| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-32页 |
| 1 薄荷属的分类及系统演化研究 | 第16-22页 |
| 1.1 薄荷属的起源及其分布概况 | 第16-17页 |
| 1.2 薄荷属植物染色体数目研究 | 第17-19页 |
| 1.3 薄荷属植物的分类学研究 | 第19-22页 |
| 1.3.1 形态学分类研究 | 第19-20页 |
| 1.3.2 解剖学分类研究 | 第20-21页 |
| 1.3.3 孢粉学分类研究 | 第21页 |
| 1.3.4 化学分类学研究 | 第21-22页 |
| 2 薄荷油合成途径相关酶基因研究进展 | 第22-25页 |
| 2.1 挥发油合成途径相关酶基因研究进展 | 第22-25页 |
| 2.2 柠檬烯合酶(Limonene synthase)研究进展 | 第25页 |
| 3 薄荷属植物系统发育与分子进化研究进展 | 第25-30页 |
| 3.1 植物分子进化研究 | 第25-29页 |
| 3.1.1 线粒体基因DNA序列研究 | 第26-27页 |
| 3.1.2 叶绿体基因DNA序列研究 | 第27-28页 |
| 3.1.3 核基因DNA序列研究 | 第28-29页 |
| 3.2 薄荷属分子进化研究进展 | 第29-30页 |
| 本研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 薄荷MhLS基因的克隆、生物信息学与表达分析 | 第32-46页 |
| 1 材料与方法 | 第32-37页 |
| 1.1 植物材料 | 第32-33页 |
| 1.2 菌株 | 第33页 |
| 1.3 试剂 | 第33页 |
| 1.4 薄荷总RNA的提取 | 第33页 |
| 1.5 cDNA第一条链的合成 | 第33-34页 |
| 1.6 基因全长克隆引物 | 第34页 |
| 1.7 PCR扩增 | 第34-35页 |
| 1.8 DNA片段的电泳、回收、连接及测序 | 第35页 |
| 1.9 连接、转化及测序 | 第35-36页 |
| 1.9.1 氯化钙制备感受态大肠杆菌 | 第35页 |
| 1.9.2 连接、转化及测序 | 第35-36页 |
| 1.10 序列分析 | 第36-37页 |
| 1.11 RT-PCR方法 | 第37页 |
| 1.11.1 RT-PCR扩增体系 | 第37页 |
| 1.11.2 RT-PCR反应程序 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-44页 |
| 2.1 薄荷MhLS基因的cDNA全长克隆 | 第37-39页 |
| 2.2 薄荷MhLS基因的氨基酸序列分析 | 第39-44页 |
| 2.3 MhLS基因的结构分析 | 第44页 |
| 2.4 MhLS基因在薄荷属中的表达分析 | 第44页 |
| 3 讨论与结论 | 第44-46页 |
| 第三章 MhLS基因的分子进化分析 | 第46-68页 |
| 1 材料与方法 | 第47-50页 |
| 1.1 植物材料 | 第47-48页 |
| 1.2 总DNA的提取 | 第48-49页 |
| 1.3 DNA质量检测 | 第49页 |
| 1.4 MhLS基因组全长序列的PCR扩增 | 第49页 |
| 1.5 MhLS基因组全长序列的PCR扩增引物 | 第49-50页 |
| 1.6 DNA片段的电泳、回收及连接 | 第50页 |
| 1.7 序列分析 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-66页 |
| 2.1 MhLS基因序列的扩增 | 第50页 |
| 2.2 MhLS基因序列特征及进化信息分析 | 第50-66页 |
| 2.2.1 MhLS基因结构 | 第50-53页 |
| 2.2.2 MhLS基因的碱基组成分析 | 第53-62页 |
| 2.2.3 MhLS基因密码子使用频率分析 | 第62-63页 |
| 2.2.4 MhLS基因的碱基替换对分析 | 第63页 |
| 2.2.5 MhLS基因序列的遗传距离分析 | 第63-66页 |
| 3 讨论与结论 | 第66-68页 |
| 第四章 基于MhLS基因的薄荷属种间亲缘关系分析 | 第68-80页 |
| 1 材料与方法 | 第68-69页 |
| 1.1 材料 | 第68-69页 |
| 1.2 方法 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-76页 |
| 2.1 基于MhLS基因DNA序列的薄荷属亲缘关系分析 | 第69-72页 |
| 2.2 基于MhLS基因cDNA序列的薄荷属亲缘关系分析 | 第72-74页 |
| 2.3 基于MhLS基因氨基酸序列的薄荷属亲缘关系分析 | 第74-76页 |
| 2.4 基于MhLS基因的薄荷属亲缘关系的综合分析 | 第76页 |
| 3 讨论与结论 | 第76-80页 |
| 3.1 不同构树方法的选择 | 第76-78页 |
| 3.2 序列比对与序列进化信息的评估 | 第78页 |
| 3.3 基于MhLS基因进化探讨薄荷属植物的系统进化 | 第78-80页 |
| 第五章 MhLS基因的转薄荷研究 | 第80-90页 |
| 1 材料与方法 | 第80-85页 |
| 1.1 植物材料 | 第80页 |
| 1.2 菌株 | 第80页 |
| 1.3 培养基 | 第80-82页 |
| 1.3.1 细菌培养基 | 第80-81页 |
| 1.3.2 薄荷组织培养培养基 | 第81-82页 |
| 1.4 酶与主要试剂 | 第82页 |
| 1.5 植物表达载体的构建 | 第82-83页 |
| 1.5.1 带有酶切位点的目的片段克隆 | 第82-83页 |
| 1.5.2 目的片段的回收、连接及转化 | 第83页 |
| 1.5.3 双酶切 | 第83页 |
| 1.5.4 阳性克隆验证 | 第83页 |
| 1.6 感受态细胞的制备和大肠杆菌的转化 | 第83-84页 |
| 1.7 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第84页 |
| 1.8 杆菌感受态的制备及转化 | 第84页 |
| 1.9 农杆菌质粒的提取 | 第84-85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-88页 |
| 2.1 MhLS基因植物表达载体的构建 | 第85-86页 |
| 2.2 MhLS的薄荷遗传转化 | 第86-88页 |
| 2.2.1 无菌苗的制备 | 第86-87页 |
| 2.2.2 农杆菌的培养 | 第87页 |
| 2.2.3 供体预培养 | 第87页 |
| 2.2.4 农杆菌侵染和共培养 | 第87页 |
| 2.2.5 再生植株的获得 | 第87页 |
| 2.2.6 不定芽筛选培养 | 第87-88页 |
| 3 讨论和结论 | 第88-90页 |
| 全文结论 | 第90-92页 |
| 本研究的创新点 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-104页 |
| 附录 | 第104-118页 |
| 致谢 | 第118-120页 |
| 攻读学位期间发表的科研成果 | 第120页 |
