摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1 贵州兴义鸭概述 | 第11页 |
2 影响畜禽屠宰性状的候选基因 | 第11-16页 |
2.1 MEF2C基因的研究进展 | 第12-15页 |
2.2 MEF2D基因的研究进展 | 第15-16页 |
3 可变剪接 | 第16-18页 |
4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 兴义鸭MEF2C和MEF2D基因多态性与屠宰性状的关联性研究 | 第19-31页 |
1 试验材料 | 第19-20页 |
1.1 试验动物与样品 | 第19页 |
1.2 主要试剂 | 第19页 |
1.3 试验仪器设备 | 第19-20页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第20页 |
2 试验方法 | 第20-23页 |
2.1 基因组DNA提取 | 第20页 |
2.2 引物设计 | 第20-22页 |
2.3 PCR扩增及测序 | 第22-23页 |
2.4 数据分析 | 第23页 |
3 结果与分析 | 第23-29页 |
3.1 MEF2C、MEF2D基因PCR扩增结果 | 第23-24页 |
3.2 测序结果分析 | 第24-25页 |
3.3 多态位点遗传多态性的分析 | 第25-26页 |
3.4 MEF2D多态性与屠宰性状相关性分析 | 第26-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
5 小结 | 第30-31页 |
第三章 兴义鸭MEF2C和MEF2D基因原核表达载体的构建 | 第31-45页 |
1 试验材料 | 第31-32页 |
1.1 样品、菌株、载体 | 第31页 |
1.2 试验主要试剂 | 第31页 |
1.3 试验仪器 | 第31-32页 |
1.4 常用试剂配制 | 第32页 |
2 试验方法 | 第32-37页 |
2.1 兴义鸭组织总RNA提取 | 第32-33页 |
2.2 cDNA的合成 | 第33页 |
2.3 MEF2C和MEF2D基因CDS区的克隆 | 第33-36页 |
2.4 pET32a(+)-MEF2C、pET32a(+)-MEF2D原核表达载体构建 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-42页 |
3.1 CDS区扩增产物的PCR检测结果 | 第37-38页 |
3.2 pUCmT-MEF2C/pMD18-T-MEF2D重组载体的菌液PCR鉴定和测序鉴定 | 第38-39页 |
3.3 pUCmT-MEF2C/pMD18-T-MEF2D重组质粒的双酶切检测 | 第39-40页 |
3.4 pET32a(+)-MEF2C/MEF2D重组载体的构建 | 第40-41页 |
3.5 MEF2C和MEF2D基因CDS区的稀有密码子分析 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
5 小结 | 第44-45页 |
第四章 兴义鸭MEF2C和MEF2D基因原核表达 | 第45-53页 |
1 实验材料 | 第45-46页 |
1.1 实验样品 | 第45页 |
1.2 主要试剂 | 第45页 |
1.3 主要仪器设备 | 第45页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第45-46页 |
2 实验方法 | 第46-50页 |
2.1 重组质粒转入BL21(DE3)感受态细胞 | 第46页 |
2.2 总蛋白的提取 | 第46-47页 |
2.3 蛋白样品变性处理 | 第47页 |
2.4 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第47-49页 |
2.5 重组蛋白的Western Blot检测 | 第49-50页 |
3 结果与分析 | 第50-51页 |
3.1 重组载体和空载体转入BL21(DE3)感受态的酶切检测 | 第50页 |
3.2 重组蛋白的表达形式 | 第50-51页 |
3.3 重组蛋白western blot的检测 | 第51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
5 小结 | 第52-53页 |
第五章 结论与展望 | 第53-55页 |
1 结论 | 第53页 |
2 展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-64页 |