| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略词表 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 技术路线 | 第17-18页 |
| 第一章 pET43.1a/SIEA26-28 kDa-SjscFv原核质粒的构建及目的蛋白的表达、鉴定及纯化 | 第18-39页 |
| 1.1 材料 | 第18-20页 |
| 1.1.1 质粒、菌株、血清 | 第18-19页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第20页 |
| 1.1.4 引物 | 第20页 |
| 1.2 方法 | 第20-28页 |
| 1.2.1 pET43.1a/scFv重组质粒的构建 | 第20-23页 |
| 1.2.2 阳性克隆的鉴定 | 第23-24页 |
| 1.2.3 SjscFv基因的生物信息学分析 | 第24页 |
| 1.2.4 SjscFv基因的原核表达 | 第24-27页 |
| 1.2.5 重组蛋白的鉴定及纯化 | 第27-28页 |
| 1.2.6 Ni~(2+)亲和柱层析纯化 | 第28页 |
| 1.2.7 BCA法测定纯化后蛋白SIEA26-28 kDa-SjscFv浓度 | 第28页 |
| 1.3 结果 | 第28-36页 |
| 1.3.1 SjscFv基因的克隆 | 第28-30页 |
| 1.3.2 SjscFv基因的生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 1.3.3 SjscFv基因的原核表达 | 第31-34页 |
| 1.3.4 重组蛋白的鉴定及纯化 | 第34-36页 |
| 1.3.5 SIEA26-28 kDa-SjscFv蛋白浓度的测定值 | 第36页 |
| 1.4 讨论 | 第36-39页 |
| 1.4.1 单链抗体的选择 | 第36-37页 |
| 1.4.2 目的蛋白表达载体和表达系统的选择 | 第37-39页 |
| 第二章 日本血吸虫感染兔血清中循环抗原的筛选 | 第39-53页 |
| 2.1 材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 试剂 | 第39页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第39页 |
| 2.1.4. 部分溶液的配制 | 第39-40页 |
| 2.2 方法 | 第40-43页 |
| 2.2.1 SjscFv对日本血吸虫感染兔血清中循环抗原的识别 | 第40-41页 |
| 2.2.2 日本血吸虫感染兔血清循环抗原相关组分的电洗脱纯化 | 第41-42页 |
| 2.2.3 循环抗原相关组分免疫兔血清的制备及其效价的测定 | 第42页 |
| 2.2.4 Western blot分析循环抗原相关组分在成虫和虫卵的表达 | 第42-43页 |
| 2.2.5 循环抗原组分在日本血吸虫成虫和虫卵的免疫组化定位 | 第43页 |
| 2.3 结果 | 第43-50页 |
| 2.3.1 日本血吸虫感染兔血清中循环抗原的识别 | 第43-46页 |
| 2.3.2 感染兔血清循环抗原相关组分的电洗脱纯化 | 第46页 |
| 2.3.3 免疫兔血清效价测定 | 第46-47页 |
| 2.3.4 Western blot分析循环抗原相关组分在成虫和虫卵的表达 | 第47-49页 |
| 2.3.5 循环抗原相关组分在日本血吸虫成虫和虫卵的免疫组化定位 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 日本血吸虫循环抗原相关组分的质谱和生物信息学分析 | 第53-67页 |
| 3.1 材料 | 第53页 |
| 3.1.1 试剂 | 第53页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第53页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第53页 |
| 3.2 方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 10%SDS-PAGE电泳分离与染色鉴定 | 第53-54页 |
| 3.2.2 循环抗原相关组分的质谱分析 | 第54-55页 |
| 3.2.3 循环抗原相关组分编码基因的生物信息学分析 | 第55页 |
| 3.3 结果 | 第55-64页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE蛋白质条带的质谱鉴定结果 | 第55-57页 |
| 3.3.2 SDS-PAGE带LC-MS/MS肽质量指纹图分析 | 第57-60页 |
| 3.3.3 生物信息学分析循环抗原相关组分编码蛋白结果 | 第60-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 综述 | 第72-82页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
