序 | 第26页 |
2.2.3 β-内酰胺类耐药基因引物及参考文献 | 第26页 |
2.2.6 氨基糖苷类耐药基因引物 | 第26页 |
2.2.4 四环素类、酰胺醇类和磺胺类耐药基因引物及参考文献 | 第26页 |
2.2.5 喹诺酮类、多药外排泵类耐药基因引物及参考文献 | 第26页 |
3 结果与分析 | 第26-33页 |
3.1 ESBLs耐药基因检测结果与分析 | 第26-29页 |
3.2 氨基糖苷类耐药基因检测结果与分析 | 第29-30页 |
3.3 四环素类、酰胺醇类和磺胺类耐药基因检测结果与分析 | 第30-31页 |
3.4 喹诺酮类、多药外排泵类耐药基因检测结果与分析 | 第31-33页 |
4 讨论 | 第33-34页 |
5 结论 | 第34-35页 |
试验三 mcr-1的快速散播机制 | 第35-44页 |
1 引言 | 第35页 |
2 材料与方法 | 第35-37页 |
2.1 材料 | 第35页 |
2.1.1 菌株 | 第35页 |
2.1.2 试验药品及配制 | 第35页 |
2.1.3 培养基 | 第35页 |
2.1.4 试验试剂 | 第35页 |
2.1.5 试验仪器 | 第35页 |
2.2 方法 | 第35-37页 |
2.2.1 药敏试验 | 第35页 |
2.2.2 DNA的提取 | 第35页 |
2.2.3 mcr-1基因的检测 | 第35页 |
2.2.4 ERIC-PCR分型 | 第35-36页 |
2.2.5 mcr-1阳性菌株MLST分型 | 第36页 |
2.2.6 mcr-1阳性菌接合试验 | 第36-37页 |
2.2.7 携带mcr-1基因的质粒测序 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-42页 |
3.1 药敏结果 | 第37页 |
3.2 mcr-1阳性株ERIC分型结果 | 第37-38页 |
3.3 mcr-1阳性菌株MLST分型结果 | 第38-40页 |
3.4 质粒接合结果 | 第40-41页 |
3.5 质粒测序结果 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
全文结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-54页 |
英文摘要 | 第54-55页 |
附录一 :缩略词表 | 第56页 |