| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 香菇概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 香菇生物学特性 | 第12页 |
| 1.1.2 香菇的食用价值和药用价值 | 第12-13页 |
| 1.1.3 香菇核心种质 | 第13页 |
| 1.1.4 香菇栽培史及栽培模式 | 第13-14页 |
| 1.2 农作物秸秆及其在食用菌产业中的应用 | 第14-16页 |
| 1.2.1 我国农作物秸秆概况 | 第14-15页 |
| 1.2.2 农作物秸秆在食用菌栽培中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 木质素简介 | 第16-17页 |
| 1.4 木质素降解酶 | 第17-20页 |
| 1.4.1 木质素降解酶的作用机理 | 第18页 |
| 1.4.2 木质素降解酶在食用菌中的应用研究 | 第18-20页 |
| 1.5 课题的研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 木质素降解酶 | 第21页 |
| 2.1.3 供试培养基配制 | 第21-23页 |
| 2.1.4 细菌菌株 | 第23页 |
| 2.1.5 质粒 | 第23页 |
| 2.1.6 试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 香菇木质素降解酶基因在不同基质中的表达模式分析 | 第24-26页 |
| 2.2.1 核心种质菌丝培养及性状测定 | 第24页 |
| 2.2.2 核心种质RNA的提取与检测 | 第24-25页 |
| 2.2.3 第一链cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.2.4 引物合成 | 第25页 |
| 2.2.5 qRT-PCR分析 | 第25-26页 |
| 2.2.6 数据统计与分析 | 第26页 |
| 2.3 香菇木质素降解酶基因lcc12和glox的功能分析 | 第26-33页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第26页 |
| 2.3.2 重组质粒p1300-g-lcc12和p1300-g-glox的构建 | 第26-29页 |
| 2.3.3 农杆菌介导的香菇异核菌丝的转化 | 第29-30页 |
| 2.3.4 香菇转化子的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.5 转化子菌丝体性状测定 | 第31页 |
| 2.3.6 转化子漆酶和锰过氧化物酶活性测定 | 第31-32页 |
| 2.3.7 转化子子实体农艺性状分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-52页 |
| 3.1 核心种质木质素降解酶基因在木屑和稻草中表达水平分析 | 第33-40页 |
| 3.1.1 核心种质菌丝总RNA的提取及反转录 | 第33-34页 |
| 3.1.2 6个木质素降解酶基因在木屑和稻草基质中表达水平的分析 | 第34-38页 |
| 3.1.3 同一基质中菌丝长速与基因表达的相关性分析 | 第38页 |
| 3.1.4 同一基质中6个木质素降解酶基因表达的相关性分析 | 第38-40页 |
| 3.2 香菇木质素降解酶基因lcc12和glox的功能分析 | 第40-52页 |
| 3.2.1 目的基因条带扩增 | 第40-41页 |
| 3.2.2 p1300-g-lcc12/glox克隆载体的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.3 香菇lcc12和glox转化子的筛选 | 第42页 |
| 3.2.4 转化子的PCR鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2.5 转化子基因表达量的测定 | 第44-46页 |
| 3.2.6 lcc12和glox转化子菌丝生长速度分析 | 第46-47页 |
| 3.2.7 lcc12和glox转化子漆酶和锰过氧化物酶酶活分析 | 第47-49页 |
| 3.2.8 lcc12和glox转化子子实体阶段农艺性状分析 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-57页 |
| 4.1 关于香菇木质素降解酶基因在稻草和木屑基质中的表达差异问题 | 第52-53页 |
| 4.2 关于香菇漆酶和锰过氧化物酶协同表达的问题 | 第53-54页 |
| 4.3 关于香菇木质素降解酶基因结构及表达量的问题 | 第54-55页 |
| 4.4 香菇木质素降解酶基因转化子表型分析 | 第55页 |
| 4.5 木质素降解酶功能与香菇新型基质开发 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录1 | 第68-69页 |
