| 英文缩略词表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 前言综述 | 第17-32页 |
| 1.1 前言 | 第17-18页 |
| 1.2 盐胁迫对植物的伤害 | 第18页 |
| 1.3 植物应对盐胁迫的策略 | 第18-21页 |
| 1.3.1 渗透调节物质的合成与积累 | 第19页 |
| 1.3.2 离子转运与离子平衡 | 第19-20页 |
| 1.3.3 清除自由基类的相关酶 | 第20页 |
| 1.3.4 转录因子调节 | 第20页 |
| 1.3.5 植物激素调节 | 第20-21页 |
| 1.3.6 信号转导 | 第21页 |
| 1.4 植物盐胁迫响应基因的筛选与鉴定 | 第21-25页 |
| 1.4.1 cDNA-AFLP | 第21-22页 |
| 1.4.2 cDNA 微阵列 | 第22-23页 |
| 1.4.3 抑制差减杂交技术 | 第23-24页 |
| 1.4.4 转录组测序 | 第24-25页 |
| 1.5 植物 NAC 研究 | 第25-30页 |
| 1.5.1 NAC 基因的结构 | 第25-28页 |
| 1.5.2 NAC 基因家族在植物中的分析 | 第28-29页 |
| 1.5.3 NAC 的功能研究进展 | 第29-30页 |
| 1.6 目的意义及研究内容 | 第30-31页 |
| 1.7 实验技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 甜瓜盐胁迫下差减文库的构建 | 第32-44页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 材料和方法 | 第32-40页 |
| 2.2.1 材料种植与实验处理 | 第32-33页 |
| 2.2.2 总 RNA 提取及 mRNA 的分离 | 第33-34页 |
| 2.2.3 mRNA 的纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.4 第一链 cDNA 的合成 | 第35页 |
| 2.2.5 第二链 cDNA 合成 | 第35-36页 |
| 2.2.6 RsaI 酶切 | 第36页 |
| 2.2.7 接头的连接 | 第36-37页 |
| 2.2.8 第一次杂交 | 第37页 |
| 2.2.9 第二次杂交 | 第37-38页 |
| 2.2.10 二次 PCR 扩增 | 第38-39页 |
| 2.2.11 PCR 产物的 TA 克隆 | 第39页 |
| 2.2.12 差减文库的构建与插入片段检测 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-42页 |
| 2.3.1 RNA 质量检测及双链 cDNA 酶切效果 | 第40-41页 |
| 2.3.2 差减文库构建 | 第41-42页 |
| 2.3.3 插入片段检测 | 第42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 差减文库 EST 的生物信息学与盐胁迫下的表达分析 | 第44-60页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2. 生物信息学分析 | 第44页 |
| 3.3 甜瓜盐胁迫下相关 EST 的表达模式分析 | 第44-48页 |
| 3.3.1 RNA 抽提 | 第44-46页 |
| 3.3.2 cDNA 的合成 | 第46-48页 |
| 3.4 不同品种盐响应基因功能分类与比较 | 第48-49页 |
| 3.5 结果与分析 | 第49-56页 |
| 3.5.0 ESTs 的拼接与组装 | 第49页 |
| 3.5.1 Real time PCR 鉴定甜瓜盐胁迫下 EST 的表达 | 第49-54页 |
| 3.5.2 两个文库 EST 的比对与分析 | 第54-56页 |
| 3.6 讨论 | 第56-60页 |
| 第四章 甜瓜转录因子 NAC 基因家族的综合分析 | 第60-87页 |
| 4.1 引言 | 第60-61页 |
| 4.2 材料与方法 | 第61-68页 |
| 4.2.1 NAC 序列数据库检索 | 第61页 |
