摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
1 引言 | 第12-16页 |
2 实验材料和方法 | 第16-38页 |
2.1 实验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 细胞和主要试剂来源 | 第16-17页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第17-18页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-37页 |
2.2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
2.2.2 收集细胞条件培养基 | 第19-20页 |
2.2.3 外泌体的提取 | 第20页 |
2.2.4 外泌体的鉴定 | 第20-21页 |
2.2.5 荧光定量PCR检测AML细胞株及其外泌体中miR-155表达水平 | 第21-24页 |
2.2.6 miR-155过表达和抑制表达慢病毒的构建与转染 | 第24-31页 |
2.2.7 miR-155慢病毒感染AML细胞株HL-60 | 第31页 |
2.2.8 荧光定量PCR检测转染病毒后HL-60细胞及其外泌体miR-155的表达 | 第31-33页 |
2.2.9 荧光显微镜观察脑微血管内皮细胞摄取白血病细胞来源外泌体 | 第33-34页 |
2.2.10 免疫荧光法检测AML外泌体miR-155对HBMEC细胞紧密连接完整性的影响 | 第34页 |
2.2.11 跨膜电阻仪测定AML外泌体miR-155对内皮细胞跨膜电阻抗值(TEER)的影响 | 第34-35页 |
2.2.12 荧光定量PCR检测AML外泌体miR-155对ZO-1基因表达水平的影响 | 第35页 |
2.2.13 WestenBlot方法检测AML外泌体miR-155对ZO-1蛋白表达水平的影响 | 第35-37页 |
2.3 统计学分析 | 第37-38页 |
3 实验结果 | 第38-52页 |
3.1 外泌体的鉴定 | 第38-40页 |
3.1.1 外泌体的形态 | 第38-39页 |
3.1.2 外泌体的粒径大小 | 第39-40页 |
3.1.3 外泌体表面特异性膜蛋白 | 第40页 |
3.2 MIR-155在AML白血病细胞株中的表达水平 | 第40-41页 |
3.3 MIR-155在AML细胞来源的外泌体中的表达水平 | 第41-42页 |
3.4 成功构建MIR-155过表达及抑制表达慢病毒载体 | 第42-43页 |
3.5 成功包装的慢病毒及其滴度 | 第43-45页 |
3.6 MIR-155过表达和抑制表达慢病毒感染的HL-60细胞 | 第45-46页 |
3.7 病毒转染后HL-60细胞及其来源的外泌体中MIR-155的表达水平 | 第46-47页 |
3.8 脑微血管内皮细胞摄取AML细胞株来源的外泌体 | 第47-48页 |
3.9 AML外泌体MIR-155对紧密连接完整性的影响 | 第48-49页 |
3.10 AML外泌体MIR-155对脑微血管内皮细胞跨膜电阻抗的影响 | 第49-50页 |
3.11 AML外泌体MIR-155对紧密连接蛋白ZO-1基因水平的影响 | 第50页 |
3.12 AML外泌体MIR-155对紧密连接蛋白ZO-1蛋白水平的影响 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
综述 | 第62-83页 |
参考文献 | 第74-83页 |
英文缩略词索引 | 第83-84页 |
攻读硕士学位期间的主要成果 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |