| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-31页 |
| 1.1 RHAMM 蛋白研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 RHAMM 的生理功能 | 第12页 |
| 1.1.2 RHAMM 和肿瘤的关系 | 第12-13页 |
| 1.1.3 细胞外和细胞内 RHAMM 的致癌功能 | 第13-15页 |
| 1.1.4 RHAMM 表达的调控 | 第15页 |
| 1.2 甲羟戊酸途径 | 第15-21页 |
| 1.2.1 甲羟戊酸途径和肿瘤的关系 | 第17-18页 |
| 1.2.2 他汀类药物和甲羟戊酸途径 | 第18-19页 |
| 1.2.3 他汀类药物和肿瘤 | 第19-21页 |
| 1.3 Hippo 信号通路 | 第21-29页 |
| 1.3.1 调节 Hippo 信号通路 | 第23-26页 |
| 1.3.2 Hippo 信号通路和肿瘤 | 第26-29页 |
| 1.4 研究目的和内容 | 第29-31页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第29页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第29-31页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第31-43页 |
| 2.1 主要材料和试剂 | 第31-33页 |
| 2.2 主要仪器 | 第33页 |
| 2.3 细胞培养 | 第33-34页 |
| 2.4 载体构建 | 第34-36页 |
| 2.4.1 过表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.4.2 荧光素酶报告基因载体的构建 | 第35页 |
| 2.4.3 shRNA 慢病毒载体的构建 | 第35-36页 |
| 2.5 慢病毒包装及细胞感染 | 第36-37页 |
| 2.5.1 过表达慢病毒的包装 | 第36-37页 |
| 2.5.2 shRNA 慢病毒的包装 | 第37页 |
| 2.5.3 慢病毒感染细胞 | 第37页 |
| 2.6 细胞转染 | 第37-38页 |
| 2.7 药物处理 | 第38页 |
| 2.8 细胞迁移和浸润分析 | 第38页 |
| 2.9 实时反转录 PCR 分析 | 第38-39页 |
| 2.10 细胞核质分离 | 第39页 |
| 2.11 细胞膜质分离 | 第39-40页 |
| 2.12 免疫印迹分析 | 第40-41页 |
| 2.12.1 样品制备 | 第40页 |
| 2.12.2 SDS-PAGE 电泳 | 第40页 |
| 2.12.3 转膜 | 第40页 |
| 2.12.4 抗体孵育与曝光 | 第40页 |
| 2.12.5 定量分析 | 第40-41页 |
| 2.13 免疫荧光染色分析 | 第41页 |
| 2.14 泛素化分析 | 第41页 |
| 2.15 荧光素酶报告基因分析 | 第41页 |
| 2.16 染色质免疫沉淀分析 | 第41-42页 |
| 2.17 乳腺癌动物模型研究 | 第42页 |
| 2.18 乳腺癌组织的免疫组织化学分析 | 第42页 |
| 2.19 数据分析 | 第42-43页 |
| 第3章 甲羟戊酸途径通过调节 RHAMM 表达来调控乳腺癌细胞的迁移和浸润 | 第43-49页 |
| 3.1 本章引论 | 第43页 |
| 3.2 甲羟戊酸途径对乳腺癌细胞迁移和浸润的影响 | 第43-44页 |
| 3.3 RHAMM 对乳腺癌细胞迁移和浸润的影响 | 第44-45页 |
| 3.4 甲羟戊酸途径对 RHAMM 表达的影响 | 第45-47页 |
| 3.5 甲羟戊酸途径对 RHAMM 介导的 ERK 的活性的影响 | 第47-48页 |
| 3.6 小结 | 第48-49页 |
| 第4章 RHAMM 是 Hippo 信号通路 YAP-TEAD 的直接靶基因 | 第49-59页 |
| 4.1 本章引论 | 第49页 |
| 4.2 RHAMM 启动子区域分析 | 第49-50页 |
| 4.3 YAP 和 TEAD 对 RHAMM 启动子结合能力的分析 | 第50页 |
| 4.4 YAP 和 TEAD 结合 RHAMM 启动子控制 RHAMM 转录 | 第50-53页 |
| 4.5 YAP 和 TEAD 调控 RHAMM 表达 | 第53-55页 |
| 4.6 YAP 和 TEAD 对 ERK 磷酸化的影响 | 第55页 |
| 4.7 YAP 和 TEAD 对乳腺癌细胞迁移和浸润的影响 | 第55-57页 |
| 4.8 人乳腺癌中 YAP 和 RHAMM 的表达情况 | 第57页 |
| 4.9 小结 | 第57-59页 |
| 第5章 甲羟戊酸途径通过调节 YAP 的活性来控制 RHAMM 转录 | 第59-69页 |
| 5.1 本章引论 | 第59页 |
| 5.2 甲羟戊酸途径调节 YAP 的活性 | 第59-66页 |
