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StPOTHR1基因在马铃薯晚疫病抗性中的功能解析

中文摘要第7-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词表第13-15页
1 前言第15-35页
    1.1 植物与病原菌互作第15-20页
        1.1.1 基因对基因学说和警戒模型假说第15-16页
        1.1.2 Zigzag模型假说和植物免疫第16-18页
        1.1.3 蛋白质翻译后修饰在植物免疫反应中的重要作用第18-20页
    1.2 马铃薯与晚疫病互作第20-30页
        1.2.1 马铃薯晚疫病第21-23页
        1.2.2 马铃薯晚疫病抗性第23-25页
        1.2.3 马铃薯抗晚疫病相关的信号传导途径第25-28页
        1.2.4 马铃薯与晚疫病原菌互作机制研究第28-30页
    1.3 NHL基因家族与过敏性反应第30-33页
        1.3.1 HIN1与其同源基因第30-32页
        1.3.2 NDR1基因和NHL基因家族第32-33页
    1.4 本研究的目的和意义第33-35页
2 材料与方法第35-51页
    2.1 实验材料第35-36页
        2.1.1 植物材料第35页
        2.1.2 载体、细菌及P.infestans转化菌株第35-36页
        2.1.3 引物第36页
    2.2 实验方法第36-51页
        2.2.1 GFP标记的P.infestans转化第36页
        2.2.2 P.infestans转化子的鉴定和荧光统计分析第36-37页
        2.2.3 RNA提取及qRT-PCR检测第37-38页
        2.2.4 RNA原位杂交第38-40页
        2.2.5 晚疫病原菌P.infestans接种鉴定第40页
        2.2.6 农杆菌介导的马铃薯遗传转化第40-42页
        2.2.7 病毒诱导的基因沉默体系第42-44页
        2.2.8 R基因与Avr基因的瞬时共表达第44-45页
        2.2.9 POTHR1对PTI信号途径maker基因的影响第45页
        2.2.10 StPOTHR1的亚细胞定位第45-48页
        2.2.11 StPOTHR1翻译后修饰分析第48页
        2.2.12 StPOTHR1互作蛋白的分离与鉴定第48-49页
        2.2.13 StPOTHR1的原核表达第49-51页
3 结果与分析第51-86页
    3.1 GFP标记晚疫病原菌的转化第51-56页
        3.1.1 病原菌转化载体p34GFN的验证第51页
        3.1.2 晚疫病原菌转化及阳性转化子筛选第51-54页
        3.1.3 GFP标记病原菌W8-G20致病力鉴定第54-56页
    3.2 不同马铃薯基因型对荧光标记晚疫病原菌的接种反应第56-59页
        3.2.1 不同马铃薯基因型对荧光标记晚疫病原菌的防御反应模式第56-58页
        3.2.2 马铃薯水平抗性基因型386209.10的防御途径第58-59页
    3.3 StPOTHR1基因功能分析第59-66页
        3.3.1 StPOTHR1的序列信息分析第59-62页
        3.3.2 StPOTHR1基因在不同抗性反应过程中的表达模式第62-63页
        3.3.3 StPOTHR1基因的抗病功能第63-66页
    3.4 StPOTHR1与过敏性反应(HR)的关系第66-76页
        3.4.1 StPOTHR1在马铃薯HR过程中的时空表达模式第66-68页
        3.4.2 StPOTHR1与马铃薯HR的关系确证第68-71页
        3.4.3 StPOTHR1同源基因NbPOTHR1与本氏烟草中主效R基因介导的细胞死亡的关系确证第71-74页
        3.4.4 StPOTHR1同源基因NbPOTHR1在INF1和主效R基因介导的细胞死亡进程中的表达模式第74-76页
    3.5 StPOTHR1与PTI途径的关系第76-78页
    3.6 StPOTHR1的亚细胞定位第78-80页
    3.7 StPOTHR1的翻译后修饰第80-82页
    3.8 StPOTHR1互作蛋白筛选与验证第82-83页
    3.9 StPOTHR1蛋白的原核表达和纯化第83-86页
4 讨论第86-94页
    4.1 NHL家族成员StPOTHR1参与马铃薯对晚疫病的抗性反应第86-87页
    4.2 POTHR1与HR和PTI途径的关系第87-89页
    4.3 StPOTHR1参与晚疫病抗性的可能机制第89-92页
    4.4 研究展望第92-94页
        4.4.1 StPOTHR1的膜定位对其功能的发挥是否必须第92页
        4.4.2 StPOTHR1的翻译后修饰对其功能的影响第92页
        4.4.3 StPOTHR1与MAPK级联信号通路的关系第92-94页
参考文献第94-114页
附录第114-126页
    附录Ⅰ RNA 原位杂交试剂配制第114-118页
    附录Ⅱ RNA 原位杂交探针制备流程第118-119页
    附录Ⅲ 本研究使用的引物序列第119-120页
    附录Ⅳ 本研究使用的序列信息第120-121页
    附录Ⅴ P-MS鉴定的StPOTHR1潜在互做蛋白第121-122页
    附录Ⅵ 附图第122-125页
    附录Ⅶ 攻读博士学位期间发表论文第125-126页
致谢第126-127页

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