| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1.1 非生物逆境 | 第12-13页 |
| 1.1.1 脱落酸与非生物胁迫 | 第12页 |
| 1.1.2 ABA介导的非生物胁迫下的基因表达调控 | 第12-13页 |
| 1.2 植物细胞中的ABA受体 | 第13-15页 |
| 1.2.1 FCA | 第13页 |
| 1.2.2 CHLH/ABAR | 第13-14页 |
| 1.2.3 GCR2 | 第14页 |
| 1.2.4 GTG1/2 | 第14-15页 |
| 1.2.5 PYR/PYL/RCAR | 第15页 |
| 1.3 植物bZIP转录因子 | 第15-17页 |
| 1.3.1 植物bZIP转录因子的结构特点 | 第15-16页 |
| 1.3.2 植物bZIP转录因子的分类与功能 | 第16页 |
| 1.3.3 bZIP转录因子在植物逆境胁迫响应中的功能 | 第16-17页 |
| 1.4 ABA介导的信号转导通路 | 第17-19页 |
| 1.4.1 ABA受体对ABA信号的感知与转导 | 第17-18页 |
| 1.4.2 PP2Cs对SnRK2s活性的调控 | 第18-19页 |
| 1.4.3 相关转录因子转录活性的调控 | 第19页 |
| 1.5 本研究的相关背景 | 第19-20页 |
| 1.5.1 水稻PYR/PYL/RCAR类ABA受体 | 第19-20页 |
| 1.5.2 玉米bZIP类转录因子 | 第20页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.2 菌株与载体 | 第21页 |
| 2.3 酶与试剂 | 第21页 |
| 2.4 常用培养基和溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2.5 本实验所用引物 | 第22页 |
| 2.6 植物材料培养与处理 | 第22-23页 |
| 2.6.1 水稻材料培养与处理 | 第22页 |
| 2.6.1.1 水稻材料培养 | 第22页 |
| 2.6.1.2 水稻材料处理 | 第22页 |
| 2.6.2 玉米材料培养与处理 | 第22-23页 |
| 2.6.3 拟南芥材料培养与处理 | 第23页 |
| 2.6.3.1 拟南芥材料培养 | 第23页 |
| 2.6.3.2 拟南芥材料处理 | 第23页 |
| 2.7 半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR (Real-time PCR) | 第23-25页 |
| 2.7.1 植物总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.7.2 反转录 | 第24页 |
| 2.7.3 RT-PCR | 第24页 |
| 2.7.4 Real-time PCR | 第24-25页 |
| 2.8 基因克隆与载体构建 | 第25-26页 |
| 2.8.1 基因全长的扩增 | 第25页 |
| 2.8.2 PCR产物的回收 | 第25-26页 |
| 2.8.3 载体构建 | 第26页 |
| 2.8.3.1 克隆入门载体的构建 | 第26页 |
| 2.8.3.2 植物表达载体的构建 | 第26页 |
| 2.8.3.3 酵母单杂交表达载体的构建 | 第26页 |
| 2.9 大肠杆菌感受态细胞的转化、鉴定与质粒提取 | 第26-27页 |
| 2.9.1 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第26页 |
| 2.9.2 阳性克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.9.3 质粒提取 | 第27页 |
| 2.10 农杆菌感受态细胞的制备、转化与鉴定 | 第27-28页 |
| 2.10.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.10.2 植物表达载体向农杆菌感受态细胞的转化 | 第28页 |
| 2.10.3 阳性克隆的鉴定 | 第28页 |
| 2.11 拟南芥的转化和阳性株系的筛选 | 第28-29页 |
| 2.11.1 拟南芥的转化 | 第28页 |
| 2.11.2 阳性植株的筛选 | 第28-29页 |
| 2.11.3 拟南芥总DNA的提取 | 第29页 |
| 2.11.4 拟南芥阳性植株的PCR鉴定 | 第29页 |
| 2.12 生理指标的测定 | 第29-30页 |
| 2.12.1 水稻全旗叶净光合速率的测定 | 第29页 |
| 2.12.2 水稻花粉粒活性测定 | 第29-30页 |
| 2.12.3 拟南芥叶绿素荧光Fv/Fm分析 | 第30页 |
| 2.12.4 拟南芥相对电导率的测定 | 第30页 |
