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棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)orf81基因功能研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第10-19页
    1.1 杆状病毒的分类第10-11页
    1.2 杆状病毒的生活周期第11页
    1.3 杆状病毒的基因组第11-13页
    1.4 杆状病毒的核心基因第13-17页
        1.4.1 复制相关基因第14-15页
        1.4.2 转录有关的基因第15-16页
        1.4.3 结构蛋白基因第16-17页
        1.4.4 辅助基因第17页
    1.5 杆状病毒的核心基因簇第17页
    1.6 本研究的目的及意义第17-19页
第二章 材料方法第19-26页
    2.1 材料第19-20页
        2.1.1 质粒、菌种、病毒和细胞第19页
        2.1.2 工具酶及试剂盒第19页
        2.1.3 其它试剂第19页
        2.1.4 常规试剂的配制第19页
        2.1.5 实验所用引物第19-20页
    2.2 方法第20-26页
        2.2.1 感受态细胞的制备和质粒 DNA 转化第20页
        2.2.2 小量抽提质粒 DNA第20-21页
        2.2.3 连接反应第21页
        2.2.4 蛋白免疫印迹分析第21页
        2.2.5 昆虫细胞的转染第21页
        2.2.6 HearNPV 基因组 DNA 的抽提第21页
        2.2.7 多克隆抗体的制备第21-22页
        2.2.8 HA81 多抗效价检测(ELISA 法)第22页
        2.2.9 电转化感受态细胞第22页
        2.2.10 RNA 提取以及转录实相分析第22-23页
        2.2.11 HA81 的亚细胞定位分析第23页
        2.2.12 敲除 ha81 的 HaBac△81bacmid 的构建第23页
        2.2.13 HaBacHZ8-PG, HaBacΔ81-PG 和 HaBacRep81-PG bamids 的构建第23-24页
        2.2.14 出芽型病毒生长曲线分析第24页
        2.2.15 定量 PCR 分析病毒 DNA 复制第24页
        2.2.16 重组病毒 bacmid 转染 HzAM1 细胞的透射电子显微镜观察第24-26页
第三章 结果与分析第26-36页
    3.1 ha81 的原核表达及多克隆抗体制备第26-28页
        3.1.1 ha81 表达载体的构建第26页
        3.1.2 pET-32a-ha81 在 BL21(DE3)中的表达第26-27页
        3.1.3 HA81 多克隆抗体的制备与效价检测第27-28页
    3.2 ha81 的转录和表达时相分析第28页
    3.3 HaBacHZ8-PG、HaBacΔ81-PG 和 HaBacRep81-PG bacmids 的构建第28-30页
    3.4 病毒生长曲线的分析第30-31页
    3.5 病毒 DNA 的复制分析第31-32页
    3.6 HA81 的亚细胞定位第32-33页
    3.7 透射电镜分析第33-34页
    3.8 ha81 对于早晚期基因及核心基因簇基因转录的影响第34-35页
    3.9 ha813' RACE 分析验证 ha81 同 odv-e25 的共转录现象第35-36页
第四章 结论与讨论第36-39页
    4.1 结论第36页
    4.2 讨论第36-39页
参考文献第39-43页
附录第43-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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