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兴义鸭MEF2C和MEF2D基因的SNPs分析及原核表达研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 文献综述第11-19页
    1 贵州兴义鸭概述第11页
    2 影响畜禽屠宰性状的候选基因第11-16页
        2.1 MEF2C基因的研究进展第12-15页
        2.2 MEF2D基因的研究进展第15-16页
    3 可变剪接第16-18页
    4 本研究的目的和意义第18-19页
第二章 兴义鸭MEF2C和MEF2D基因多态性与屠宰性状的关联性研究第19-31页
    1 试验材料第19-20页
        1.1 试验动物与样品第19页
        1.2 主要试剂第19页
        1.3 试验仪器设备第19-20页
        1.4 主要试剂的配制第20页
    2 试验方法第20-23页
        2.1 基因组DNA提取第20页
        2.2 引物设计第20-22页
        2.3 PCR扩增及测序第22-23页
        2.4 数据分析第23页
    3 结果与分析第23-29页
        3.1 MEF2C、MEF2D基因PCR扩增结果第23-24页
        3.2 测序结果分析第24-25页
        3.3 多态位点遗传多态性的分析第25-26页
        3.4 MEF2D多态性与屠宰性状相关性分析第26-29页
    4 讨论第29-30页
    5 小结第30-31页
第三章 兴义鸭MEF2C和MEF2D基因原核表达载体的构建第31-45页
    1 试验材料第31-32页
        1.1 样品、菌株、载体第31页
        1.2 试验主要试剂第31页
        1.3 试验仪器第31-32页
        1.4 常用试剂配制第32页
    2 试验方法第32-37页
        2.1 兴义鸭组织总RNA提取第32-33页
        2.2 cDNA的合成第33页
        2.3 MEF2C和MEF2D基因CDS区的克隆第33-36页
        2.4 pET32a(+)-MEF2C、pET32a(+)-MEF2D原核表达载体构建第36-37页
    3 结果与分析第37-42页
        3.1 CDS区扩增产物的PCR检测结果第37-38页
        3.2 pUCmT-MEF2C/pMD18-T-MEF2D重组载体的菌液PCR鉴定和测序鉴定第38-39页
        3.3 pUCmT-MEF2C/pMD18-T-MEF2D重组质粒的双酶切检测第39-40页
        3.4 pET32a(+)-MEF2C/MEF2D重组载体的构建第40-41页
        3.5 MEF2C和MEF2D基因CDS区的稀有密码子分析第41-42页
    4 讨论第42-44页
    5 小结第44-45页
第四章 兴义鸭MEF2C和MEF2D基因原核表达第45-53页
    1 实验材料第45-46页
        1.1 实验样品第45页
        1.2 主要试剂第45页
        1.3 主要仪器设备第45页
        1.4 主要试剂的配制第45-46页
    2 实验方法第46-50页
        2.1 重组质粒转入BL21(DE3)感受态细胞第46页
        2.2 总蛋白的提取第46-47页
        2.3 蛋白样品变性处理第47页
        2.4 SDS-PAGE凝胶电泳第47-49页
        2.5 重组蛋白的Western Blot检测第49-50页
    3 结果与分析第50-51页
        3.1 重组载体和空载体转入BL21(DE3)感受态的酶切检测第50页
        3.2 重组蛋白的表达形式第50-51页
        3.3 重组蛋白western blot的检测第51页
    4 讨论第51-52页
    5 小结第52-53页
第五章 结论与展望第53-55页
    1 结论第53页
    2 展望第53-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页
附录第62-64页

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