| 摘要 | 第9-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩略词 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-46页 |
| 1 大豆花叶病毒概述 | 第18-23页 |
| 1.1 大豆花叶病毒理化性质 | 第18页 |
| 1.2 大豆花叶病毒基因组及其功能 | 第18-20页 |
| 1.3 大豆感染SMV后的症状 | 第20-22页 |
| 1.3.1 植株外部症状 | 第20-21页 |
| 1.3.2 感病植株叶片内部症状 | 第21-22页 |
| 1.4 大豆花叶病毒株系的划分 | 第22-23页 |
| 2 大豆花叶病毒的传播 | 第23-25页 |
| 2.1 大豆花叶病毒的传播介体 | 第23-24页 |
| 2.2 蚜虫传播病毒的方式 | 第24页 |
| 2.3 大豆花叶病毒的寄主范围 | 第24-25页 |
| 2.4 大豆花叶病毒的流行 | 第25页 |
| 2.4.1 大豆品种 | 第25页 |
| 2.4.2 侵染源 | 第25页 |
| 2.4.3 环境条件 | 第25页 |
| 3 大豆对SMV抗性机制及遗传方式研究 | 第25-31页 |
| 3.1 生理生化抗性研究 | 第25-26页 |
| 3.2 成株抗性遗传研究 | 第26-28页 |
| 3.2.1 大豆对SMV抗侵染遗传 | 第27页 |
| 3.2.2 抗扩展遗传研究 | 第27-28页 |
| 3.3 种粒抗性遗传 | 第28-31页 |
| 3.3.1 籽粒斑驳的研究 | 第28-29页 |
| 3.3.2 种传抗性的研究 | 第29-31页 |
| 4 植物抗病基因 | 第31-38页 |
| 4.1 植物基础抗性 | 第32页 |
| 4.2 R基因调控的病原抗性 | 第32-35页 |
| 4.3 R基因种类 | 第35-36页 |
| 4.4 SMV抗病基因相关研究 | 第36-38页 |
| 5 病毒表达载体的构建及应用 | 第38-41页 |
| 5.1 病毒表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 5.1.1 基因替代 | 第39页 |
| 5.1.2 基因插入融合 | 第39页 |
| 5.1.3 基因互补 | 第39页 |
| 5.1.4 抗原展示 | 第39-40页 |
| 5.2 病毒表达载体的应用 | 第40-41页 |
| 5.2.1 表达外源基因 | 第40页 |
| 5.2.2 致病性研究 | 第40-41页 |
| 6 本研究中应用的分子生物学方法 | 第41-43页 |
| 6.1 酶联免疫吸附测定法 | 第41页 |
| 6.2 扩增技术 | 第41-42页 |
| 6.2.1 反转录PCR | 第42页 |
| 6.2.2 实时荧光定量 | 第42页 |
| 6.3 SNP分析技术 | 第42-43页 |
| 6.4 QTL和eQTL | 第43页 |
| 7 本研究目的和意义 | 第43-46页 |
| 第二章 大豆品种(品系)对SMV成株抗性及种粒抗性的鉴定 | 第46-56页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 1.1 试验材料 | 第46-47页 |
| 1.1.1 供试大豆材料 | 第46页 |
| 1.1.2 病毒株系 | 第46页 |
| 1.1.3 所用试剂及试剂配置 | 第46-47页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第47页 |
| 1.2 试验方法 | 第47-48页 |
| 1.2.1 材料种植与接种 | 第47页 |
| 1.2.2 症状调查 | 第47页 |
| 1.2.3 斑驳率及种传率测定 | 第47-48页 |
| 1.3 血清学检测 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-53页 |
| 2.1 大豆品种对SMV成株抗性鉴定 | 第48页 |
| 2.2 大豆品种对SMV种粒斑驳抗性的鉴定 | 第48-52页 |
| 2.3 大豆品种种传率的鉴定 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| 第三章 大豆花叶病毒田间传播相关因素的研究 | 第56-66页 |
| 1 材料与方法 | 第56-59页 |
| 1.1 试验材料 | 第56-57页 |
| 1.1.1 大豆与SMV材料 | 第56页 |
| 1.1.2 菌株、酶和试剂 | 第56-57页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第57页 |
| 1.2 试验设计及大田管理 | 第57页 |
| 1.3 接种方法与病害调查 | 第57-58页 |
| 1.4 CP和HC-Pro序列扩增及蚜传相关序列比对 | 第58-59页 |
| 1.4.1 总RNA的提取、cDNA第一链的合成 | 第58页 |
| 1.4.2 CP和HC-Pro基因克隆 | 第58页 |
| 1.4.3 SMV株系CP和HC-Pro蛋白蚜传相关序列比对 | 第58-59页 |
| 1.5 收获考种 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-64页 |
| 2.1 不同因素对大豆田间发病率的影响 | 第59-60页 |
| 2.2 CP和HC-Pro蛋白对病害传播的影响 | 第60-62页 |
| 2.2.1 CP和HC-Pro基因序列比较 | 第60-62页 |
