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Mll1干扰载体的构建及其对小鼠精子发生的影响

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第11-23页
    1.1 精原干细胞研究进展第11-14页
        1.1.1 精原干细胞生物学特征第11页
        1.1.2 精原干细胞分离纯化与体外培养第11-12页
        1.1.3 精原干细胞分子标记及应用第12页
        1.1.4 精原干细胞的移植第12页
        1.1.5 精原干细胞的自我更新与分化第12-14页
        1.1.6 精原干细胞的应用第14页
    1.2 组蛋白甲基化酶研究进展第14-22页
        1.2.1 组蛋白甲基化酶的生物学特性第14-16页
        1.2.2 组蛋白甲基化酶与细胞周期第16-17页
        1.2.3 组蛋白甲基化酶与疾病第17-18页
        1.2.4 组蛋白甲基化与染色质第18-20页
        1.2.5 组蛋白甲基化与精原干细胞第20-21页
        1.2.6 组蛋白甲基化酶 MLL1第21-22页
    1.3 本研究的目的及意义第22-23页
第二章 Mll1 对小鼠精子发生的影响第23-44页
    2.1 材料与方法第23-33页
        2.1.1 试验材料第23页
        2.1.2 试验试剂第23-24页
        2.1.3 试验仪器第24页
        2.1.4 慢病毒包装系统第24页
        2.1.5 RNA 提取第24-25页
        2.1.6 反转录 PCR第25页
        2.1.7 实时定量 PCR第25-26页
        2.1.8 慢病毒载体构建第26-31页
        2.1.9 慢病毒包装第31页
        2.1.10 慢病毒滴度测定第31-32页
        2.1.11 病毒转导 GC-1 spg第32页
        2.1.12 绘制细胞增殖曲线第32页
        2.1.13 慢病毒小鼠睾丸注射第32页
        2.1.14 小鼠睾丸包埋切片及 HE 染色、数据统计第32-33页
    2.2 结果第33-40页
        2.2.1 检测小鼠体内 Mll1 的表达第33-34页
        2.2.2 成功构建 Mll1 及 NC 的干扰载体第34-36页
        2.2.3 成功包装 Mll1 和 NC 慢病毒并测定其滴度第36-37页
        2.2.4 成功干扰 GC-1 spg 中 Mll1 的表达第37-38页
        2.2.5 细胞增殖检测第38-39页
        2.2.6 睾丸切片染色第39-40页
        2.2.7 功能基因检测第40页
    2.3 讨论第40-44页
        2.3.1 Mll1 的组织差异表达第40-41页
        2.3.2 shRNA 在基因干扰研究中的应用第41页
        2.3.3 shRNA 的设计原则第41-42页
        2.3.4 慢病毒包装系统第42页
        2.3.5 细胞增殖检测第42页
        2.3.6 睾丸注射技术第42-43页
        2.3.7 Mll1 与 SSCs 自我更新第43-44页
结论第44-45页
参考文献第45-52页
致谢第52-53页
作者简介第53页

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