| 摘要 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-18页 |
| 1.1 糖尿病概述 | 第8-9页 |
| 1.2 机体的糖代谢及糖尿病的发生 | 第9页 |
| 1.3 抑制性G蛋白Gαi/o | 第9-10页 |
| 1.4 Gαi/o在褪黑素调节胰岛素分泌中的作用 | 第10-15页 |
| 1.4.1 糖尿病与褪黑素间的相互关系 | 第10-11页 |
| 1.4.2 葡萄糖代谢中褪黑素的作用 | 第11-12页 |
| 1.4.3 褪黑素在胰岛β细胞中的代谢通路 | 第12-13页 |
| 1.4.4 胰岛素分泌与褪黑素间的关系 | 第13-14页 |
| 1.4.5 G蛋白在褪黑素调节的胰岛素昼夜节律变化中的作用 | 第14-15页 |
| 1.4.6 褪黑素对胰岛素和Gαi/o基因表达影响的研究进展 | 第15页 |
| 1.5 Gαi/o在葡萄糖调节胰岛素分泌中的作用 | 第15-18页 |
| 第二章 褪黑素对大鼠胰岛瘤细胞INS-1中胰岛素和Gαi/o蛋白基因表达的影响 | 第18-30页 |
| 1 实验材料与方法 | 第18-22页 |
| 1.1 实验试剂 | 第18页 |
| 1.2 实验材料 | 第18页 |
| 1.3 实验方法 | 第18-22页 |
| 1.3.1 INS-1细胞冻存与复苏 | 第19页 |
| 1.3.2 INS-1细胞培养 | 第19页 |
| 1.3.3 INS-1细胞的刺激试验 | 第19-20页 |
| 1.3.4 细胞总RNA的提取及cDNA合成 | 第20页 |
| 1.3.5 引物设计与合成 | 第20-21页 |
| 1.3.6 qRT-PCR | 第21页 |
| 1.3.7 图像分析与数据处理 | 第21-22页 |
| 2 实验结果 | 第22-25页 |
| 2.1 褪黑素及葡萄糖对INS-1细胞形态学的影响 | 第22-23页 |
| 2.2 褪黑素可解除Gαi1与Insulin1的负相关性 | 第23-24页 |
| 2.3 褪黑素抑制INS-1细胞Insulin1的表达 | 第24-25页 |
| 3 讨论 | 第25-29页 |
| 3.1 褪黑素抑制INS-1细胞增殖及Insulin1的表达 | 第25-26页 |
| 3.2 褪黑素通过Gαi1抑制INS-1细胞Insulin1的表达 | 第26-27页 |
| 3.3 Gαi1通过PKCα抑制INS-1细胞Insulin1的表达 | 第27页 |
| 3.4 褪黑素抑制INS-1细胞Insulin1表达模式图 | 第27-29页 |
| 4 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 Gαi1抑制大鼠胰岛瘤细胞INS-1胰岛素的表达 | 第30-42页 |
| 1 实验材料与方法 | 第30-36页 |
| 1.1 实验试剂 | 第30页 |
| 1.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 1.3 试验方法 | 第31-36页 |
| 1.3.1 细胞培养与转染 | 第31页 |
| 1.3.2 免疫荧光与共聚焦成像 | 第31-32页 |
| 1.3.3 INS-1细胞刺激实验 | 第32页 |
| 1.3.4 总RNA的提取及反转录 | 第32-33页 |
| 1.3.5 Gαi1-EGFP质粒的构建 | 第33页 |
| 1.3.6 中提质粒 | 第33-34页 |
| 1.3.7 引物设计与合成 | 第34-35页 |
| 1.3.8 实时定量反转录PCR(RT-qPCR) | 第35页 |
| 1.3.9 图像处理与数据分析 | 第35-36页 |
| 2 实验结果 | 第36-39页 |
| 2.1 INS-1细胞免疫荧光 | 第36页 |
| 2.2 Gαi1与Insulin1表达间的负相关性 | 第36-37页 |
| 2.3 过表达Gαi1可降低Insulin1的表达 | 第37-38页 |
| 2.4 抑制Gαi1可增加Insulin1的表达 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 4 小结 | 第41-42页 |
| 全文总结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| Abstract | 第49-50页 |
| 常用缩略语表 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
