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电脉冲刺激调节小鼠骨骼肌细胞Akt的机制研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语第11-13页
前言第13-18页
    研究现状、成果第13-16页
    研究目的、方法第16-18页
一、Akt在电刺激诱导C2C12-GLUT4HA肌管细胞GLUT4转位作用中的研究第18-34页
    1.1 材料第18-24页
        1.1.1 细胞系第18页
        1.1.2 主要试剂第18-20页
        1.1.3 主要溶液配置第20-23页
        1.1.4 主要仪器和设备第23-24页
    1.2 方法第24-27页
        1.2.1 细胞培养第24页
        1.2.2 电脉冲刺激处理细胞第24页
        1.2.3酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞膜上的GLUT4第24-25页
        1.2.4 Westernblot检测Akt和AS160的磷酸化水平第25-26页
        1.2.5 统计学处理第26-27页
    1.3 结果第27-33页
        1.3.1 C2C12-GLUT4HA细胞分化为多核肌管的形态学观察第27页
        1.3.2 C2C12GLUT4HA肌管对电脉冲刺激的应答第27-28页
        1.3.3 电刺激对C2C12-GLUT4HA肌管细胞Akt活性的影响第28-30页
        1.3.4 Akt的抑制剂对电刺激促进的C2C12-GLUT4HA肌管GLUT4HA转位的影响第30-33页
    1.4 小结第33-34页
二、电刺激激活Akt分子机制的研究第34-62页
    2.1 材料第34-40页
        2.1.1 细胞系第34页
        2.1.2 主要试剂第34-36页
        2.1.3 主要溶液的配置第36-39页
        2.1.4 主要仪器和设备第39-40页
    2.2 方法第40-43页
        2.2.1 培养和分化C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞第40页
        2.2.2 电脉冲刺激处理细胞第40页
        2.2.3 Westernblot检测相应蛋白的磷酸化水平第40-42页
        2.2.4 Rac1活性测定第42页
        2.2.5 应用siRNA干扰C2C12-GLUT4HA细胞内蛋白的表达第42-43页
        2.2.6 统计学处理第43页
    2.3 结果第43-60页
        2.3.1 探讨Rac1对电刺激诱导C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞Akt磷酸化的影响第43-49页
        2.3.2 探讨AMPK对电刺激诱导C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞Akt磷酸化的影响第49-55页
        2.3.3 探究电刺激骨骼肌细胞信号通路中AMPK与Rac1的关系第55-60页
    2.4 小结第60-62页
三、在C57BL/6小鼠中研究不同刺激条件对Rac1活性的影响第62-76页
    3.1 材料第62-67页
        3.1.1 实验对象第62页
        3.1.2 主要试剂第62-64页
        3.1.3 主要溶液的配置第64-66页
        3.1.4 主要仪器和设备第66-67页
    3.2 方法第67-70页
        3.2.1 AMPK腺病毒的包装和扩增第67-68页
        3.2.2 培养和分化C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞第68页
        3.2.3 小鼠喂养第68页
        3.2.4 测量小鼠体质量并进行不同实验条件的处理第68页
        3.2.5 免疫印记法第68-69页
        3.2.6 小鼠骨骼肌Rac1活性的测定第69-70页
        3.2.7 统计学方法第70页
    3.3 结果第70-75页
        3.2.1 检测AMPK腺病毒和AICAR的活性第70-71页
        3.2.2 在C57BL/6小鼠中检测AMPK对Rac1活性的影响第71-73页
        3.2.3 在C57BL/6小鼠中检测运动对Rac1活性的影响第73-74页
        3.2.4 在C57BL/6小鼠中检测运动及AICAR对Akt活性的影响第74-75页
    3.4 小结第75-76页
讨论第76-81页
全文结论第81-83页
论文创新点第83-84页
参考文献第84-91页
发表论文和参加科研情况说明第91-92页
综述 肌肉因子的研究进展第92-117页
    综述参考文献第104-117页
致谢第117页

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