摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1. 发育过程中的多能干细胞 | 第13-15页 |
1.1 胚胎干细胞 | 第13-14页 |
1.2 外胚层干细胞 | 第14页 |
1.3 胚胎生殖细胞和成体生殖系干细胞 | 第14-15页 |
2. 多能干细胞的分类 | 第15-16页 |
2.1 两种基本的多能性状态 | 第15-16页 |
2.2 两种多能性状态的维持和转化 | 第16页 |
3. 人胚胎干细胞 | 第16-19页 |
3.1 人胚胎干细胞的多能性状态 | 第16-17页 |
3.2 人胚胎干细胞在研究中遇到的问题 | 第17页 |
3.3 核移植技术 | 第17-18页 |
3.4 诱导性多能干细胞(iPS 细胞) | 第18-19页 |
4. 胚胎干细胞与 iPS 细胞的异同 | 第19-22页 |
4.1 iPS 细胞与胚胎干细胞的多能性基因表达相近 | 第19-20页 |
4.2 iPS 细胞与胚胎干细胞的功能相似 | 第20页 |
4.3 iPS 细胞与胚胎干细胞之间存在的差异 | 第20-22页 |
5. iPS 细胞的表观遗传学记忆 | 第22-25页 |
第二章 人角膜基质细胞的原代培养与鉴定 | 第25-32页 |
1. 材料用品 | 第25-26页 |
1.1 材料 | 第25-26页 |
1.2 主要仪器 | 第26页 |
1.3 药品与耗材 | 第26页 |
1.4 常用溶液 | 第26页 |
2. 实验方法 | 第26-27页 |
2.1 人角膜基质细胞的原代培养 | 第26页 |
2.2 人角膜基质细胞的传代培养 | 第26-27页 |
2.3 人角膜基质细胞核型分析 | 第27页 |
2.4 人角膜基质细胞免疫化学检测 | 第27页 |
3 实验结果 | 第27-29页 |
3.1 人角膜基质细胞的原代培养 | 第27-28页 |
3.2 人角膜基质细胞的传代培养 | 第28页 |
3.3 人角膜基质细胞染色体核型分析 | 第28页 |
3.4 人角膜基质细胞特征蛋白的免疫化学检测 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-32页 |
第三章 从人角膜基质细胞到诱导性多能干细胞 | 第32-44页 |
1 材料用品 | 第32-33页 |
1.1 材料 | 第32页 |
1.2 药品与耗材 | 第32-33页 |
1.3 常用溶液配方 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-35页 |
2.1 质粒的转化及提取 | 第33-34页 |
2.2 慢病毒的产生和滴度测定 | 第34页 |
2.3 慢病毒最佳 MOI 测定 | 第34页 |
2.4 iPS 细胞的诱导 | 第34-35页 |
3 实验结果 | 第35-40页 |
3.1 质粒的提取及酶切鉴定 | 第35-36页 |
3.2 用 293T 细胞包装慢病毒 | 第36-37页 |
3.3 用 293T 细胞测量病毒滴度 | 第37-38页 |
3.4 确定病毒感染人角膜基质细胞的最佳 MOI | 第38-39页 |
3.5 人 iPS 细胞的诱导 | 第39-40页 |
3.6 人 iPS 细胞诱导效率测定 | 第40页 |
4 讨论 | 第40-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
致谢(一) | 第49-50页 |
致谢(二) | 第50-51页 |
附件 | 第51-52页 |