橙色红曲菌ctnG基因和ctnH基因缺失菌株的构建及其功能分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-19页 |
| ·前言 | 第10页 |
| ·桔霉素 | 第10-14页 |
| ·桔霉素的简介 | 第10-11页 |
| ·桔霉素生物合成途径 | 第11-13页 |
| ·桔霉素基因簇及其基因的分析 | 第13-14页 |
| ·基因敲除技术 | 第14-17页 |
| ·基因敲除的概念 | 第14-15页 |
| ·丝状真菌基因敲除的策略与方法 | 第15-16页 |
| ·靶基因缺失细胞的筛选和鉴定 | 第16-17页 |
| ·基因敲除在丝状真菌研究中的应用 | 第17-18页 |
| ·应用于基因功能的研究 | 第17页 |
| ·应用于基因的改造 | 第17-18页 |
| ·研究的内容、目的和意义 | 第18-19页 |
| 第2章 ctnG缺失菌株的构建 | 第19-47页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·菌种和质粒 | 第19页 |
| ·主要仪器与设备 | 第19页 |
| ·酶和生物试剂 | 第19-20页 |
| ·分析试剂、缓冲溶液和培养基 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-33页 |
| ·ctnG基因生物信息学分析 | 第21-22页 |
| ·打靶载体构建示意图 | 第22-23页 |
| ·引物序列 | 第23页 |
| ·菌种的培养 | 第23-24页 |
| ·玻璃珠法提取红曲菌基因组DNA | 第24页 |
| ·改进的氯化苄法分离纯化红曲菌基因组DNA | 第24页 |
| ·重组载体pCTNG的构建 | 第24-26页 |
| ·打靶载体pCTNG-HPH的构建 | 第26-27页 |
| ·打靶载体pCTNG-HPH的线性化 | 第27页 |
| ·打靶载体pCTNG-HPH转化红曲原生质体 | 第27-28页 |
| ·目的缺失菌株的验证 | 第28-33页 |
| ·ctnG缺失菌株次级代谢产物的测定 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-46页 |
| ·ctnG基因的生物信息学分析结果 | 第33-35页 |
| ·重组载体pCTNG的构建 | 第35-37页 |
| ·打靶载体pCTNG-HPH的构建 | 第37-40页 |
| ·打靶载体pCTNG-HPH的转化 | 第40页 |
| ·目的缺失菌株的验证 | 第40-42页 |
| ·ctnG缺失菌株次级代谢产物的测定 | 第42-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第3章 ctnH缺失菌株的构建 | 第47-60页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-53页 |
| ·ctnH基因生物信息学分析 | 第47-48页 |
| ·打靶载体构建示意图 | 第48-49页 |
| ·引物序列 | 第49页 |
| ·菌种的培养 | 第49页 |
| ·玻璃珠法提取红曲菌基因组DNA | 第49页 |
| ·改进的氯化苄法分离纯化红曲菌基因组DNA | 第49-50页 |
| ·重组载体pCTNH的克隆 | 第50-51页 |
| ·打靶载体pCTNH-HPH的构建 | 第51页 |
| ·打靶载体pCTNG-HPH的线性化 | 第51-52页 |
| ·打靶载体pCTNG-HPH转化红曲原生质体 | 第52页 |
| ·目的缺失菌株的验证 | 第52-53页 |
| ·ctnH缺失菌株次级代谢产物的测定 | 第53页 |
| ·实验结果 | 第53-59页 |
| ·ctnH基因的生物信息学分析结果 | 第53-55页 |
| ·重组载体pCTNH的克隆 | 第55-56页 |
| ·打靶载体pCTNH-HPH的构建 | 第56-58页 |
| ·打靶载体pCTNH-HPH的转化 | 第58页 |
| ·目的缺失菌株的验证 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第4章 讨论 | 第60-64页 |
| ·打靶载体的构建 | 第60页 |
| ·原生质体的制备 | 第60-62页 |
| ·转化子基因组DNA的提取 | 第62页 |
| ·ctnG、ctnH的基因功能分析 | 第62-64页 |
| 第5章 结论与展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简介 | 第70页 |
