摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
综述 | 第13-20页 |
第一章 甲基乙二醛细胞毒性研究进展 | 第13-17页 |
1.1 甲基乙二醛的来源及代谢 | 第13-14页 |
1.2 甲基乙二醛诱导的氧化应激 | 第14-15页 |
1.3 甲基乙二醛与蛋白质晚期糖基化终末产物 | 第15-16页 |
1.4 甲基乙二醛诱导的细胞凋亡 | 第16-17页 |
第二章 儿茶素类抗氧化和抗细胞凋亡的研究进展 | 第17-20页 |
2.1 儿茶素简介及其抗氧化作用 | 第17-18页 |
2.2 儿茶素的羰基捕获作用 | 第18-19页 |
2.3 儿茶素及其衍生物对蛋白酶活性的影响 | 第19-20页 |
实验研究 | 第20-41页 |
第三章 MGO 对 ECV304 细胞的毒性机制 | 第20-26页 |
3.1 试验材料 | 第20-21页 |
3.1.1 细胞株 | 第20页 |
3.1.2 主要仪器 | 第20页 |
3.1.3 主要试剂及配制 | 第20-21页 |
3.2 试验方法 | 第21-22页 |
3.2.1 ECV304 细胞培养 | 第21页 |
3.2.2 MTT 法测定 ECV304 细胞生长曲线及甲基乙二醛(MGO)的细胞毒性 | 第21页 |
3.2.3 DCFH-DA 荧光探针法测定细胞内氧化应激水平 | 第21页 |
3.2.4 FOX 法测定细胞外 H2O2的积累 | 第21-22页 |
3.2.5 罗丹明 123 荧光探针法检测线粒体损伤及线粒体形态 | 第22页 |
3.3 实验结果 | 第22-25页 |
3.3.1 ECV304 细胞生长曲线 | 第22页 |
3.3.2 MGO 的细胞毒性 | 第22-23页 |
3.3.3 MGO 诱导的细胞内外氧化应激 | 第23-24页 |
3.3.4 MGO 诱导的细胞线粒体损伤 | 第24-25页 |
3.4 讨论 | 第25页 |
3.5 小结 | 第25-26页 |
第四章 甲基乙二醛对 EA.hy926 细胞的毒性机制 | 第26-33页 |
4.1 试验材料 | 第26页 |
4.1.1 细胞株 | 第26页 |
4.1.2 主要仪器 | 第26页 |
4.1.3 主要试剂及配制 | 第26页 |
4.2 试验方法 | 第26-28页 |
4.2.1 EA.hy926 细胞株的培养 | 第26页 |
4.2.2 MTT 法检测细胞活力及台盼蓝法检测细胞死亡率 | 第26-27页 |
4.2.3 免疫荧光染色法检测 CEL 形成 | 第27页 |
4.2.4 谷胱甘肽耗竭模型构建 | 第27页 |
4.2.5 过氧化氢酶抑制模型构建 | 第27页 |
4.2.6 DCFH-DA 荧光探针法及 FOX 法测定细胞氧化应激 | 第27页 |
4.2.7 罗丹明 123 荧光探针法检测线粒体损伤 | 第27-28页 |
4.3 实验结果 | 第28-31页 |
4.3.1 MGO 对 EA.hy926 的细胞毒性 | 第28页 |
4.3.2 MGO 对 CEL 含量的影响 | 第28-29页 |
4.3.3 谷胱甘肽耗竭模型对氧化应激及 MGO 毒性的影响 | 第29页 |
4.3.4 过氧化氢酶抑制模型对氧化应激及 MGO 毒性的影响 | 第29-30页 |
4.3.5 MGO 诱导的细胞内外氧化应激水平 | 第30页 |
4.3.6 MGO 孵育细胞条件下线粒体膜电位的变化 | 第30-31页 |
4.3.7 MGO 孵育条件下的线粒体形态 | 第31页 |
4.4 讨论 | 第31-32页 |
4.5 小结 | 第32-33页 |
第五章 儿茶素对甲基乙二醛毒性的影响 | 第33-41页 |
5.1 试验材料 | 第33页 |
5.1.1 细胞株 | 第33页 |
5.1.2 主要仪器 | 第33页 |
5.1.3 主要试剂及配置 | 第33页 |
5.2 试验方法 | 第33-35页 |
5.2.1 MTT 及台盼蓝法检测儿茶素对细胞的保护作用 | 第33页 |
5.2.2 CEL 形成的检测 | 第33页 |
5.2.3 DNPH 法测定 Schiff base 水平 | 第33页 |
5.2.4 细胞内外氧化应激水平的检测 | 第33-34页 |
5.2.5 线粒体膜电位及线粒体形态的检测 | 第34页 |
5.2.6 Caspase-3 活性检测 | 第34页 |
5.2.7 细胞凋亡检测 | 第34-35页 |
5.3 实验结果 | 第35-39页 |
5.3.1 儿茶素对细胞的保护作用 | 第35-36页 |
5.3.2 MGO 诱导的 Schiff base 水平 | 第36页 |
5.3.3 儿茶素干预对细胞内外氧化应激水平的影响 | 第36-37页 |
5.3.4 儿茶素干预对线粒体膜电位的影响 | 第37页 |
5.3.5 儿茶素干预对线粒体形态的影响 | 第37-38页 |
5.3.6 儿茶素干预对 Caspase-3 激活的影响 | 第38页 |
5.3.7 儿茶素干预对细胞凋亡的影响 | 第38-39页 |
5.4 讨论 | 第39-40页 |
5.5 小结 | 第40-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-49页 |
作者简介及硕士期间发表学术论文 | 第49页 |