| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-37页 |
| 1.1 质膜H~+-ATPase研究进展 | 第12-27页 |
| 1.1.1 质膜H~+-ATPase的发现及生物学特性 | 第12-15页 |
| 1.1.2 植物质膜H~+-ATPase家族 | 第15-16页 |
| 1.1.3 植物质膜H~+-ATPase的生物学功能 | 第16-18页 |
| 1.1.4 植物质膜H~+-ATPase活性调控机制的研究 | 第18-24页 |
| 1.1.5 植物质膜H~+-ATPase参与信号转导和逆境胁迫响应的研究进展 | 第24-26页 |
| 1.1.6 PKS5-AHA2途径对拟南芥盐碱胁迫响应的调控 | 第26-27页 |
| 1.2 拟南芥钙结合蛋白SCaBP家族研究进展 | 第27-31页 |
| 1.2.1 拟南芥SCaBP家族及其生物学特性 | 第27-29页 |
| 1.2.2 SCaBPs参与信号转导与非生物逆境胁迫响应的研究进展 | 第29-31页 |
| 1.3 土壤盐碱化及植物响应盐碱胁迫机制的研究 | 第31-35页 |
| 1.3.1 土壤盐碱化及盐碱胁迫对植物生长发育的影响 | 第32-33页 |
| 1.3.2 植物响应盐碱胁迫机制的研究 | 第33-35页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第35-37页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第37-65页 |
| 2.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 2.1.2 主要菌株 | 第37页 |
| 2.2 主要载体及相关引物 | 第37-39页 |
| 2.2.1 主要载体 | 第37-38页 |
| 2.2.2 载体构建相关信息 | 第38-39页 |
| 2.3 酶和试剂 | 第39-40页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第40-41页 |
| 2.4.1 核酸实验相关仪器 | 第40页 |
| 2.4.2 蛋白实验相关仪器 | 第40-41页 |
| 2.4.3 常用离心机 | 第41页 |
| 2.4.4 其他常用仪器 | 第41页 |
| 2.5 常用培养基及试剂的配置 | 第41-49页 |
| 2.5.1 常用培养基的配置 | 第41-42页 |
| 2.5.2 常用溶液的配置 | 第42-44页 |
| 2.5.3 酵母培养基的配置 | 第44-45页 |
| 2.5.4 原核蛋白纯化相关溶液的配置 | 第45-46页 |
| 2.5.5 免疫印迹相关溶液的配置 | 第46-47页 |
| 2.5.6 拟南芥原生质体转化相关溶液的配置 | 第47页 |
| 2.5.7 拟南芥细胞质膜微囊体提取及活性测量相关溶液的配置 | 第47-48页 |
| 2.5.8 烟草瞬时表达农杆菌注射缓冲液 | 第48页 |
| 2.5.9 GUS染色反应液 | 第48-49页 |
| 2.6 实验方法 | 第49-65页 |
| 2.6.1 植物材料培养条件 | 第49页 |
| 2.6.2 拟南芥胁迫处理实验 | 第49页 |
| 2.6.3 载体的构建 | 第49-51页 |
| 2.6.4 小量质粒提取(碱裂解法) | 第51-52页 |
| 2.6.5 大肠杆菌(DH5α)电击感受态细胞的制备 | 第52页 |
| 2.6.6 拟南芥基因组DNA的提取 | 第52页 |
| 2.6.7 逆转录PCR(RT-PCR) | 第52-54页 |
| 2.6.8 实时荧光定量PCR (Quantitative real-time PCR,qRT-PCR) | 第54页 |
| 2.6.9 拟南芥转基因植株的获得 | 第54-56页 |
| 2.6.10 质粒的纯化(CsC1密度梯度离心法) | 第56-57页 |
| 2.6.11 原生质体的转化 | 第57页 |
| 2.6.12 亚细胞定位和组织特异性表达 | 第57-58页 |
| 2.6.13 酵母双杂交实验 | 第58-59页 |
