| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 1.引言 | 第15-29页 |
| 1.1 绵羊研究 | 第15-17页 |
| 1.1.1 驯化与绵羊的起源 | 第15页 |
| 1.1.2 呼伦贝尔短尾羊品种简绍 | 第15-17页 |
| 1.1.3 肉用绵羊经济效益概况 | 第17页 |
| 1.2 绵羊尾部及短尾表型研究进展 | 第17-21页 |
| 1.3 基因组测序研究 | 第21-23页 |
| 1.3.1 重测序 | 第21页 |
| 1.3.2 绵羊基因组研究 | 第21-22页 |
| 1.3.3 基因组测序在经济动物中的应用 | 第22页 |
| 1.3.4 信号选择 | 第22-23页 |
| 1.4 CRISPR/Cas9基因编辑技术 | 第23-25页 |
| 1.4.1 基因编辑技术 | 第23-24页 |
| 1.4.2 CRISPR/Cas9基因编辑系统工作原理 | 第24-25页 |
| 1.5 T/Brachyury基因的研究 | 第25-27页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第27-28页 |
| 1.7 技术路线 | 第28-29页 |
| 2.实验一 呼伦贝尔短尾羊尾部形态结构的研究 | 第29-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-30页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第29页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第29页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第29页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第29-30页 |
| 2.2 实验结果 | 第30-32页 |
| 2.2.1 尾部的外部观察 | 第30页 |
| 2.2.2 尾椎形态结构观测 | 第30-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32页 |
| 2.4 小结 | 第32-33页 |
| 3.实验二 基因组重测序 | 第33-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-37页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第33页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第33-34页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第34页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第34-37页 |
| 3.2 实验结果 | 第37-44页 |
| 3.2.1 基因组DNA提取结果 | 第37-38页 |
| 3.2.2 测序数据结果 | 第38页 |
| 3.2.3 群体SNP的检测结果 | 第38-39页 |
| 3.2.4 选择消除分析 | 第39-43页 |
| 3.2.5 候选基因基因验证结果 | 第43-44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-45页 |
| 3.4 小结 | 第45-46页 |
| 4.实验三 Brachyury蛋白功能研究 | 第46-70页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-60页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第46页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第46-47页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第47-48页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第48-60页 |
| 4.2 实验结果 | 第60-68页 |
| 4.2.1 绵羊16天胚胎总RNA检测结果 | 第60-61页 |
| 4.2.2 绵羊 Brachyury 基因 RT-PCR 扩增产物电泳结果 | 第61页 |
| 4.2.3 绵羊Brachyury基因的测序结果 | 第61-62页 |
| 4.2.4 Brachyury基因(334G→T)定点突变结果 | 第62-63页 |
| 4.2.5 目的片段与表达载体的双酶切结果 | 第63-64页 |
| 4.2.6 原核表达与鉴定 | 第64-65页 |
| 4.2.7 重组蛋白的纯化 | 第65-67页 |
| 4.2.8 EMSA | 第67-68页 |
| 4.3 讨论 | 第68-69页 |
| 4.4 小结 | 第69-70页 |
| 5.实验四 c.G334T小鼠模型的建立 | 第70-93页 |
| 5.1 材料与方法 | 第70-84页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第70页 |
| 5.1.2 仪器设备 | 第70-71页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第71页 |
| 5.1.4 实验方法 | 第71-84页 |
| 5.2 实验结果 | 第84-91页 |
| 5.2.1 sgRNA的构建 | 第84页 |
| 5.2.2 构建含T7启动子的Cas9 | 第84-86页 |
| 5.2.3 胚胎sgRNA活性检测 | 第86页 |
| 5.2.4 阳性小鼠鉴定及显微注射统计 | 第86-87页 |
| 5.2.5 脱靶检测 | 第87-88页 |
| 5.2.6 小鼠表型 | 第88-89页 |
| 5.2.7 Brachyury表达量分析 | 第89-91页 |
| 5.3 讨论 | 第91-92页 |
| 5.4 小结 | 第92-93页 |
| 6.结论 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-105页 |
| 作者简介 | 第105页 |