| 4.2.2 甜瓜 NAC 基因序列比对进化分析、染色体定位与跨膜预测 | 第61-62页 |
| 4.2.3 甜瓜盐胁迫下 cDNA 文库、转录组和拟南芥盐响应 NAC 预测甜瓜盐响应 NAC基因 | 第62页 |
| 4.2.4 甜瓜盐胁迫下 9 个 NAC 基因表达分析 | 第62-63页 |
| 4.2.5 CmNAC34 和 CmNAC14 在酵母中的表达 | 第63-68页 |
| 4.3 结果 | 第68-85页 |
| 4.3.1 甜瓜 NAC 基因的鉴定以及染色体的分布 | 第68-73页 |
| 4.3.2 CmNAC 蛋白结构分析与系统进化树构建 | 第73-77页 |
| 4.3.3 预测甜瓜盐胁迫响应的 NAC 基因 | 第77-79页 |
| 4.3.4 甜瓜盐胁迫下 9 个甜瓜 CmNAC 基因的表达分析 | 第79-80页 |
| 4.3.5 CmNAC34 和 CmNAC14 增强酵母对盐分的敏感性 | 第80-85页 |
| 4.4 讨论 | 第85-87页 |
| 4.4.1 甜瓜 NAC 基因的鉴定与结构分析 | 第85页 |
| 4.4.2 依据进化关系、转录组测序数据库、cDNA 文库预测甜瓜盐响应的 NAC 基因 | 第85-86页 |
| 4.4.3 通过表达模式鉴定 CmNAC 基因是否与盐响应有关 | 第86页 |
| 4.4.4 甜瓜 CmNAC34 和 CmNAC14 基因增加酵母对盐分胁迫的敏感 | 第86-87页 |
| 第五章 甜瓜 CmNAC14 的克隆、表达模式及亚细胞定位分析 | 第87-104页 |
| 5.1 前言 | 第87页 |
| 5.2 材料与方法 | 第87-95页 |
| 5.2.1 植物材料 | 第87-88页 |
| 5.2.2 CmNAC14 的 RACE 克隆 | 第88-94页 |
| 5.2.3 QRT-PCR 分析 CmNAC14 的组织表达分析及逆境胁迫下的表达 | 第94-95页 |
| 5.2.4 甜瓜 CmNAC14 基因的亚细胞定位 | 第95页 |
| 5.3 结果与分析 | 第95-102页 |
| 5.3.1 基因克隆 CmNAC14 全长 | 第95-97页 |
| 5.3.2 CmNAC14 的基因生物信息学分析 | 第97-99页 |
| 5.3.3 CmNAC14 的组织表达性差异 | 第99-100页 |
| 5.3.4 不同逆境对 CmNAC14 表达的影响 | 第100-101页 |
| 5.3.5 CmNAC14 在烟草表皮上的定位 | 第101-102页 |
| 5.4 讨论 | 第102-104页 |
| 第六章 甜瓜 NAC 在拟南芥中的超量表达和功能分析 | 第104-120页 |
| 6.1 引言 | 第104页 |
| 6.2 材料与方法 | 第104-112页 |
| 6.2.1 植物材料 | 第104页 |
| 6.2.2 植物表达载体构建 | 第104-107页 |
| 6.2.3 拟南芥转化 | 第107-109页 |
| 6.2.4 转基因拟南芥植株的鉴定 | 第109-110页 |
| 6.2.5 转基因拟南芥植株 CmNAC14 基因的表达 | 第110页 |
| 6.2.6 转基因拟南芥逆境胁迫测评 | 第110-111页 |
| 6.2.7 CmNAC14 基因在耐盐性不同的甜瓜品种中的表达差异 | 第111-112页 |
| 6.3 结果与分析 | 第112-117页 |
| 6.3.1 CmNAC14-PHB 表达载体的鉴定 | 第112-113页 |
| 6.3.2 转 CmNAC14 基因拟南芥的基因检测与表达检测 | 第113-114页 |
| 6.3.3 转 CmNAC14 基因对拟南芥在逆境下表型、生化指标及基因表达的影响 | 第114-117页 |
| 6.3.4 盐胁迫下 CmNAC14 基因在不同耐盐性甜瓜品种表达分析 | 第117页 |
| 6.4 讨论 | 第117-120页 |
| 第七章 总结与展望 | 第120-123页 |
| 7.1 研究总结 | 第120-121页 |
| 7.2 创新之处 | 第121页 |
| 7.3 展望 | 第121-123页 |
| 攻读博士学位期间完成的科研论文与专利 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