| 2.6.14 酵母三杂交实验 | 第59页 |
| 2.6.15 酵母(RS72) H~+-ATPase互补实验 | 第59-60页 |
| 2.6.16 双分子荧光互补实验(BiFC) | 第60页 |
| 2.6.17 荧光素酶互补实验(LCI) | 第60-61页 |
| 2.6.18 拟南芥质膜微囊体的提取 | 第61页 |
| 2.6.19 质膜H+-ATPase (PM H~+-ATPase)活性的测定 | 第61-62页 |
| 2.6.20 原核蛋白的表达与纯化 | 第62-63页 |
| 2.6.21 体外磷酸化实验 | 第63页 |
| 2.6.22 蛋白免疫印迹 | 第63-65页 |
| 第三章 结果与分析 | 第65-93页 |
| 3.1 SCaBP3与质膜H~+-ATPase AHA2的相互作用 | 第65-68页 |
| 3.1.1 SCaBP3与AHA2 C末端相互作用 | 第65-67页 |
| 3.1.2 SCaBP家族与AHA2 C末端相互作用的特异性分析 | 第67页 |
| 3.1.3 SCaBP3与AHA2在细胞质膜上相互作用 | 第67-68页 |
| 3.2 SCaBP3基因的功能分析 | 第68-70页 |
| 3.2.1 SCaBP3蛋白的亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 3.2.2 SCaBP3蛋白的组织表达模式 | 第69-70页 |
| 3.3 SCaBP3负调控质膜H~+-ATPase活性 | 第70-74页 |
| 3.3.1 SCaBP3基因缺失突变体中质膜H~+-ATPase活性升高 | 第70-72页 |
| 3.3.2 外源添加SCaBP3对质膜H~+-ATPase活性的抑制作用 | 第72-73页 |
| 3.3.3 酵母体系中SCaBP3对质膜H~+-ATPase活性的抑制作用 | 第73-74页 |
| 3.4 SCaBP3与质膜H~+-ATPase C末端相互作用的分析 | 第74-77页 |
| 3.4.1 SCaBP3与AHA家族成员相互作用的特异性分析 | 第74-75页 |
| 3.4.2 SCaBP3与AHA2C末端RI区域相互作用 | 第75-76页 |
| 3.4.3 AHA2 Q879位点是SCaBP3负调控其酶活性的关键位点 | 第76-77页 |
| 3.5 SCaBP3调控质膜H~+-ATPase活性机制的研究 | 第77-84页 |
| 3.5.1 SCaBP3促进AHA2 Centerloop和AHA2 C末端的相互作用 | 第78-81页 |
| 3.5.2 SCaBP3促进PKS5和AHA2 C末端的相互作用 | 第81-84页 |
| 3.6 SCaBP3参与了PKS5介导的盐碱胁迫应答机制 | 第84-90页 |
| 3.6.1 SCaBP3基因的缺失能够增强PKS5基因缺失突变体的盐碱胁迫耐受性 | 第85-87页 |
| 3.6.2 SCaBP3基因的缺失能够抑制PKS5持续激活突变体的盐碱胁迫敏感表型 | 第87-90页 |
| 3.7 SCaBP3与黑暗下拟南芥下胚轴伸长生长的调控 | 第90-93页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第93-101页 |
| 4.1 分析与讨论 | 第93-99页 |
| 4.1.1 SCaBP3对质膜H~+-ATPase分子内自抑制作用的调控 | 第93-94页 |
| 4.1.2 SCaBP3-PKS5信号途径对质膜H~+-ATP ase活性的调控 | 第94-96页 |
| 4.1.3 Ca~(2+)信号与质膜H~+-ATPase活性的调控 | 第96页 |
| 4.1.4 SCaBP3与植物盐碱胁迫耐受性的调控 | 第96-99页 |
| 4.1.5 SCaBP3介导的质膜H~+-ATPase活性调控具有功能多样性 | 第99页 |
| 4.2 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-116页 |
| 附录 | 第116-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 个人简历 | 第121页 |
