| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 桂花的研究背景 | 第12-14页 |
| 1.1.1 桂花研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.2 CCD基因的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 类胡萝卜素的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 类胡萝卜素简介 | 第14页 |
| 1.2.2 类胡萝卜素的重要生物学功能 | 第14-15页 |
| 1.2.3 类胡萝卜素的基本代谢途径 | 第15-17页 |
| 1.2.4 类胡萝卜素代谢过程中的主要酶及其作用 | 第17-18页 |
| 1.3 转录因子的简介及相关技术和应用 | 第18-20页 |
| 1.3.1 MYC2转录因子的结构与功能 | 第18-20页 |
| 1.3.2 酵母单杂交技术 | 第20页 |
| 1.4 本研究的目的、意义 | 第20-22页 |
| 第二章 银桂和丹桂花瓣中类胡萝卜素和芳香成分含量分析 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验试剂与仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 银桂和丹桂花瓣的挥发性芳香成分分析—气相色谱-质谱联用GC/MS | 第22-23页 |
| 2.2.2 银桂和丹桂花瓣中类胡萝卜素的含量分析—高效液相色谱HPLC | 第23-24页 |
| 2.3 结果分析 | 第24-30页 |
| 2.3.1 银桂和丹桂花瓣的挥发性芳香成分分析 | 第24-29页 |
| 2.3.2 银桂和丹桂花瓣中类胡萝卜素的含量分析 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 类胡萝卜素代谢途径相关基因表达的定量PCR分析 | 第32-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第32页 |
| 3.1.3 引物序列 | 第32-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 桂花花瓣RNA的提取 | 第34页 |
| 3.2.2 RNA琼脂糖凝胶电泳检测 | 第34页 |
| 3.2.3 RNA反转录 | 第34-35页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR分析 | 第35-36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 MYC2转录因子的序列分析及其与CCD4的RT-PCR分析 | 第38-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 引物序列 | 第38-39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 4.2.1 桂花花瓣RNA的提取 | 第39页 |
| 4.2.2 RNA琼脂糖凝胶电泳检测 | 第39页 |
| 4.2.3 RNA反转录 | 第39页 |
| 4.2.4 基因的PCR扩增 | 第39-40页 |
| 4.2.5 目的片段的回收 | 第40-41页 |
| 4.2.6 OfMYC2、OfCCD4基因表达量的RT-PCR分析 | 第41-42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-47页 |
| 4.3.1 MYC2转录因子的序列同源性分析 | 第42-47页 |
| 4.3.2 RT-PCR分析桂花花瓣OfMYC2、OfCCD4基因表达量 | 第47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 MYC2转录因子转录激活活性的验证 | 第48-58页 |
| 5.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第48页 |
| 5.1.3 菌株与质粒载体 | 第48页 |
| 5.1.4 引物序列 | 第48-49页 |
| 5.1.5 培养基与溶液的配制 | 第49页 |
| 5.2 实验方法 | 第49-55页 |
| 5.2.1 元件合成 | 第49-50页 |
| 5.2.2 重组质粒PJG-MYC2的构建 | 第50-51页 |
| 5.2.3 重组质粒pLacZi-HLH的构建 | 第51页 |
| 5.2.4 大肠杆菌DH5α感受态的制备与转化 | 第51-52页 |
| 5.2.5 重组质粒的鉴定、提取 | 第52-53页 |
| 5.2.6 酵母感受态的制备与转化 | 第53-54页 |
| 5.2.7 酵母阳性克隆的检测 | 第54-55页 |
| 5.3 结果与分析 | 第55-56页 |
| 5.3.1 重组质粒PJG-MYC2和重组质粒pLacZi-HLH的构建 | 第55页 |
| 5.3.2 酵母单杂交阳性克隆的检测 | 第55-56页 |
| 5.4 讨论 | 第56-58页 |
| 第六章 MYC2转录因子的原核蛋白的表达 | 第58-66页 |
| 6.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第58页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第58页 |
| 6.1.3 菌株与质粒载体 | 第58页 |
| 6.1.4 溶液的配制 | 第58-59页 |
| 6.2 实验方法 | 第59-62页 |
| 6.2.1 重组载体pEASY-MYC2的构建 | 第59-60页 |
| 6.2.2 重组载体pEASY-MYC2的鉴定与提取 | 第60-61页 |
| 6.2.3 重组载体的蛋白诱导表达 | 第61-62页 |
| 6.2.4 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳、染色、脱色 | 第62页 |
| 6.3 结果与分析 | 第62-63页 |
| 6.3.1 重组载体pEASY-MYC2的构建构建 | 第62-63页 |
| 6.3.2 重组载体的蛋白诱导表达 | 第63页 |
| 6.4 讨论 | 第63-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
