摘要 | 第2-3页 |
abstract | 第3-4页 |
引言 | 第7-9页 |
第一章 材料与方法 | 第9-20页 |
1.1 实验动物 | 第9页 |
1.2 实验细胞 | 第9页 |
1.3 主要试剂 | 第9页 |
1.4 主要仪器 | 第9-10页 |
1.5 结直肠癌肝转移模型的制备 | 第10页 |
1.6 实验动物分组及给药 | 第10页 |
1.7 小鼠肿瘤发生情况 | 第10-11页 |
1.8 病理组织学观察 | 第11页 |
1.9 Western-blot方法检测GSK3β、pGSK3β、β-catenin的表达 | 第11-15页 |
1.9.1 制备组织蛋白样品 | 第11页 |
1.9.2 BCA法测蛋白浓度 | 第11-12页 |
1.9.3 Western-blot | 第12-15页 |
1.10 免疫组织化学法检测小鼠肝脏组织中E-cadherin、MMP7、MMP9、CD44、VEGF蛋白的表达 | 第15-16页 |
1.10.1 免疫组化切片制作 | 第15-16页 |
1.10.2 实验结果判定标准 | 第16页 |
1.11 实时荧光定量PCR(Real-timePCR)方法检测E-cadherin、MMP7、MMP9、CD44、VEGFmRNA的表达 | 第16-19页 |
1.11.1 提取组织中的总RNA | 第16页 |
1.11.2 RNA浓度测定 | 第16-17页 |
1.11.3 反转录 | 第17-18页 |
1.11.4 PCR扩增 | 第18页 |
1.11.5 引物序列 | 第18-19页 |
1.12 数据处理 | 第19-20页 |
第二章 结果 | 第20-27页 |
2.1 实验各组BALB/c小鼠体重变化趋势 | 第20页 |
2.2 各组小鼠结直肠癌肝转移肿瘤发生情况 | 第20-21页 |
2.3 病理形态学观察 | 第21-22页 |
2.4 Western-blot法检测铜对小鼠结直肠癌肝转移肝脏组织中GSK3β、β-catenin蛋白表达的影响 | 第22-23页 |
2.5 免疫组织化学法检测铜干预对小鼠结直肠癌肝转移肝脏组织中E-cadherin、MMP7、MMP9、CD44、VEGF蛋白表达的影响 | 第23-25页 |
2.6 实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测铜干预对小鼠结直肠癌肝转移肝脏组织中E-cadherin、MMP7、MMP9、CD44、VEGFmRNA表达的影响 | 第25-27页 |
第三章 讨论 | 第27-31页 |
第四章 结论 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-37页 |
综述 | 第37-49页 |
综述参考文献 | 第44-49页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |