中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语 | 第11-13页 |
前言 | 第13-18页 |
研究现状、成果 | 第13-16页 |
研究目的、方法 | 第16-18页 |
一、Akt在电刺激诱导C2C12-GLUT4HA肌管细胞GLUT4转位作用中的研究 | 第18-34页 |
1.1 材料 | 第18-24页 |
1.1.1 细胞系 | 第18页 |
1.1.2 主要试剂 | 第18-20页 |
1.1.3 主要溶液配置 | 第20-23页 |
1.1.4 主要仪器和设备 | 第23-24页 |
1.2 方法 | 第24-27页 |
1.2.1 细胞培养 | 第24页 |
1.2.2 电脉冲刺激处理细胞 | 第24页 |
1.2.3酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞膜上的GLUT4 | 第24-25页 |
1.2.4 Westernblot检测Akt和AS160的磷酸化水平 | 第25-26页 |
1.2.5 统计学处理 | 第26-27页 |
1.3 结果 | 第27-33页 |
1.3.1 C2C12-GLUT4HA细胞分化为多核肌管的形态学观察 | 第27页 |
1.3.2 C2C12GLUT4HA肌管对电脉冲刺激的应答 | 第27-28页 |
1.3.3 电刺激对C2C12-GLUT4HA肌管细胞Akt活性的影响 | 第28-30页 |
1.3.4 Akt的抑制剂对电刺激促进的C2C12-GLUT4HA肌管GLUT4HA转位的影响 | 第30-33页 |
1.4 小结 | 第33-34页 |
二、电刺激激活Akt分子机制的研究 | 第34-62页 |
2.1 材料 | 第34-40页 |
2.1.1 细胞系 | 第34页 |
2.1.2 主要试剂 | 第34-36页 |
2.1.3 主要溶液的配置 | 第36-39页 |
2.1.4 主要仪器和设备 | 第39-40页 |
2.2 方法 | 第40-43页 |
2.2.1 培养和分化C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞 | 第40页 |
2.2.2 电脉冲刺激处理细胞 | 第40页 |
2.2.3 Westernblot检测相应蛋白的磷酸化水平 | 第40-42页 |
2.2.4 Rac1活性测定 | 第42页 |
2.2.5 应用siRNA干扰C2C12-GLUT4HA细胞内蛋白的表达 | 第42-43页 |
2.2.6 统计学处理 | 第43页 |
2.3 结果 | 第43-60页 |
2.3.1 探讨Rac1对电刺激诱导C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞Akt磷酸化的影响 | 第43-49页 |
2.3.2 探讨AMPK对电刺激诱导C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞Akt磷酸化的影响 | 第49-55页 |
2.3.3 探究电刺激骨骼肌细胞信号通路中AMPK与Rac1的关系 | 第55-60页 |
2.4 小结 | 第60-62页 |
三、在C57BL/6小鼠中研究不同刺激条件对Rac1活性的影响 | 第62-76页 |
3.1 材料 | 第62-67页 |
3.1.1 实验对象 | 第62页 |
3.1.2 主要试剂 | 第62-64页 |
3.1.3 主要溶液的配置 | 第64-66页 |
3.1.4 主要仪器和设备 | 第66-67页 |
3.2 方法 | 第67-70页 |
3.2.1 AMPK腺病毒的包装和扩增 | 第67-68页 |
3.2.2 培养和分化C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞 | 第68页 |
3.2.3 小鼠喂养 | 第68页 |
3.2.4 测量小鼠体质量并进行不同实验条件的处理 | 第68页 |
3.2.5 免疫印记法 | 第68-69页 |
3.2.6 小鼠骨骼肌Rac1活性的测定 | 第69-70页 |
3.2.7 统计学方法 | 第70页 |
3.3 结果 | 第70-75页 |
3.2.1 检测AMPK腺病毒和AICAR的活性 | 第70-71页 |
3.2.2 在C57BL/6小鼠中检测AMPK对Rac1活性的影响 | 第71-73页 |
3.2.3 在C57BL/6小鼠中检测运动对Rac1活性的影响 | 第73-74页 |
3.2.4 在C57BL/6小鼠中检测运动及AICAR对Akt活性的影响 | 第74-75页 |
3.4 小结 | 第75-76页 |
讨论 | 第76-81页 |
全文结论 | 第81-83页 |
论文创新点 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-91页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第91-92页 |
综述 肌肉因子的研究进展 | 第92-117页 |
综述参考文献 | 第104-117页 |
致谢 | 第117页 |