| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第1章 前言 | 第8-20页 |
| ·嗜热微生物 | 第8-11页 |
| ·嗜热微生物的定义和分类 | 第8-11页 |
| ·嗜热微生物的应用 | 第11页 |
| ·蛋白酶 | 第11-14页 |
| ·蛋白酶的定义和分类 | 第11-14页 |
| ·嗜热蛋白酶的应用 | 第14页 |
| ·蛋白酶Pyrococcus horikoshii Protease I（PhpI） | 第14-18页 |
| ·超嗜热古菌Pyrococcus horikoshii OT3 | 第14-15页 |
| ·DJ-1/ThiJ/pfpI超家族 | 第15-16页 |
| ·蛋白酶PhpI | 第16-18页 |
| ·定点突变——酶分子的理性设计 | 第18页 |
| ·立题依据 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·质粒与菌种 | 第20-21页 |
| ·主要实验试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-32页 |
| ·突变体的构建 | 第24-26页 |
| ·突变体基因的表达 | 第26-27页 |
| ·目的蛋白的提取、纯化与鉴定 | 第27-29页 |
| ·目的蛋白的定量 | 第29页 |
| ·蛋白酶活力的测定 | 第29-31页 |
| ·生物学软件 | 第31-32页 |
| 第3章 重组蛋白酶PhpI活性形式的确定及酶学性质表征 | 第32-39页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·PhpI蛋白酶的纯化及活性形式的确定 | 第32-35页 |
| ·PhpI蛋白酶催化活性的测定 | 第35-38页 |
| ·底物特异性的测定 | 第35-37页 |
| ·氨基肽酶与内切酶底物动力学常数的测定 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第4章 活性中心120 位点对PhpI蛋白酶催化活性的影响 | 第39-47页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·Tyr120 位点的确定 | 第39-41页 |
| ·120 位点突变体对催化反应动力学的影响 | 第41-42页 |
| ·底物分子对接 | 第42-45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 第5章 蛋白质别构部位残基对PhpI蛋白酶催化活性的影响 | 第47-54页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·别构部位突变位点的确定 | 第47-49页 |
| ·突变体动力学常数的测定 | 第49-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 中文摘要 | 第59-61页 |
| Abstract | 第61-63页 |
