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Gαi1抑制大鼠胰岛瘤细胞系INS-1中胰岛素基因的表达

摘要第7-8页
第一章 文献综述第8-18页
    1.1 糖尿病概述第8-9页
    1.2 机体的糖代谢及糖尿病的发生第9页
    1.3 抑制性G蛋白Gαi/o第9-10页
    1.4 Gαi/o在褪黑素调节胰岛素分泌中的作用第10-15页
        1.4.1 糖尿病与褪黑素间的相互关系第10-11页
        1.4.2 葡萄糖代谢中褪黑素的作用第11-12页
        1.4.3 褪黑素在胰岛β细胞中的代谢通路第12-13页
        1.4.4 胰岛素分泌与褪黑素间的关系第13-14页
        1.4.5 G蛋白在褪黑素调节的胰岛素昼夜节律变化中的作用第14-15页
        1.4.6 褪黑素对胰岛素和Gαi/o基因表达影响的研究进展第15页
    1.5 Gαi/o在葡萄糖调节胰岛素分泌中的作用第15-18页
第二章 褪黑素对大鼠胰岛瘤细胞INS-1中胰岛素和Gαi/o蛋白基因表达的影响第18-30页
    1 实验材料与方法第18-22页
        1.1 实验试剂第18页
        1.2 实验材料第18页
        1.3 实验方法第18-22页
            1.3.1 INS-1细胞冻存与复苏第19页
            1.3.2 INS-1细胞培养第19页
            1.3.3 INS-1细胞的刺激试验第19-20页
            1.3.4 细胞总RNA的提取及cDNA合成第20页
            1.3.5 引物设计与合成第20-21页
            1.3.6 qRT-PCR第21页
            1.3.7 图像分析与数据处理第21-22页
    2 实验结果第22-25页
        2.1 褪黑素及葡萄糖对INS-1细胞形态学的影响第22-23页
        2.2 褪黑素可解除Gαi1与Insulin1的负相关性第23-24页
        2.3 褪黑素抑制INS-1细胞Insulin1的表达第24-25页
    3 讨论第25-29页
        3.1 褪黑素抑制INS-1细胞增殖及Insulin1的表达第25-26页
        3.2 褪黑素通过Gαi1抑制INS-1细胞Insulin1的表达第26-27页
        3.3 Gαi1通过PKCα抑制INS-1细胞Insulin1的表达第27页
        3.4 褪黑素抑制INS-1细胞Insulin1表达模式图第27-29页
    4 小结第29-30页
第三章 Gαi1抑制大鼠胰岛瘤细胞INS-1胰岛素的表达第30-42页
    1 实验材料与方法第30-36页
        1.1 实验试剂第30页
        1.2 实验材料第30-31页
        1.3 试验方法第31-36页
            1.3.1 细胞培养与转染第31页
            1.3.2 免疫荧光与共聚焦成像第31-32页
            1.3.3 INS-1细胞刺激实验第32页
            1.3.4 总RNA的提取及反转录第32-33页
            1.3.5 Gαi1-EGFP质粒的构建第33页
            1.3.6 中提质粒第33-34页
            1.3.7 引物设计与合成第34-35页
            1.3.8 实时定量反转录PCR(RT-qPCR)第35页
            1.3.9 图像处理与数据分析第35-36页
    2 实验结果第36-39页
        2.1 INS-1细胞免疫荧光第36页
        2.2 Gαi1与Insulin1表达间的负相关性第36-37页
        2.3 过表达Gαi1可降低Insulin1的表达第37-38页
        2.4 抑制Gαi1可增加Insulin1的表达第38-39页
    3 讨论第39-41页
    4 小结第41-42页
全文总结第42-43页
参考文献第43-49页
Abstract第49-50页
常用缩略语表第51-53页
致谢第53页

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