中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
中英文缩略语表 | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-27页 |
1.1 植物应答非生物胁迫的分子机制 | 第13-17页 |
1.1.1 逆境诱导下发挥作用的功能蛋白 | 第14-16页 |
1.1.2 调控基因表达的调节蛋白 | 第16-17页 |
1.2 植物抗逆相关转录因子 | 第17-22页 |
1.2.1 转录因子的结构 | 第17-18页 |
1.2.2 植物抗逆相关转录因子 | 第18-22页 |
1.3 DREB/CBF 转录因子的研究进展 | 第22-26页 |
1.3.1 DREB/CBF 转录因子的结构特征 | 第22-23页 |
1.3.2 DREB/CBF 转录因子的生物学功能 | 第23-24页 |
1.3.3 DREB/CBF 转录因子的作用机制 | 第24-25页 |
1.3.4 DREB/CBF 转录因子在植物抗逆中的应用 | 第25-26页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
第二章 GmDREB1A 基因的克隆及序列分析 | 第27-41页 |
2.1 材料 | 第27-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 载体及菌种 | 第27页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第27页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2.1.5 引物合成及测序 | 第28页 |
2.2 方法 | 第28-34页 |
2.2.1 大豆总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
2.2.2 cDNA 的合成 | 第29页 |
2.2.3 大豆 GmDREB1A 的 PCR 扩增 | 第29页 |
2.2.4 PCR 产物的回收 | 第29-31页 |
2.2.5 大肠杆菌 DH5α热激感受态细胞的制备 | 第31页 |
2.2.6 PCR 产物的克隆 | 第31-32页 |
2.2.7 冻融法转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第32页 |
2.2.8 重组质粒 DNA 提取 | 第32-33页 |
2.2.9 重组质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第33页 |
2.2.10 GmDREB1A 基因序列的生物信息学分析 | 第33-34页 |
2.3 结果 | 第34-38页 |
2.3.1 GmDREB1A 基因 cDNA 全长序列的获得 | 第34页 |
2.3.2 GmDREB1A 基因的序列分析及其编码蛋白的结构功能预测 | 第34-36页 |
2.3.3 GmDREB1A 基因系统进化树分析及同源性比对 | 第36-38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
2.5 小结 | 第40-41页 |
第三章 GmDREBIA 功能的初步分析 | 第41-58页 |
3.1 材料 | 第41-42页 |
3.1.1 植物材料 | 第41页 |
3.1.2 载体及菌株 | 第41页 |
3.1.3 酶及试剂 | 第41页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第41页 |
3.1.5 引物合成及测序 | 第41-42页 |
3.2 方法 | 第42-50页 |
3.2.1 原核表达 | 第42-44页 |
3.2.2 酵母单杂交 | 第44-46页 |
3.2.3 亚细胞定位 | 第46-49页 |
3.2.4 GmDREB1A 基因的表达模式分析 | 第49-50页 |
3.3 结果与分析 | 第50-55页 |
3.3.1 原核表达 | 第50-52页 |
3.3.2 GmDREB1A 在酵母中的转录激活活性鉴定 | 第52-53页 |
3.3.3 GmDREB1A 在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位分析 | 第53-54页 |
3.3.4 GmDREB1A 基因的表达模式分析 | 第54-55页 |
3.4 讨论 | 第55-57页 |
3.5 小结 | 第57-58页 |
第四章 GmDREBIA 在拟南芥中的过量表达及其抗逆功能分析 | 第58-77页 |
4.1 材料 | 第58-59页 |
4.1.1 植物材料 | 第58页 |
4.1.2 载体及菌株 | 第58页 |
4.1.3 酶及试剂 | 第58页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第58页 |
4.1.5 引物合成及测序 | 第58-59页 |
4.2 方法 | 第59-65页 |
4.2.1 gateway 技术构建植物表达载体及农杆菌转化 | 第59-60页 |
4.2.2 拟南芥遗传转化 | 第60-61页 |
4.2.3 转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第61-62页 |
4.2.4 CTAB 法提取拟南芥叶片总 DNA | 第62页 |
4.2.5 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗盐性研究 | 第62-64页 |
4.2.6 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗旱性研究 | 第64-65页 |
4.3 结果 | 第65-75页 |
4.3.1 植物表达载体的构建 | 第65-66页 |
4.3.2 GmDREB1A 转基因拟南芥植株的筛选及鉴定 | 第66-67页 |
4.3.3 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗盐性研究 | 第67-70页 |
4.3.4 T3 代 GmDREB1A 转基因拟南芥的抗旱性研究 | 第70-75页 |
4.4 讨论 | 第75-76页 |
4.5 小结 | 第76-77页 |
第五章 结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-88页 |
附录 | 第88-91页 |
作者简介及科研成果 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |