| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 鱼类的免疫系统概述 | 第11-20页 |
| 1.1.1 免疫器官和组织 | 第11-15页 |
| 1.1.2 免疫细胞 | 第15-17页 |
| 1.1.3 体液免疫因子 | 第17-20页 |
| 1.2 鱼类 T 细胞研究概况 | 第20-24页 |
| 1.2.1 鱼类 T 细胞的发生 | 第20-21页 |
| 1.2.2 鱼类 T 细胞表面标志 | 第21-24页 |
| 2 牙鲆 CD3 的克隆及原核表达 | 第24-35页 |
| 2.1 材料与试剂仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 RNA 提取及反转录 | 第25-26页 |
| 2.2.2 表达片段的扩增、纯化及双酶切 | 第26页 |
| 2.2.3 pET-30a 质粒的抽提及双酶切 | 第26-27页 |
| 2.2.4 连接、转化与阳性菌鉴定 | 第27页 |
| 2.2.5 诱导表达及检测 | 第27-28页 |
| 2.2.6 蛋白层析纯化及质谱鉴定 | 第28-30页 |
| 2.3 结果 | 第30-33页 |
| 2.3.1 牙鲆 CD3 基因的克隆 | 第30页 |
| 2.3.2 牙鲆 CD3 重组蛋白的表达与纯化 | 第30-31页 |
| 2.3.3 重组蛋白的鉴定 | 第31-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 3 牙鲆 CD3 多克隆抗体的制备及分析 | 第35-44页 |
| 3.1 材料与试剂仪器 | 第35页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 牙鲆 CD3 多克隆抗体的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.2 多克隆抗体效价的测定 | 第36-37页 |
| 3.2.3 牙鲆白细胞的采集 | 第37页 |
| 3.2.4 免疫共沉淀分析 | 第37-38页 |
| 3.2.5 双荧光染色 | 第38页 |
| 3.3 结果 | 第38-42页 |
| 3.3.1 牙鲆 CD3 多克隆抗体的效价 | 第38-39页 |
| 3.3.2 CD3 多抗与牙鲆白细胞的免疫共沉淀 | 第39-41页 |
| 3.3.3 双荧光染色结果 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 4 牙鲆 CD3 多克隆抗体在 T 淋巴细胞鉴定中的应用 | 第44-56页 |
| 4.1 材料与试剂仪器 | 第44页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第44页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-49页 |
| 4.2.1 牙鲆白细胞的采集 | 第44-45页 |
| 4.2.2 免疫组织化学染色 | 第45-48页 |
| 4.2.3 注射灭活爱德华氏菌后牙鲆组织中 T 细胞数量变化 | 第48-49页 |
| 4.3 结果 | 第49-53页 |
| 4.3.1 牙鲆外周血白细胞的免疫组化结果 | 第49页 |
| 4.3.2 牙鲆各组织的免疫组化结果 | 第49-52页 |
| 4.3.3 灭活爱德华氏菌免疫后牙鲆组织中 T 细胞数量变化 | 第52-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-56页 |
| 总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67页 |
| 学术论文 | 第67页 |
| 荣誉奖励 | 第67-68页 |