| 2.2.2 蚜传序列比对 | 第62页 |
| 2.3 不同发病时期对植株的影响 | 第62-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 3.1 病害传播相关因素的分析 | 第64页 |
| 3.2 HC-Pro和CP蛋白蚜传相关序列分析 | 第64-65页 |
| 3.3 不同发病时期对大豆的影响 | 第65-66页 |
| 第四章 大豆感病后SMV在植株体内的运动及分布 | 第66-82页 |
| 1 材料与方法 | 第67-73页 |
| 1.1 不同部位叶片、花、籽粒病毒含量比较 | 第67-69页 |
| 1.1.1 试验材料和病毒株系 | 第67页 |
| 1.1.2 主要试剂及耗材 | 第67页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第67-68页 |
| 1.1.4 试验材料的种植及接种 | 第68页 |
| 1.1.5 不同叶位病毒相对含量测定 | 第68页 |
| 1.1.4 不同部位花及籽粒、果皮病毒携带情况 | 第68-69页 |
| 1.2 满粒期、完熟期种子各部位病毒携带及种传率测定 | 第69-70页 |
| 1.2.1 试验材料和病毒株系 | 第69页 |
| 1.2.2 主要试剂及耗材 | 第69页 |
| 1.2.3 主要仪器 | 第69页 |
| 1.2.4 满粒期、完熟期种子各部位病毒携带情况 | 第69页 |
| 1.2.5 种传率测定 | 第69页 |
| 1.2.6 种皮消毒对种传率的影响 | 第69-70页 |
| 1.3 病毒表达载体的构建 | 第70-73页 |
| 1.3.1 所用株系及模板 | 第70页 |
| 1.3.2 主要试剂及耗材 | 第70页 |
| 1.3.3 主要仪器 | 第70页 |
| 1.3.4 病毒片段扩增、酶切及连接 | 第70-71页 |
| 1.3.5 含有GFP表达载体的构建 | 第71-72页 |
| 1.3.6 CP蛋白表达量比较 | 第72-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-79页 |
| 2.1 不同部位叶片、花和籽粒病毒含量及病毒携带情况比较 | 第73-75页 |
| 2.1.1 不同部位叶片病毒含量比较 | 第73-74页 |
| 2.1.2 不同部位花和满粒期种子的病毒携带情况 | 第74-75页 |
| 2.2 满粒期和完熟期的种子各部位病毒携带情况及种传率测定 | 第75-76页 |
| 2.2.1 满粒期和完熟期的种子各部位病毒携带情况 | 第75页 |
| 2.2.2 种传率测定及种皮对SMV种传的影响 | 第75-76页 |
| 2.3 病毒表达载体的构建 | 第76-79页 |
| 2.3.1 SC15株系病毒片段的扩增 | 第76-77页 |
| 2.3.2 模板与SC15片段连接后酶切验证 | 第77页 |
| 2.3.3 南农1138-2感染pSC15的症状表现 | 第77-78页 |
| 2.3.4 南农1138-2感染pGFP的症状及荧光表达 | 第78页 |
| 2.3.5 pSC15、pGFP与SC15株系CP蛋白产物的比较 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-82页 |
| 3.1 SMV在植物体内的运动 | 第79页 |
| 3.2 SMV在大豆种子不同部位的分布 | 第79-80页 |
| 3.3 控制病毒种传的相关基因 | 第80页 |
| 3.4 含GFP病毒表达载体的表达效率 | 第80-82页 |
| 第五章 水杨酸代谢相关基因GmRDR和GmNPR的表达分析与eQTL定位 | 第82-96页 |
| 1 材料和方法 | 第83-85页 |
| 1.1 试验材料与接种方法 | 第83页 |
| 1.1.1 所用材料及毒源 | 第83页 |
| 1.1.2 所用主要试剂 | 第83页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第83页 |
| 1.2 试验方法 | 第83-85页 |
| 1.2.1 处理方法 | 第83-84页 |
| 1.2.2 SA含量测定及GmRDR和GmNPR基因表达分析 | 第84页 |
| 1.2.3 系统进化分析及RDR和NPR表达分析 | 第84-85页 |
| 1.2.4 QTL及eQTL定位 | 第85页 |
| 1.2.5 候选基因筛选 | 第85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-93页 |
| 2.1 科丰1号和南农1138-2的SA含量测定 | 第85-86页 |
| 2.2 大豆RDR和NPR的系统进化分析以及表达分析 | 第86-87页 |
| 2.3 大豆RDR和NPR在SMV和SA诱导下的表达 | 第87-88页 |
| 2.4 大豆RDR和NPR的eQTL定位 | 第88-90页 |
| 2.5 候选基因的分析 | 第90-93页 |
| 3 讨论 | 第93-96页 |
| 3.1 SA含量及相关基因表达分析 | 第93页 |
| 3.2 QTL及eQTL定位结果分析 | 第93-96页 |
| 本文结论和创新点 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-114页 |
| 附录 | 第114-138页 |
| 攻读博士学位期间待发表及发表的学术论文 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
