中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 综述 | 第11-20页 |
1.1 小分子人工抗原的制备 | 第11-13页 |
1.1.1 半抗原的设计与合成 | 第11-12页 |
1.1.2 人工抗原的设计与合成 | 第12-13页 |
1.2 抗体制备技术研究 | 第13-17页 |
1.2.1 多克隆抗体研究 | 第13-14页 |
1.2.2 单克隆抗体研究 | 第14-17页 |
1.2.3 基因工程抗体研究 | 第17页 |
1.3 单克隆抗体的应用研究 | 第17-20页 |
1.3.1 单克隆抗体在医药上的应用 | 第18-19页 |
1.3.2 单克隆抗体在农业领域的应用 | 第19页 |
1.3.3 单克隆抗体在食品安全中的应用 | 第19-20页 |
第二章 喜树碱单克隆抗体的制备 | 第20-38页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 主要试剂及药品 | 第20页 |
2.1.2 实验细胞株、动物 | 第20页 |
2.1.3 细胞培养液 | 第20-21页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-28页 |
2.2.1 半抗原的设计合成 | 第21-22页 |
2.2.2 完全抗原及包被原的制备 | 第22-23页 |
2.2.3 动物免疫 | 第23-25页 |
2.2.4 细胞融合 | 第25-27页 |
2.2.5 细胞亚克隆筛选 | 第27-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-35页 |
2.3.1 半抗原的合成及鉴定 | 第28页 |
2.3.2 完全抗原及包被原的制备及鉴定 | 第28-30页 |
2.3.3 动物免疫 | 第30-33页 |
2.3.4 细胞融合及杂交瘤细胞筛选 | 第33-35页 |
2.4 讨论 | 第35-37页 |
2.4.1 半抗原的设计合成 | 第35页 |
2.4.2 完全抗原的合成与鉴定 | 第35-36页 |
2.4.3 动物免疫 | 第36页 |
2.4.4 杂交瘤细胞的建立 | 第36-37页 |
2.5 本章小结 | 第37-38页 |
第三章 通用有机磷单克隆抗体的制备及其应用 | 第38-61页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 主要试剂及药品 | 第38-39页 |
3.1.2 实验细胞株、动物 | 第39页 |
3.1.3 细胞培养液 | 第39页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-45页 |
3.2.1 半抗原的合成 | 第39-41页 |
3.2.2 完全抗原的制备 | 第41页 |
3.2.3 动物免疫 | 第41-42页 |
3.2.4 杂交瘤细胞株的建立 | 第42页 |
3.2.5 单克隆抗体的制备与鉴定 | 第42-44页 |
3.2.6 单克隆抗体对不同有机磷类农药敏感性检测 | 第44-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-58页 |
3.3.1 半抗原的设计合成 | 第45页 |
3.3.2 完全抗原及包被原的制备与鉴定 | 第45-46页 |
3.3.3 动物免疫 | 第46-49页 |
3.3.4 杂交瘤细胞株的建立 | 第49页 |
3.3.5 单克隆抗体的纯化及特性鉴定结果 | 第49-50页 |
3.3.6 单克隆抗体对不同有机磷类农药敏感性检测 | 第50-58页 |
3.4 讨论 | 第58-59页 |
3.4.1 有机磷类农药半抗原分子设计 | 第58页 |
3.4.2 细胞培养中的污染问题 | 第58页 |
3.4.3 单克隆抗体的制备、纯化 | 第58-59页 |
3.4.4 单克隆抗体检测应用 | 第59页 |
3.5 本章小结 | 第59-61页 |
第四章 通用有机磷类农药单链抗体基因的构建 | 第61-78页 |
4.1 实验材料 | 第61-62页 |
4.1.1 实验细胞株、菌种、质粒 | 第61页 |
4.1.2 主要试剂及药品 | 第61-62页 |
4.1.3 培养基 | 第62页 |
4.1.4 主要仪器与设备 | 第62页 |
4.2 实验方法 | 第62-70页 |
4.2.1 技术路线 | 第62-63页 |
4.2.2 引物的设计 | 第63-64页 |
4.2.3 单链抗体重、轻链可变区基因的扩增 | 第64-67页 |
4.2.4 单链抗体(scFv)基因的构建 | 第67-70页 |
4.3 结果与分析 | 第70-76页 |
4.3.1 总RNA的提取鉴定 | 第70页 |
4.3.2 cDNA的检测 | 第70-71页 |
4.3.3 VL/VH基因的扩增 | 第71页 |
4.3.4 VL/VH基因序列比对分析 | 第71-73页 |
4.3.5 scFv基因的构建 | 第73页 |
4.3.6 scFv基因的克隆和鉴定 | 第73-75页 |
4.3.7 scFv氨基酸序列比对分析 | 第75-76页 |
4.3.8 单链抗体三维结构模拟 | 第76页 |
4.4 讨论 | 第76-77页 |
4.5 本章小结 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-85页 |
在学期间的研究成果 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |