| 中文摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第14-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-43页 |
| 1.1 黄瓜生物学特征 | 第19-20页 |
| 1.2 图位克隆及其他常见的几种植物基因克隆技术 | 第20-25页 |
| 1.2.1 图位克隆技术简介 | 第21页 |
| 1.2.2 图位克隆使用的 DNA 分子标记 | 第21-22页 |
| 1.2.3 作图亲本和分离群体类型的选择 | 第22-23页 |
| 1.2.4 图位克隆操作步骤 | 第23页 |
| 1.2.5 其他几种植物基因克隆技术 | 第23-25页 |
| 1.3 黄瓜遗传转化研究进展 | 第25-30页 |
| 1.3.1 遗传转化简介 | 第25-26页 |
| 1.3.2 常用农杆菌和转化方法 | 第26页 |
| 1.3.3 黄瓜遗传转化影响因素 | 第26-28页 |
| 1.3.4 转基因植株的检测及鉴定 | 第28页 |
| 1.3.5 农杆菌介导的黄瓜遗传转化研究进展 | 第28-30页 |
| 1.4 C_2H_2型锌指蛋白功能研究 | 第30-31页 |
| 1.4.1 C_2H_2锌指蛋白的概念 | 第30页 |
| 1.4.2 C_2H_2锌指蛋白基因功能 | 第30-31页 |
| 1.5 黄瓜果实果刺与表皮毛的关系 | 第31-35页 |
| 1.5.1 果刺性状有关基因 | 第31页 |
| 1.5.2 黄瓜叶片表皮毛与果刺结构分析 | 第31-32页 |
| 1.5.3 植物表皮毛的调控机制 | 第32-35页 |
| 1.6 黄瓜果实果瘤及光泽性状的认识 | 第35-39页 |
| 1.6.1 黄瓜果瘤性状及研究进展 | 第35-38页 |
| 1.6.2 黄瓜果实光泽性状的研究进展 | 第38-39页 |
| 1.7 本研究的目的意义及技术路线 | 第39-43页 |
| 1.7.1 本研究的目的意义 | 第39-41页 |
| 1.7.2 本研究的技术路线 | 第41-43页 |
| 第二章 黄瓜果瘤基因 Tu 的遗传分析及精细定位 | 第43-60页 |
| 2.1 引言 | 第43页 |
| 2.2 材料与方法 | 第43-49页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第43-45页 |
| 2.2.2 黄瓜材料的种植及性状调查 | 第45页 |
| 2.2.3 基因组 DNA 提取 | 第45-46页 |
| 2.2.4 分子标记的开发 | 第46-48页 |
| 2.2.5 Tu 基因的精细定位 | 第48页 |
| 2.2.6 候选序列分析 | 第48-49页 |
| 2.2.7 多个黄瓜品种验证候选 Tu 基因 | 第49页 |
| 2.3 结果与分析 | 第49-58页 |
| 2.3.1 亲本S52和S06果实表型的形态学观察 | 第49-50页 |
| 2.3.2 黄瓜果瘤性状的遗传分析 | 第50-51页 |
| 2.3.3 初步定位候选序列拼接 | 第51页 |
| 2.3.4 多态性分子标记开发 | 第51-53页 |
| 2.3.5 Tu 基因的定位 | 第53-55页 |
| 2.3.6 Tu 基因的鉴定 | 第55-56页 |
| 2.3.7 显性标记 TY-1 和 TY-2 在 94 个黄瓜品种中的检测 | 第56-58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 黄瓜果瘤基因 Tu 遗传转化验证与功能分析 | 第60-99页 |
| 3.1 引言 | 第60页 |
| 3.2 材料和方法 | 第60-79页 |
| 3.2.1 材料 | 第60-61页 |
| 3.2.2 Tu 基因的生物信息学分析 | 第61页 |
| 3.2.3 黄瓜 S52 果实总 RNA 的提取及 cDNA 第一链合成 | 第61-62页 |
| 3.2.4 Tu 基因全长的获得 | 第62-63页 |
| 3.2.5 双元表达载体构建及电击导入农杆菌 GV3101 | 第63-66页 |
| 3.2.6 黄瓜遗传转化过程 | 第66-67页 |
| 3.2.7 阳性转化苗检测 | 第67-70页 |
| 3.2.8 亚细胞核定位 | 第70-71页 |
| 3.2.9 半定量RT-PCR和实时定量RT-PCR分析 | 第71页 |
| 3.2.10 mRNA原位杂交 | 第71-73页 |
| 3.2.11 CTK 含量测定 | 第73-75页 |
| 3.2.12 数字基因表达谱(DGE)分析 | 第75-76页 |
| 3.2.13 无毛基因 gl 与 Tu 基因的关系分析 | 第76-77页 |
| 3.2.14 甜瓜 Tu 同源基因的表达分析 | 第77页 |
| 3.2.15 Tu 基因的同源性比对与进化树分析 | 第77-78页 |
| 3.2.16 本章使用的引物 | 第78-79页 |
| 3.3 结果与分析 | 第79-95页 |
| 3.3.1 黄瓜遗传转化结果 | 第79-81页 |
| 3.3.2 Tu 基因编码 C_2H_2型锌指蛋白 | 第81-83页 |
| 3.3.3 Tu 主要定位于细胞核中 | 第83页 |
| 3.3.4 Tu 基因在果刺中特异性表达 | 第83-84页 |
| 3.3.5 Tu 基因的 mRNA 原位杂交分析 | 第84-85页 |
| 3.3.6 果瘤性状的形成与 CTK 含量有关 | 第85-86页 |
| 3.3.7 Tu 基因可能参与 CTK 合成 | 第86-89页 |
| 3.3.8 无毛基因 gl 对 Tu 基因存在隐性上位作用 | 第89-92页 |
| 3.3.9 Tu 同源基因在甜瓜果实中不能表达 | 第92-94页 |
| 3.3.10 Tu 基因进化分析 | 第94-95页 |
| 3.4 讨论 | 第95-99页 |
| 第四章 黄瓜无光泽性状的遗传分析及精细定位 | 第99-113页 |
| 4.1 引言 | 第99页 |
| 4.2 材料与方法 | 第99-102页 |
| 4.2.1 黄瓜材料 | 第99-100页 |
| 4.2.2 黄瓜材料的种植及性状调查 | 第100页 |
| 4.2.3 基因组 DNA 提取 | 第100页 |
| 4.2.4 有光泽和无光泽基因池建立 | 第100页 |
| 4.2.5 分子标记的选择和标记开发 | 第100-101页 |
| 4.2.6 分子标记扩增程序 | 第101页 |
| 4.2.7 与D/d基因连锁标记的筛选 | 第101页 |
| 4.2.8 标记命名与数据采集 | 第101页 |
| 4.2.9 连锁分析 | 第101-102页 |
| 4.2.10 D/d候选基因的分析 | 第102页 |
| 4.3 结果与分析 | 第102-111页 |
| 4.3.1 有光泽/无光泽表型的形态学观察 | 第102-103页 |
| 4.3.2 黄瓜无光泽性状的遗传分析 | 第103-105页 |
| 4.3.3 D/d基因的初步定位 | 第105-106页 |
| 4.3.4 SSR标记的开发 | 第106页 |
| 4.3.5 D/d基因的精细定位 | 第106-108页 |
| 4.3.6 共显性标记 SSR37 和 SSR112 在 72 个黄瓜品种的检测 | 第108-109页 |
| 4.3.7 D/d 候选基因分析 | 第109-111页 |
| 4.4 讨论 | 第111-113页 |
| 第五章 总结和展望 | 第113-116页 |
| 5.1 全文结论 | 第113-114页 |
| 5.2 创新点 | 第114-115页 |
| 5.3 后续工作展望 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-126页 |
| 附录 | 第126-137页 |
| 致谢 | 第137-139页 |
| 攻读学位期间发表的论文与专利 | 第139页 |