| 5.2.1 甲羟戊酸途径调节 MDA-MB-231 细胞 YAP 的磷酸化 | 第59-61页 |
| 5.2.2 甲羟戊酸途径调节 4T1 细胞 YAP 的磷酸化 | 第61页 |
| 5.2.3 甲羟戊酸途径调节 YAP 在 MDA-MB-231 细胞的定位 | 第61-63页 |
| 5.2.4 甲羟戊酸途径调节 YAP 在 4T1 细胞的定位 | 第63-65页 |
| 5.2.5 甲羟戊酸途径调节 YAP 蛋白的稳定性 | 第65-66页 |
| 5.3 甲羟戊酸途径调控 YAP 和 RHAMM 启动子的结合 | 第66页 |
| 5.4 甲羟戊酸途径在体内调节 RHAMM 表达、YAP 和 ERK 活性 | 第66-67页 |
| 5.5 小结 | 第67-69页 |
| 第6章 牻牛儿牻牛儿化参与调节 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化 | 第69-79页 |
| 6.1 本章引论 | 第69页 |
| 6.2 法尼基化对 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化的影响 | 第69-73页 |
| 6.2.1 法尼基化抑制剂对 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化的影响 | 第69-70页 |
| 6.2.2 法尼基化抑制剂对细胞内 YAP 定位的影响 | 第70页 |
| 6.2.3 FPP 对 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化的影响 | 第70-72页 |
| 6.2.4 FPP 对细胞内 YAP 定位的影响 | 第72-73页 |
| 6.3 牻牛儿牻牛儿化对 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化的影响 | 第73-77页 |
| 6.3.1 牻牛儿话牻牛儿化抑制剂对 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK活化的影响 | 第73-74页 |
| 6.3.2 牻牛儿牻牛儿化抑制剂对 YAP 细胞内定位的影响 | 第74-75页 |
| 6.3.3 GGPP 对 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化的影响 | 第75-76页 |
| 6.3.4 GGPP 对细胞内 YAP 定位的影响 | 第76-77页 |
| 6.4 小结 | 第77-79页 |
| 第7章 甲羟戊酸途径通过 RhoA 和微丝骨架调节 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化 | 第79-85页 |
| 7.1 本章引论 | 第79页 |
| 7.2 RhoA 对甲羟戊酸途径介导的 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化的影响 | 第79-81页 |
| 7.2.1 甲羟戊酸途径对 RhoA 活性的影响 | 第79-80页 |
| 7.2.2 RhoA 参与甲羟戊酸途径介导的 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK活化 | 第80-81页 |
| 7.3 RhoA 抑制剂和微丝骨架抑制剂对甲羟戊酸途径介导的 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化的影响 | 第81-84页 |
| 7.3.1 甲羟戊酸途径对微丝骨架的影响 | 第81-82页 |
| 7.3.2 RhoA 抑制剂和微丝骨架抑制剂调节 YAP 活性、RHAMM 转录以及 ERK 活化 | 第82-84页 |
| 7.4 小结 | 第84-85页 |
| 第8章 甲羟戊酸途径调节 YAP 介导的 RHAMM 转录和 ERK 活化不依赖 MST 和LATS 活性 | 第85-89页 |
| 8.1 本章引论 | 第85页 |
| 8.2 甲羟戊酸途径对 MST 和 LATS 活性的影响 | 第85-86页 |
| 8.3 敲低 LATS 对辛伐他汀诱导的抑制 RHAMM 表达、YAP 和 ERK 活性的影响 | 第86-88页 |
| 8.4 小结 | 第88-89页 |
| 第9章 结论和讨论 | 第89-95页 |
| 9.1 甲羟戊酸途径通过调节 RHAMM 的转录来调控乳腺癌细胞的迁移和浸润 | 第89-90页 |
| 9.2 甲羟戊酸途径通过调节 YAP 的活性来调控 RHAMM 的转录 | 第90-92页 |
| 9.3 甲羟戊酸途径和 Hippo 信号通路之间的对话 | 第92-93页 |
| 9.4 总结 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-109页 |
| 致谢 | 第109-111页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第111页 |
