| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第15-53页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 MALDI质谱介绍 | 第15-25页 |
| 1.2.1 离子化机理 | 第15-20页 |
| 1.2.2 样品准备 | 第20-21页 |
| 1.2.3 MALDI基质要求和种类 | 第21-24页 |
| 1.2.4 MALDI质谱的特点和不足 | 第24-25页 |
| 1.3 新型基质的开发 | 第25-30页 |
| 1.3.1 有机小分子基质的研发 | 第25-29页 |
| 1.3.2 纳米材料基底和基质 | 第29-30页 |
| 1.4 生物样品的富集和除盐 | 第30-34页 |
| 1.4.1 非靶上前处理技术 | 第30-31页 |
| 1.4.2 靶上前处理技术 | 第31-34页 |
| 1.5 酶活性分析 | 第34-40页 |
| 1.5.1 酶的作用 | 第34页 |
| 1.5.2 酶催化反应特点 | 第34-35页 |
| 1.5.3 质谱分析酶活性 | 第35-40页 |
| 1.6 本论文的研究思路和主要研究内容 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-53页 |
| 第二章 (E)-丙基Α-氰-4-羟基肉桂酸盐：高灵敏和耐盐性基质用于MALDI质谱检测完整蛋白 | 第53-79页 |
| 2.1 引言 | 第53-54页 |
| 2.2 实验部分 | 第54-56页 |
| 2.2.1 试剂和材料 | 第54页 |
| 2.2.2 合成衍生化的CHCA | 第54-55页 |
| 2.2.3 基质和样品准备 | 第55页 |
| 2.2.4 仪器 | 第55-56页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第56-71页 |
| 2.3.1 对衍生化的CHCA基质进行初步的评价 | 第56-59页 |
| 2.3.2 灵敏度,样品均匀度和信噪比 | 第59-63页 |
| 2.3.3 蛋白电荷状态 | 第63-64页 |
| 2.3.4 分辨率 | 第64-65页 |
| 2.3.5 耐盐性和耐洗能力 | 第65-67页 |
| 2.3.6 鸡蛋白的测定 | 第67-68页 |
| 2.3.7 机理分析 | 第68-71页 |
| 2.4 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 第三章 高灵敏和耐污染物的MALDI基质用于膜蛋白的检测 | 第79-103页 |
| 3.1 引言 | 第79-80页 |
| 3.2 实验部分 | 第80-83页 |
| 3.2.1 试剂和材料 | 第80-81页 |
| 3.2.2 膜蛋白溶解和切割 | 第81页 |
| 3.2.3 样品和基质准备 | 第81-82页 |
| 3.2.4 图案化石蜡靶板制作 | 第82页 |
| 3.2.5 MALDI质谱分析 | 第82-83页 |
| 3.2.6 SEM分析 | 第83页 |
| 3.2.7 肽段的疏水性 | 第83页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第83-96页 |
| 3.3.1 MALDI质谱比较分析疏水和亲水性肽段 | 第83-85页 |
| 3.3.2 棕榈酰化分析 | 第85-86页 |
| 3.3.3 耐污染物能力的评价 | 第86-89页 |
| 3.3.4 CHCA-C3耐污染物能力的机理分析 | 第89-91页 |
| 3.3.5 分析菌视紫红质膜蛋白的胰酶酶切产物 | 第91-93页 |
| 3.3.6 分析BRCNBr切割产物 | 第93-94页 |
| 3.3.7 检测完整膜蛋白 | 第94-96页 |
| 3.4 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-103页 |
| 第四章 图案化MALDI钢靶用于多肽和蛋白的原位一步自除盐和富集 | 第103-123页 |
| 4.1 引言 | 第103-104页 |
| 4.2 实验部分 | 第104-106页 |
| 4.2.1 化学药品和材料 | 第104页 |
| 4.2.2 ZipTipC18样品除盐 | 第104页 |
| 4.2.3 蛋白消除 | 第104-105页 |
| 4.2.4 Trypsin酶切BSA | 第105页 |
| 4.2.5 样品和基质准备 | 第105页 |
| 4.2.6 仪器 | 第105-106页 |
| 4.2.7 OISE靶板的制作 | 第106页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第106-120页 |
| 4.3.1 靶上表面图案化和样品准备方法的优化 | 第106-110页 |
| 4.3.2 OISE靶板的富集效率 | 第110-113页 |
| 4.3.3 OISE靶板的除盐效率 | 第113-115页 |
| 4.3.4 OSIE靶板的重现性和稳定性 | 第115-117页 |
| 4.3.5 分析BSA胰蛋白酶酶切产物和人血清 | 第117-120页 |
| 4.4 结论 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-123页 |
| 第五章 定制的新型探针用于MALDI质谱分析Γ-谷氨酰转肽酶活性 | 第123-143页 |
| 5.1 引言 | 第123-125页 |
| 5.2 实验部分 | 第125-128页 |
| 5.2.1 试剂和材料 | 第125页 |
| 5.2.2 仪器 | 第125页 |
| 5.2.3 合成Aq-ECG和Aq-ECA | 第125-127页 |
| 5.2.4 GGT检测的一般程序 | 第127-128页 |
| 5.2.5 GGT试剂盒分析 | 第128页 |
| 5.2.6 细胞溶菌产物GGT活性分析 | 第128页 |
| 5.3 结果和讨论 | 第128-139页 |
| 5.3.1 合理设计GGT特异性的肽段探针 | 第128-135页 |
| 5.3.2 GGT的定量分析 | 第135-136页 |
| 5.3.3 探针选择性评价 | 第136-137页 |
| 5.3.4 酶抑制剂的定量分析 | 第137页 |
| 5.3.5 确定血液中GGT水平 | 第137页 |
| 5.3.6 细胞溶菌产物中GGT含量分析 | 第137-139页 |
| 5.4 结论 | 第139-140页 |
| 参考文献 | 第140-143页 |
| 第六章 总结和展望 | 第143-145页 |
| 6.1 总结 | 第143-144页 |
| 6.2 展望 | 第144-145页 |
| 作者简历 | 第145-147页 |
| 致谢 | 第147页 |
