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AML外泌体miR-155对脑微血管内皮细胞紧密连接的影响及其机制的初步研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
1 引言第12-16页
2 实验材料和方法第16-38页
    2.1 实验材料第16-18页
        2.1.1 细胞和主要试剂来源第16-17页
        2.1.2 主要仪器设备第17-18页
        2.1.3 主要溶液配制第18页
    2.2 实验方法第18-37页
        2.2.1 细胞培养第18-19页
        2.2.2 收集细胞条件培养基第19-20页
        2.2.3 外泌体的提取第20页
        2.2.4 外泌体的鉴定第20-21页
        2.2.5 荧光定量PCR检测AML细胞株及其外泌体中miR-155表达水平第21-24页
        2.2.6 miR-155过表达和抑制表达慢病毒的构建与转染第24-31页
        2.2.7 miR-155慢病毒感染AML细胞株HL-60第31页
        2.2.8 荧光定量PCR检测转染病毒后HL-60细胞及其外泌体miR-155的表达第31-33页
        2.2.9 荧光显微镜观察脑微血管内皮细胞摄取白血病细胞来源外泌体第33-34页
        2.2.10 免疫荧光法检测AML外泌体miR-155对HBMEC细胞紧密连接完整性的影响第34页
        2.2.11 跨膜电阻仪测定AML外泌体miR-155对内皮细胞跨膜电阻抗值(TEER)的影响第34-35页
        2.2.12 荧光定量PCR检测AML外泌体miR-155对ZO-1基因表达水平的影响第35页
        2.2.13 WestenBlot方法检测AML外泌体miR-155对ZO-1蛋白表达水平的影响第35-37页
    2.3 统计学分析第37-38页
3 实验结果第38-52页
    3.1 外泌体的鉴定第38-40页
        3.1.1 外泌体的形态第38-39页
        3.1.2 外泌体的粒径大小第39-40页
        3.1.3 外泌体表面特异性膜蛋白第40页
    3.2 MIR-155在AML白血病细胞株中的表达水平第40-41页
    3.3 MIR-155在AML细胞来源的外泌体中的表达水平第41-42页
    3.4 成功构建MIR-155过表达及抑制表达慢病毒载体第42-43页
    3.5 成功包装的慢病毒及其滴度第43-45页
    3.6 MIR-155过表达和抑制表达慢病毒感染的HL-60细胞第45-46页
    3.7 病毒转染后HL-60细胞及其来源的外泌体中MIR-155的表达水平第46-47页
    3.8 脑微血管内皮细胞摄取AML细胞株来源的外泌体第47-48页
    3.9 AML外泌体MIR-155对紧密连接完整性的影响第48-49页
    3.10 AML外泌体MIR-155对脑微血管内皮细胞跨膜电阻抗的影响第49-50页
    3.11 AML外泌体MIR-155对紧密连接蛋白ZO-1基因水平的影响第50页
    3.12 AML外泌体MIR-155对紧密连接蛋白ZO-1蛋白水平的影响第50-52页
4 讨论第52-56页
结论第56-57页
参考文献第57-62页
综述第62-83页
    参考文献第74-83页
英文缩略词索引第83-84页
攻读硕士学位期间的主要成果第84-85页
致谢第85-86页

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