| 2.13 酵母单杂交分析 | 第30-31页 |
| 2.13.1 融合表达载体的构建 | 第30页 |
| 2.13.2 酵母感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| 2.13.3 LiAc介导的质粒向酵母细胞的小规模转化 | 第31页 |
| 2.13.4 转录因子与DNA片段的互作分析 | 第31页 |
| 2.14 基因与蛋白的生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 2.14.1 基因与蛋白序列的获取 | 第31-32页 |
| 2.14.2 基因的启动子区分析 | 第32页 |
| 2.14.3 多重序列比对和系统发育树的构建 | 第32-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-58页 |
| 3.1 水稻PYL/RCAR类ABA受体OsPYL1与OsPYL9功能分析 | 第33-46页 |
| 3.1.1 OsPYL1功能分析 | 第33-38页 |
| 3.1.1.1 OsPYL1基因的克隆与序列分析 | 第33页 |
| 3.1.1.2 OsPYL1基因在野生型水稻中的表达谱及胁迫处理下的表达模式 | 第33-34页 |
| 3.1.1.3 ospyl1突变体鉴定与全生育期生长发育表型分析 | 第34-36页 |
| 3.1.1.4 OsPYL1在水稻逆境响应中的功能分析 | 第36页 |
| 3.1.1.5 OsPYL1基因的植物表达载体构建、拟南芥遗传转化与验证 | 第36页 |
| 3.1.1.6 OsPYL1在转基因拟南芥逆境响应中的功能分析 | 第36-38页 |
| 3.1.2 OsPYL9功能分析 | 第38-46页 |
| 3.1.2.1 OsPYL9基因的克隆与序列分析 | 第38页 |
| 3.1.2.2 OsPYL9基因在野生型水稻中的表达谱及胁迫处理下的表达模式 | 第38-40页 |
| 3.1.2.3 ospyl9突变体鉴定与全生育期生长发育表型分析 | 第40-42页 |
| 3.1.2.4 ospyl9-1突变株系种子萌发期根生长表型分析 | 第42-43页 |
| 3.1.2.5 ospyl9突变体减产机制探究 | 第43-44页 |
| 3.1.2.6 OsPYL9在水稻逆境响应中的功能分析 | 第44-45页 |
| 3.1.2.7 OsPYL9基因的植物表达载体构建、拟南芥遗传转化与验证 | 第45页 |
| 3.1.2.8 OsPYL9在转基因拟南芥逆境响应中的功能分析 | 第45-46页 |
| 3.2 玉米bZIP转录因子ZmbZIP36与ZmbZIP81功能分析 | 第46-58页 |
| 3.2.1 ZmbZIP36功能分析 | 第46-52页 |
| 3.2.1.1 ZmbZIP36基因的克隆与序列分析 | 第46-47页 |
| 3.2.1.2 玉米苗期ZmbZIP36基因在胁迫条件下的表达 | 第47页 |
| 3.2.1.3 ZmbZIP36基因的植物表达载体构建、拟南芥遗传转化与验证 | 第47-49页 |
| 3.2.1.4 过表达ZmbZIP36基因的拟南芥对ABA的敏感性反应 | 第49-50页 |
| 3.2.1.5 过表达ZmbZIP36基因的拟南芥的抗逆性 | 第50-52页 |
| 3.2.1.6 ZmbZIP36与ABRE的互作分析 | 第52页 |
| 3.2.2 ZmbZIP81功能分析 | 第52-58页 |
| 3.2.2.1 ZmbZIP81基因的克隆与序列分析 | 第52-53页 |
| 3.2.2.2 玉米苗期ZmbZIP81基因在胁迫条件下的表达 | 第53页 |
| 3.2.2.3 ZmbZIP81基因的植物表达载体构建、拟南芥遗传转化与验证 | 第53-55页 |
| 3.2.2.4 过表达ZmbZIP81基因的拟南芥对ABA的敏感性反应 | 第55-56页 |
| 3.2.2.5 过表达ZmbZIP81基因的拟南芥的抗逆性 | 第56-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-61页 |
| 4.1 OsPYL1参与调控水稻生长发育过程 | 第58页 |
| 4.2 OsPYL9可能对于水稻产量的形成具有重要作用 | 第58-59页 |
| 4.3 OsPYL1和OsPYL9参与ABA介导的植物逆境胁迫响应 | 第59页 |
| 4.4 ZmbZIP36和ZmbZIP81可能参与ABA信号途径以及植物逆境胁迫响应 | 第59-61页 |
| 第五章 结论和展望 | 第61-63页 |
| 5.1 结论 | 第61页 |
| 5.2 展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 英文缩略语表 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
