摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩略语 | 第12-20页 |
第一部分 :药物载体的制备及载药 | 第20-38页 |
1 前言 | 第20-22页 |
2 材料和方法 | 第22-28页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 主要仪器 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 纳米羟基磷灰石的合成与表征 | 第23-24页 |
2.2.2 药物载体的制备及体外释放实验 | 第24-27页 |
2.2.3 纳米羟基磷灰石-PGE2-PLGA-MSs杂化在位凝胶(insitugel)的制备和表征 | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-34页 |
3.1 纳米羟基磷灰石的合成与表征 | 第28-29页 |
3.1.1 合成的纳米羟基磷灰石扫描电子显微镜照片(见图4) | 第28页 |
3.1.2 合成的纳米羟基磷灰石的X射线晶体衍射(XRD)的物相分析 | 第28-29页 |
3.1.3 纳米羟基磷灰石的粒径测定 | 第29页 |
3.2 药物载体的制备及体外释放实验 | 第29-31页 |
3.2.1 载前列腺素E2的PLGA微球(PGE2-PLGA-MSs)的扫描电镜形貌观察及理化性质 | 第29-30页 |
3.2.2 载前列腺素E2的PLGA微球(PGE2-PLGA-MSs)的体外药物释放度测定 | 第30-31页 |
3.3 纳米羟基磷灰石-PGE2-PLGA-MSs杂化在位凝胶(insitugel)的制备和表征 | 第31-34页 |
3.3.1 PluronicF127在位凝胶和纳米羟基磷灰石-PGE2-PLGA-MSs杂化在位凝胶的流变曲线 | 第31-32页 |
3.3.2 PluronicF127在位凝胶和纳米羟基磷灰石-PGE2-PLGA-MSs杂化在位凝胶的相角和角频率(rad﹒s-1)之间的函数关系 | 第32-33页 |
3.3.3 Pluronic F127 在位凝胶和纳米羟基磷灰石-PGE2-PLGA-MSs 杂化在位凝胶的复数黏度和角频率(rad.s-1)之间的函数关系 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
5 结论 | 第37-38页 |
第二部分 :缓释PGE2对成骨样细胞株MC3T3-E1生物学性能的影响 | 第38-60页 |
1 前言 | 第38-40页 |
2 材料和方法 | 第40-45页 |
2.1 实验材料 | 第40-41页 |
2.1.1 主要仪器 | 第40页 |
2.1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
2.2 实验方法 | 第41-44页 |
2.2.1 成骨细胞株MC3T3-E1的细胞培养 | 第41页 |
2.2.2 成骨细胞株MC3T3-E1的传代培养 | 第41页 |
2.2.3 成骨细胞株MC3T3-E1的冻存和复苏 | 第41页 |
2.2.4 缓释PGE2对成骨细胞株MC3T3-E1增殖的影响 | 第41-42页 |
2.2.5 缓释PGE2对成骨细胞株MC3T3-E1分泌碱性磷酸酶(ALP)的影响 | 第42页 |
2.2.6 缓释PGE2对成骨细胞株MC3T3-E1基质矿化的影响的影响 | 第42-43页 |
2.2.7 缓释PGE2对成骨细胞株MC3T3-E1细胞周期的影响 | 第43页 |
2.2.8 缓释PGE2对成骨细胞株MC3T3-E1细胞凋亡的影响 | 第43-44页 |
2.3 统计学方法 | 第44-45页 |
3 结果 | 第45-56页 |
3.1 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1增殖的影响 | 第45-48页 |
3.1.1 羟基磷灰石浓度筛选 | 第45-46页 |
3.1.2 PGE2、PGE2+HAP、PGE2 微球对成骨细胞增殖影响的细胞形态学观察(见图 14) | 第46-48页 |
3.1.3 PGE2,PGE2+HAP和PGE2微球对成骨细胞增殖影响的OD值 | 第48页 |
3.2 缓释 PGE2 对小鼠成骨样细胞株 MC3T3-E1 分泌碱性磷酸酶(ALP)的影响 | 第48-49页 |
3.3 缓释PGE2对成骨样细胞株MC3T3-E1基质矿化程度的影响 | 第49-50页 |
3.3.1 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1基质矿化程度的影响低倍光镜下照片 | 第49-50页 |
3.3.2 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1基质矿化程度的影响矿化结节计数 | 第50页 |
3.4 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1细胞周期的影响 | 第50-54页 |
3.4.1 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1细胞周期的影响 | 第50-52页 |
3.4.2 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1细胞周期的影响 | 第52-54页 |
3.5 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1细胞凋亡的影响 | 第54-56页 |
3.5.1 缓释PEG2对成骨细胞凋亡影响 | 第54-55页 |
3.5.2 缓释PEG2对成骨细胞凋亡影响 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
第三部分 :缓释PGE2对成骨样细胞株MC3T3-E1成骨相关基因表达的影响 | 第60-92页 |
1 前言 | 第60-64页 |
1.1 成骨细胞特异性分化因子 | 第60-61页 |
1.2 即刻早期基因 | 第61-62页 |
1.3 成骨相关基因 | 第62-64页 |
2 实验材料和方法 | 第64-70页 |
2.1 实验材料 | 第64-65页 |
2.1.1 仪器和设备 | 第64页 |
2.1.2 试剂及材料 | 第64-65页 |
2.1.3 主要试剂的配制 | 第65页 |
2.1.4 总RNA提取前的准备工作 | 第65页 |
2.2 实验方法 | 第65-69页 |
2.2.1 引物设计 | 第65-66页 |
2.2.2 成骨细胞培养 | 第66页 |
2.2.3 RNA制备 | 第66-67页 |
2.2.4 RT反应 | 第67-68页 |
2.2.5 Real-TimePCR反应 | 第68页 |
2.2.6 基因检测 | 第68-69页 |
2.3 统计学分析 | 第69-70页 |
3 结果 | 第70-88页 |
3.1 总RNA纯度和完整性鉴定结果 | 第70页 |
3.2 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1转录因子表达的影响 | 第70-73页 |
3.2.1 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1Runx-2mRNA表达水平 | 第70-72页 |
3.2.2 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1OsterixmRNA表达水平 | 第72-73页 |
3.3 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1原癌基因表达的影响 | 第73-80页 |
3.3.1 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1c-fosmRNA表达水平 | 第73-75页 |
3.3.2 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1Fra-1mRNA表达水平 | 第75-76页 |
3.3.3 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1Fra-2mRNA表达水平 | 第76-77页 |
3.3.4 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1c-junmRNA表达水平 | 第77-79页 |
3.3.5 Real-timePCR检测成骨样细胞MC3T3-E1jun-DmRNA表达水平 | 第79-80页 |
3.4 缓释PGE2对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1成骨基因表达的影响 | 第80-88页 |
3.4.1 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1碱性磷酸酶(ALP)mRNA表达水平 | 第80-82页 |
3.4.2 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1COL-ImRNA表达水平 | 第82-83页 |
3.4.3 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1OPNmRNA表达水平 | 第83-85页 |
3.4.4 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平 | 第85-86页 |
3.4.5 Real-timePCR检测成骨样细胞株MC3T3-E1BSPmRNA表达水平 | 第86-88页 |
4 讨论 | 第88-91页 |
5 结论 | 第91-92页 |
本研究创新性的自我评价 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-100页 |
综述 | 第100-110页 |
参考文献 | 第105-110页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
个人简介 | 第112页 |