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基于慢病毒载体和转录因子的人角膜基质细胞重编程研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第12-25页
    1. 发育过程中的多能干细胞第13-15页
        1.1 胚胎干细胞第13-14页
        1.2 外胚层干细胞第14页
        1.3 胚胎生殖细胞和成体生殖系干细胞第14-15页
    2. 多能干细胞的分类第15-16页
        2.1 两种基本的多能性状态第15-16页
        2.2 两种多能性状态的维持和转化第16页
    3. 人胚胎干细胞第16-19页
        3.1 人胚胎干细胞的多能性状态第16-17页
        3.2 人胚胎干细胞在研究中遇到的问题第17页
        3.3 核移植技术第17-18页
        3.4 诱导性多能干细胞(iPS 细胞)第18-19页
    4. 胚胎干细胞与 iPS 细胞的异同第19-22页
        4.1 iPS 细胞与胚胎干细胞的多能性基因表达相近第19-20页
        4.2 iPS 细胞与胚胎干细胞的功能相似第20页
        4.3 iPS 细胞与胚胎干细胞之间存在的差异第20-22页
    5. iPS 细胞的表观遗传学记忆第22-25页
第二章 人角膜基质细胞的原代培养与鉴定第25-32页
    1. 材料用品第25-26页
        1.1 材料第25-26页
        1.2 主要仪器第26页
        1.3 药品与耗材第26页
        1.4 常用溶液第26页
    2. 实验方法第26-27页
        2.1 人角膜基质细胞的原代培养第26页
        2.2 人角膜基质细胞的传代培养第26-27页
        2.3 人角膜基质细胞核型分析第27页
        2.4 人角膜基质细胞免疫化学检测第27页
    3 实验结果第27-29页
        3.1 人角膜基质细胞的原代培养第27-28页
        3.2 人角膜基质细胞的传代培养第28页
        3.3 人角膜基质细胞染色体核型分析第28页
        3.4 人角膜基质细胞特征蛋白的免疫化学检测第28-29页
    4 讨论第29-32页
第三章 从人角膜基质细胞到诱导性多能干细胞第32-44页
    1 材料用品第32-33页
        1.1 材料第32页
        1.2 药品与耗材第32-33页
        1.3 常用溶液配方第33页
    2 实验方法第33-35页
        2.1 质粒的转化及提取第33-34页
        2.2 慢病毒的产生和滴度测定第34页
        2.3 慢病毒最佳 MOI 测定第34页
        2.4 iPS 细胞的诱导第34-35页
    3 实验结果第35-40页
        3.1 质粒的提取及酶切鉴定第35-36页
        3.2 用 293T 细胞包装慢病毒第36-37页
        3.3 用 293T 细胞测量病毒滴度第37-38页
        3.4 确定病毒感染人角膜基质细胞的最佳 MOI第38-39页
        3.5 人 iPS 细胞的诱导第39-40页
        3.6 人 iPS 细胞诱导效率测定第40页
    4 讨论第40-44页
参考文献第44-49页
致谢(一)第49-50页
致谢(二)第50-51页
附件第51-52页

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