| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 中文文摘 | 第4-12页 |
| 绪论 | 第12-20页 |
| 1 阿尔茨海默病 | 第12-13页 |
| 1.1 阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD) | 第12页 |
| 1.2 β淀粉样蛋白(Aβ)与AD | 第12-13页 |
| 2 炎症反应 | 第13-14页 |
| 2.1 炎症反应与AD | 第13页 |
| 2.2 细胞因子与炎症 | 第13-14页 |
| 3 小胶质细胞( microglia)与AD | 第14-17页 |
| 3.1 小胶质细胞(microglia) | 第14-15页 |
| 3.2 小胶质细胞的活化与炎症 | 第15-17页 |
| 4 巨噬细胞(Macrophages) | 第17-20页 |
| 4.1 巨噬细胞(Macrophages) | 第17页 |
| 4.2 巨噬细胞与炎症 | 第17-20页 |
| 第一章 小胶质细胞的原代培养、分离纯化及鉴定 | 第20-32页 |
| 前言 | 第20页 |
| 1 实验材料 | 第20-22页 |
| 1.1 实验动物 | 第20页 |
| 1.2 实验仪器和器材工具 | 第20-21页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第21页 |
| 1.4 实验所需的部分试剂、溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.1 小胶质细胞的原代培养 | 第22-23页 |
| 2.2 小胶质细胞的分离纯化 | 第23-24页 |
| 2.3 小胶质细胞鉴定 | 第24-25页 |
| 2.4 流式鉴定阳性细胞率 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-29页 |
| 3.1 神经胶质细胞混合培养 | 第26-27页 |
| 3.2 纯化出的小胶质细胞 | 第27-28页 |
| 3.3 小胶质细胞免疫细胞化学鉴定 | 第28页 |
| 3.4 小胶质细胞的纯度统计 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-32页 |
| 第二章 Aβ对小胶质细胞的作用——细胞形态的变化,膜表面受体及炎症相关基因的表达变化 | 第32-48页 |
| 前言 | 第32页 |
| 1 实验材料 | 第32-35页 |
| 1.1 实验仪器和器材工具 | 第32-33页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第33页 |
| 1.3 实验所需的部分试剂、溶液的配制 | 第33页 |
| 1.4 本章实验所需引物序列 | 第33-35页 |
| 2 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.1 实验分组和药物处理 | 第35页 |
| 2.2 细胞总RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.3 RNA完整性及纯度的检测 | 第36-37页 |
| 2.4 RNA纯度及浓度鉴定 | 第37页 |
| 2.5 RNA逆转录成cDNA | 第37-38页 |
| 2.6 Aβ受体基因和炎症相关基因表达变化的半定量PCR检测 | 第38-40页 |
| 2.7 炎症相关基因表达变化的荧光定量PCR检测 | 第40页 |
| 3 统计学处理 | 第40-41页 |
| 4 实验结果 | 第41-44页 |
| 4.1 给药后小胶质细胞形态的显微观察 | 第41页 |
| 4.2 RNA完整性检测结果 | 第41-42页 |
| 4.3 A β受体基因和炎症相关基因mRNA的相对表达量 | 第42-44页 |
| 5 讨论 | 第44-48页 |
| 第三章 A β能够跨越血脑屏障的直接证据 | 第48-56页 |
| 前言 | 第48页 |
| 1 实验材料 | 第48-49页 |
| 1.1 实验动物 | 第48页 |
| 1.2 实验仪器和器材工具 | 第48-49页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第49页 |
| 1.4 实验所需的部分试剂、溶液的配制 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-51页 |
| 2.1 小鼠海马区和侧脑室定位注射Aβ | 第49-50页 |
| 2.2 小鼠血清中FAM-Beta-Amyloid (1-42)的检测 | 第50-51页 |
| 3 实验结果 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 第四章 巨噬细胞的原代培养、分离纯化及鉴定 | 第56-62页 |
| 前言 | 第56页 |
| 1 实验材料 | 第56-57页 |
| 1.1 实验动物 | 第56页 |
| 1.2 实验仪器和器材工具 | 第56-57页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第57页 |
| 1.4 实验所需的部分试剂、溶液的配制 | 第57页 |
| 2 实验方法 | 第57-59页 |
| 2.1 巨噬细胞的原代培养 | 第57-58页 |
| 2.2 骨髓源巨噬细胞纯度鉴定 | 第58-59页 |
| 3 实验结果 | 第59-61页 |
| 3.1 巨噬细胞的原代培养 | 第59-60页 |
| 3.2 巨噬细胞免疫细胞化学鉴定 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 第五章 Aβ对原代巨噬细胞的作用——细胞形态的变化,及炎症相关基因的表达变化 | 第62-68页 |
| 前言 | 第62页 |
| 1 实验材料 | 第62-64页 |
| 1.1 实验动物 | 第62页 |
| 1.2 实验仪器和器材工具 | 第62-63页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第63页 |
| 1.4 实验所需的部分试剂、溶液的配制 | 第63页 |
| 1.5 本章实验所需引物序列 | 第63-64页 |
| 2 实验方法 | 第64页 |
| 2.1 实验分组和药物处理 | 第64页 |
| 2.2 半定量PCR和qRT-PCR检测 | 第64页 |
| 2.3 统计学处理 | 第64页 |
| 3 实验结果 | 第64-66页 |
| 3.1 给药后巨噬细胞形态的显微观察 | 第64-65页 |
| 3.2 炎症相关基因mRNA的相对表达量 | 第65-66页 |
| 3.3 使用实时荧光定量PCR检测炎症基因的表达 | 第66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 第六章 A β对巨噬细胞系AMJ2-C11的作用——细胞形态变化,表面受体及炎症相关基因表达的变化 | 第68-84页 |
| 前言 | 第68页 |
| 1 实验材料 | 第68-72页 |
| 1.1 实验仪器和器材工具 | 第68-69页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第69页 |
| 1.3 实验所需的部分试剂、溶液的配制 | 第69-70页 |
| 1.4 本章实验所需引物序列 | 第70-72页 |
| 2 实验方法 | 第72-76页 |
| 2.1 复苏AMJ2细胞进行培养 | 第72-73页 |
| 2.2 细胞的换液 | 第73页 |
| 2.3. 细胞的传代 | 第73页 |
| 2.4. 细胞的冻存 | 第73页 |
| 2.5 实验分组和药物处理 | 第73页 |
| 2.6 半定量PCR和qRT-PCR检测 | 第73页 |
| 2.7 Western Blot检测 | 第73-75页 |
| 2.8 细胞上清液中炎症因子检测 | 第75-76页 |
| 3 统计学处理 | 第76页 |
| 4 实验结果 | 第76-81页 |
| 4.1 向细胞培养基中添加Aβ后,AMJ2-C11细胞形态的变化 | 第76页 |
| 4.2 炎症相关基因mRNA的相对表达量 | 第76-77页 |
| 4.3 Aβ受体基因mRNA的相对表达量 | 第77-78页 |
| 4.4 使用实时荧光定量PCR检测炎症基因的表达 | 第78-79页 |
| 4.5 Western Blot检测细胞内炎症通路基因的表达情况 | 第79-80页 |
| 4.6 细胞培养上清中炎症因子浓度的变化趋势 | 第80-81页 |
| 5 讨论 | 第81-84页 |
| 第七章 结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-96页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 个人简历 | 第100-104页 |
