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大豆DREB/CBF转录因子GmDREB1A的克隆及功能鉴定

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
中英文缩略语表第8-13页
第一章 文献综述第13-27页
    1.1 植物应答非生物胁迫的分子机制第13-17页
        1.1.1 逆境诱导下发挥作用的功能蛋白第14-16页
        1.1.2 调控基因表达的调节蛋白第16-17页
    1.2 植物抗逆相关转录因子第17-22页
        1.2.1 转录因子的结构第17-18页
        1.2.2 植物抗逆相关转录因子第18-22页
    1.3 DREB/CBF 转录因子的研究进展第22-26页
        1.3.1 DREB/CBF 转录因子的结构特征第22-23页
        1.3.2 DREB/CBF 转录因子的生物学功能第23-24页
        1.3.3 DREB/CBF 转录因子的作用机制第24-25页
        1.3.4 DREB/CBF 转录因子在植物抗逆中的应用第25-26页
    1.4 本研究的目的与意义第26-27页
第二章 GmDREB1A 基因的克隆及序列分析第27-41页
    2.1 材料第27-28页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 载体及菌种第27页
        2.1.3 酶及试剂第27页
        2.1.4 主要仪器设备第27-28页
        2.1.5 引物合成及测序第28页
    2.2 方法第28-34页
        2.2.1 大豆总 RNA 的提取第28-29页
        2.2.2 cDNA 的合成第29页
        2.2.3 大豆 GmDREB1A 的 PCR 扩增第29页
        2.2.4 PCR 产物的回收第29-31页
        2.2.5 大肠杆菌 DH5α热激感受态细胞的制备第31页
        2.2.6 PCR 产物的克隆第31-32页
        2.2.7 冻融法转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞第32页
        2.2.8 重组质粒 DNA 提取第32-33页
        2.2.9 重组质粒 DNA 的酶切鉴定第33页
        2.2.10 GmDREB1A 基因序列的生物信息学分析第33-34页
    2.3 结果第34-38页
        2.3.1 GmDREB1A 基因 cDNA 全长序列的获得第34页
        2.3.2 GmDREB1A 基因的序列分析及其编码蛋白的结构功能预测第34-36页
        2.3.3 GmDREB1A 基因系统进化树分析及同源性比对第36-38页
    2.4 讨论第38-40页
    2.5 小结第40-41页
第三章 GmDREBIA 功能的初步分析第41-58页
    3.1 材料第41-42页
        3.1.1 植物材料第41页
        3.1.2 载体及菌株第41页
        3.1.3 酶及试剂第41页
        3.1.4 主要仪器设备第41页
        3.1.5 引物合成及测序第41-42页
    3.2 方法第42-50页
        3.2.1 原核表达第42-44页
        3.2.2 酵母单杂交第44-46页
        3.2.3 亚细胞定位第46-49页
        3.2.4 GmDREB1A 基因的表达模式分析第49-50页
    3.3 结果与分析第50-55页
        3.3.1 原核表达第50-52页
        3.3.2 GmDREB1A 在酵母中的转录激活活性鉴定第52-53页
        3.3.3 GmDREB1A 在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位分析第53-54页
        3.3.4 GmDREB1A 基因的表达模式分析第54-55页
    3.4 讨论第55-57页
    3.5 小结第57-58页
第四章 GmDREBIA 在拟南芥中的过量表达及其抗逆功能分析第58-77页
    4.1 材料第58-59页
        4.1.1 植物材料第58页
        4.1.2 载体及菌株第58页
        4.1.3 酶及试剂第58页
        4.1.4 主要仪器设备第58页
        4.1.5 引物合成及测序第58-59页
    4.2 方法第59-65页
        4.2.1 gateway 技术构建植物表达载体及农杆菌转化第59-60页
        4.2.2 拟南芥遗传转化第60-61页
        4.2.3 转基因拟南芥的筛选及鉴定第61-62页
        4.2.4 CTAB 法提取拟南芥叶片总 DNA第62页
        4.2.5 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗盐性研究第62-64页
        4.2.6 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗旱性研究第64-65页
    4.3 结果第65-75页
        4.3.1 植物表达载体的构建第65-66页
        4.3.2 GmDREB1A 转基因拟南芥植株的筛选及鉴定第66-67页
        4.3.3 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗盐性研究第67-70页
        4.3.4 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗旱性研究第70-75页
    4.4 讨论第75-76页
    4.5 小结第76-77页
第五章 结论第77-78页
参考文献第78-88页
附录第88-91页
作者简介及科研成果第91-92页
致谢第92页

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